Vývoj nástroje pro metabolické hodnocení chronického onemocnění ledvin

Není jasné, jak se mění metabolomické profily jedinců v reakci na krátkodobou intervenci s omega-3 mastnými kyselinami. Je nutné stanovit průměry a směrodatné odchylky v hladinách omega-3 mastných kyselin a jejich příbuzných metabolitů u zdravých jedinců a při různých chorobných stavech, abychom lépe porozuměli mechanismům souvisejícím s metabolismem lipidů u metabolických onemocnění, které jsou modifikovány omega -3 mastné kyseliny. Konkrétně bude projekt zkoumat metabolomické profily zdravých kontrol a pacientů s nefropatií imunoglobulinu A (IgAN) před a po intervenci s omega-3 mastnými kyselinami. Vzorky pacientů s IgAN byly získány od spolupracovníků z dříve dokončeného projektu. Zdravé subjekty byly testovány v malé pilotní studii provedené v UC Davis, jak je popsáno níže.

• Dvanáct zdravých dobrovolníků ochotných a schopných užívat 6 g rybího oleje po dobu 6 týdnů bylo rekrutováno z obecné populace UC Davis včetně studentů, vyučujících a zaměstnanců. Dobrovolníci byli získáváni osobní komunikací na seminářích a dalších školních aktivitách a také pomocí letáků vyvěšených v kampusu.
• Dobrovolníci byli kontaktováni a naplánováni na screening a souhlasnou návštěvu. Subjekty, které splnily všechna kritéria způsobilosti a podepsaly formulář souhlasu, byly poté naplánovány na základní odběr krve a první ranní vzorek moči. Člen výzkumného týmu kontaktoval každý subjekt den před prvním plánovaným datem studie, aby potvrdil a připomněl subjektu půst, odběr první ranní moči a čas a místo studie.
• Při každé studijní návštěvě přišli účastníci do Ragle Human Nutrition Center (1283 Academic Surge) mezi 7. a 9. hodinou ráno po nočním půstu, kdy byli zváženi (oblečení, ale bez bot) na digitální váze a jejich výška byla měřeno. Registrovaný flebotomista odebral 20 ml krve venepunkcí pro základní odběr krve. Subjekty také přinesly svůj první ranní vzorek moči v této době. Subjektům byly poté podávány kapsle s rybím olejem, které byly odděleny v sáčku Ziploc pro každý týden intervence. Subjekty užívaly kapsle s rybím olejem doma podle vlastního uvážení, ale pracovníci studie navrhli, aby si kapsle užívali po posledním jídle dne a před spaním každý večer. Pracovníci studie kontaktovali subjekty v průběhu studie telefonicky a/nebo e-mailem, aby se ujistili, že nedochází k nepříznivým účinkům rybího oleje, a zajistili dodržování. Subjekty byly instruovány, aby zaznamenaly svou stravu prostřednictvím 24hodinového opakování stravy před základním odběrem krve a ve 3 dalších časových bodech v průběhu studie.
• Ihned po odběru krve vědci oddělili červené krvinky a mononukleární buňky periferní krve (PBMC) z plazmy, vzorky rozdělily na alikvoty a poté je uložily do mrazáku -70 °C pro budoucí analýzu.