Opracowanie narzędzia do oceny metabolizmu przewlekłej choroby nerek

Nie jest jasne, w jaki sposób profile metaboliczne poszczególnych osób zmieniają się w odpowiedzi na krótkoterminową interwencję z kwasami tłuszczowymi omega-3. Konieczne jest ustalenie średnich i odchyleń standardowych poziomów kwasów tłuszczowych omega-3 i związanych z nimi metabolitów u osób zdrowych oraz w różnych stanach chorobowych w celu lepszego zrozumienia mechanizmów związanych z metabolizmem lipidów w chorobach metabolicznych modyfikowanych przez kwasy omega -3 kwasy tłuszczowe. W szczególności projekt zbada profile metaboliczne zdrowych osób z grupy kontrolnej i pacjentów z nefropatią immunoglobuliny A (IgAN) przed i po interwencji kwasu tłuszczowego omega-3. Próbki pacjentów IgAN uzyskano od współpracowników z wcześniej zakończonego projektu. Zdrowe osoby zostały przetestowane w małej próbie pilotażowej przeprowadzonej w UC Davis, jak opisano poniżej.

• Dwunastu zdrowych ochotników, którzy chcieli i byli w stanie przyjmować 6 g oleju z ryb przez 6 tygodni, rekrutowano z ogólnej populacji UC Davis, w tym studentów, wykładowców i pracowników. Wolontariuszy rekrutowano drogą komunikacji osobistej podczas seminariów i innych zajęć związanych ze szkołą, a także poprzez ulotki rozwieszane na terenie kampusu.
• Skontaktowano się z ochotnikami i wyznaczono ich na wizytę przesiewową i zgodę. Osoby, które spełniły wszystkie kryteria kwalifikacyjne i podpisały formularz zgody, zostały następnie zaplanowane na podstawowe pobranie krwi i pobranie pierwszej porannej próbki moczu. Członek zespołu badawczego kontaktował się z każdym pacjentem na dzień przed planowanym terminem pierwszego badania, aby potwierdzić i przypomnieć pacjentowi o poście, pobraniu pierwszego porannego moczu oraz czasie i miejscu badania.
• Podczas każdej wizyty studyjnej uczestnicy przychodzili do Ragle Human Nutrition Center (1283 Academic Surge) między 7 a 9 rano po nocnym poście, w którym to momencie byli ważeni (ubrani, ale bez butów) na cyfrowej wadze, a ich wzrost był wymierzony. Zarejestrowany flebotomista pobrał 20 ml krwi przez nakłucie żyły w celu podstawowego pobrania krwi. W tym czasie badani przynieśli również pierwszą poranną próbkę moczu. Następnie badanym podano kapsułki z olejem rybim, które zostały oddzielone w torbie Ziploc na każdy tydzień interwencji. Badani przyjmowali kapsułki z olejem rybim w domu według własnego uznania, ale personel badawczy zasugerował, aby przyjmowali kapsułki po ostatnim posiłku w ciągu dnia i przed snem każdego wieczoru. Personel badawczy kontaktował się z uczestnikami przez cały czas trwania badania telefonicznie i/lub pocztą elektroniczną, aby upewnić się, że olej z ryb nie miał negatywnych skutków i zapewnić zgodność. Uczestników poinstruowano, aby rejestrowali swoją dietę poprzez 24-godzinne przypominanie o diecie przed podstawowym pobraniem krwi oraz w 3 dodatkowych punktach czasowych w trakcie badania.
• Natychmiast po pobraniu krwi naukowcy oddzielili krwinki czerwone i komórki jednojądrzaste krwi obwodowej (PBMC) od osocza, podzielili próbki na porcje, a następnie przechowali je w zamrażarce w temperaturze -70°C do przyszłej analizy.