Efekty przeciwpłytkowe standaryzowanego ekstraktu z pomidorów u osób z nadciśnieniem

Projekt badania Badaniem objęto 82 pacjentów z nadciśnieniem tętniczym wysokiego ryzyka (44 mężczyzn i 38 kobiet), w wieku od 28 do 74 lat, przeprowadzonych w okresie od lipca 2015 do lutego 2017 roku w Klinice Nadciśnienia Tętniczego Uniwersytetu Medycznego w Poznaniu. Siedemnastu pacjentów zgłosiło rezygnację w trakcie badania. Zezwolenie nr. 377/15 na przeprowadzenie badania została opublikowana przez Komisję Etyki Uniwersytetu Medycznego w Poznaniu. Wszyscy pacjenci wyrazili świadomą zgodę na udział w badaniu. Pacjenci z pierwotnym nadciśnieniem tętniczym i wysokim ryzykiem sercowo-naczyniowym zostali losowo przydzieleni do jednej z dwóch grup. Grupa 1 (ASA) obejmowała 33 pacjentów, którzy otrzymywali rano kwas acetylosalicylowy w dawce 75 mg. Grupa 2 (STE) obejmowała 32 pacjentów otrzymujących standaryzowany ekstrakt pomidorowy (STE) (ZAAX, Sequia, Polska) w dawce 213 mg doustnie rano.

Pacjenci mieli dwie wizyty w ciągu 4 tygodni według schematu:

Wizyta 1: Podczas pierwszej wizyty pacjenci byli kwalifikowani do badania. Pacjenci z rozpoznanym wcześniej nadciśnieniem kierowani byli z poradni na oddział szpitalny. Po przyjęciu chorych z grupy wysokiego ryzyka sercowo-naczyniowego izolowano i uzyskiwano pisemne zgody.

Na podstawie stopnia zaawansowania nadciśnienia tętniczego, obecności czynników ryzyka i subklinicznych uszkodzeń narządowych, współwystępowania cukrzycy, powikłań sercowo-naczyniowych i przewlekłej choroby nerek oszacowano ryzyko sercowo-naczyniowe. Każdy pacjent z jednym lub dwoma czynnikami ryzyka i ciśnieniem tętniczym (BP) > 180/110 mmHg lub trzema lub więcej czynnikami ryzyka i BP >160/100 mmHg lub z obecnością uszkodzeń narządowych i BP >140/90 mmHg był sklasyfikowane jako grupa wysokiego ryzyka. Podczas badania nie obserwowano zmian w leczeniu towarzyszącym (leki obniżające poziom lipidów, przeciwnadciśnieniowe i przeciwcukrzycowe).

Pobrano liczne badania laboratoryjne i obrazowe, takie jak poziom aldosteronu i ARO zarówno przed, jak i po pionizacji, kreatyninę, mocznik, GFR, sód, potas, pro BNP, TSH, FT3, FT4 oraz 24-godzinny zbiór elektrolitów. Wykonano badanie ultrasonograficzne jamy brzusznej, tomografię komputerową jamy brzusznej oraz badanie dopplerowskie tętnic nerkowych w celu wykluczenia wtórnych przyczyn nadciśnienia tętniczego. Trzykrotnie wykonano kliniczne pomiary BP, a także ambulatoryjne monitorowanie ciśnienia krwi (ABPM) i echokardiografię. Pobrano próbki pełnej krwi i określono wyjściową agregację płytek krwi za pomocą analizatora VerifyNow firmy Accumetrics. W grupie 1 przebadano dwie próbki krwi pełnej do testu VerifyNow Aspirin. W grupie 2 przebadano cztery próbki krwi pełnej do testów VerifyNow Aspirin i P2Y12.

Wizyta 2: Po 4 tygodniach przyjmowania STE lub ASA pacjenci udali się do szpitala na drugą wizytę. Powtórzono wszystkie badania z wizyty 1, w tym testy hamowania agregacji płytek krwi. Próbki krwi pełnej pobierano 1-4 godziny po przyjęciu porannej dawki ASA lub STE z żyły obwodowej za pomocą igły o rozmiarze 21 lub większej w próżniowej probówce do pobierania częściowo wypełnionej 3,2% cytrynianem.

Charakterystyka standaryzowanego ekstraktu pomidorowego STE to rozpuszczalny w wodzie koncentrat pomidorowy, wolny od likopenu i tłuszczów, który zawiera 37 związków biologicznie czynnych o dobrze znanej budowie. Te bioaktywne związki zawierają nukleozydy (adenozyna, cytydyna, guanozyna, inozyna, AMP, GMP), polifenole, w tym flawonoidy (rutyna, kwercetyna, kemferol, luteolina, naryngenina) oraz kwasy fenolowe (chlorogenowy, kawowy, p-kumarowy, ferulowy).

W 2009 roku Europejski Urząd ds. Bezpieczeństwa Żywności (EFSA) zatwierdził rozpuszczalny w wodzie koncentrat pomidorowy (WSTC) jako suplement diety pomagający w utrzymaniu prawidłowej agregacji płytek krwi. EFSA zalecił stosowanie STE u zdrowych osób w wieku od 35 do 70 lat. Skuteczna dzienna dawka wynosiła 3 g związków bioaktywnych zawartych w syropie lub 65-150 mg w postaci proszku.

Ekstrakt ten wpływa na hamowanie agregacji za pośrednictwem ADP, tromboksanu, kolagenu, czynnika von Willebranda, trombiny oraz mediatorów stanu zapalnego. Ponadto blokuje receptor P2Y12 dla ADP oraz ogranicza wewnątrzkomórkowe ziarniste uwalnianie tromboksanu, ADP, selektyny P i czynnika 4 (PF4, platelet factor 4). Dodatkowo zapobiega aktywacji integryny αIIbβIII oraz hamuje aktywację receptora (GP)IIb/IIIa. Hamując receptor P2Y12 dla ADP, zwiększa aktywność cAMP, co skutkuje zmniejszeniem wewnątrzkomórkowego stężenia jonów wapnia. Hamowanie procesu wiązania kolagenu przez GP VI oraz czynnik von Willebranda z receptorem GP Ib oraz zmniejszenie aktywności fosfolipazy Cβ i Cy2 również zalicza się do antyagregacyjnego działania STE. Zjawiska te wpływają na kształt trombocytów i są odwracalne przy zachowaniu poziomu aktywności płytek krwi, który umożliwia agregację w przypadku uszkodzenia naczynia. ZAAX mogą stosować osoby z nadwrażliwością na salicylany i inne niesteroidowe leki przeciwzapalne, z astmą oskrzelową, z czynnym wrzodem trawiennym.

Badania wykazały, że STE hamuje aktywację procesów zapalnych śródbłonka, co zapobiega rozwojowi miażdżycy. STE zmniejsza produkcję cytokin zapalnych (TNF-α, IL-1β i IL-12) oraz zwiększa syntezę interleukiny 10, która ma właściwości przeciwzapalne.

Procedura testowa VerifyNow® Protokół badania obejmował pomiary reaktywności płytek krwi przy użyciu procedury testowej VerifyNow (Accumetrics Inc., USA). Ta metoda wykrywa aktywność płytek krwi poprzez pomiar agregacji płytek krwi w próbce krwi wystawionej na działanie określonego agonisty. Prowadzi to do zahamowania funkcji płytek krwi w odpowiedzi na terapię przeciwpłytkową. System VerifyNow to urządzenie do krwi pełnej, które wykonuje jakościowy pomiar indukowanej agregacji płytek krwi na podstawie wzrostu przepuszczalności światła. W badaniu wykorzystano dwa rodzaje zestawów testowych VerifyNow: VerifyNow Aspirin Test i VerifyNow P2Y12. Wyniki testu na aspirynę są podawane jako jednostki reakcji na aspirynę (ARU), które są obliczane jako funkcja szybkości agregacji. Wartości ARU mniejsze niż 550 wskazują na skuteczne działanie ASA, natomiast wartości > 550 ARU wskazują na brak działania leku. Test VerifyNow P2Y12 mierzy funkcję płytek krwi na podstawie zdolności aktywowanych płytek krwi do wiązania fibrynogenu i dostarcza informacji o nasileniu agregacji płytek krwi w jednostkach reaktywności receptora P2Y12 (PRU). Uważa się, że za optymalne działanie przeciwpłytkowe odpowiada zakres 95 – 208 PRU. Wysokie wartości PRU po podaniu leku wskazują na brak oczekiwanego działania przeciwpłytkowego.

Pomiary ciśnienia tętniczego U wszystkich pacjentów podczas każdej wizyty trzykrotnie wykonywano pomiary ciśnienia tętniczego w spoczynku, w pozycji leżącej, w warunkach standardowych oraz przy użyciu ciśnieniomierza naramiennego (Omron 705IT). Ambulatoryjne, 24-godzinne pomiary ciśnienia krwi (ABPM) przeprowadzono za pomocą 24-godzinnego ambulatoryjnego monitora ciśnienia krwi obwodowej firmy A&D. Częstotliwość pomiarów wynosiła co 15 minut w godzinach od 7:00 do 22:00 oraz co 30 minut w godzinach od 22:00 do 7:00.

Analiza statystyczna Analizy statystyczne przeprowadzono za pomocą programu Statistica w wersji 12.5. (StatSoft, Stany Zjednoczone). Ponieważ badane dane nie spełniały założenia rozkładu Gaussa (ocenianego metodą Shapiro-Wilka), zastosowano metody nieparametryczne. Do oceny różnic między wartościami początkowymi a wartościami uzyskanymi po zabiegu zastosowano test rang Wilcoxona dla czynników; skład masy ciała, ciśnienie krwi i agregacja płytek krwi. Do oceny różnic i korelacji między dwiema niezależnymi grupami zastosowano odpowiednio test U Manna-Whitneya i współczynnik korelacji rang Spearmana (Rs). Dane przedstawione na wykresach i tabelach zawierały mediany i rozstępy międzykwartyle. str