Wpływ uszkodzenia endometrium przed transferem zamrożonego zarodka na wskaźnik ciąż

Odpowiednie kobiety zostaną zaproszone do udziału w badaniu, a następnie uzyskana zostanie od nich podpisana i świadoma zgoda. Po uzyskaniu zgody pacjenta należy go włączyć do badania.

Gromadzenie danych:

Podczas pierwszej wizyty każdy pacjent zostanie poddany pełnemu badaniu klinicznemu oraz uzyskany zostanie szczegółowy wywiad lekarski. Każdy pacjent będzie posiadał formularz zapisu przypadku (CRF), w którym zapisane zostaną następujące dane.

• Numer pacjenta (zgodnie z harmonogramem randomizacji).
• Wiek, BMI.
• Przeszła historia medyczna i chirurgiczna.
• Czas trwania niepłodności.

Procedura:

Uraz endometrium:

Pojedyncze wywołane uszkodzenie zostanie wykonane na tylnym endometrium w 7. dniu cyklu przenoszenia przy użyciu zmodyfikowanego cewnika Cooka Protokół witryfikacji Zarodki zostaną najpierw załadowane roztworem równowagi zawierającym 7,5% glikolu etylenowego (EG) i 7,5% sulfotlenku dimetylu (DSMO) (Sigma-Aldrich) przez 5-10 minut w temperaturze pokojowej, a następnie roztworem do witryfikacji zawierającym 15% EG, 15% DSMO i 0,5 mol/l sacharozy przez 50-60 sekund w temperaturze pokojowej. Po zaobserwowaniu kurczenia się komórek zarodki będą szybko przechowywane w ciekłym azocie (LN) przez co najmniej 2 miesiące. Podczas podgrzewania zarodki zostaną usunięte z LN, a zarodki zostaną wystawione na działanie rozmrażającego roztworu zawierającego sacharozę w temperaturze 37°C przez 50-60 sekund, a następnie zarodki będą kolejno inkubowane w roztworach rozcieńczalników przed przeniesieniem.

Ocena i transfer rozmrożonych zarodków Po rozmrożeniu każdy zarodek zostanie poddany dwukrotnej ocenie, raz bezpośrednio pod kątem liczby przeżywających blastomerów i ponownie po 18 godzinach po rozmrożeniu w hodowli in vitro w celu oceny mitozy i liczby blastomerów. Zarodki zostaną uznane za przeżywające, jeśli >50% każdego blastomeru jest nienaruszone i wybrane do transferu wewnątrzmacicznego (w zależności od zarodków pacjentki, przeniesione zostaną 2 lub 3 zarodki).

Zarodki zostaną sklasyfikowane jako w pełni nienaruszone lub o doskonałej morfologii (100% komórek przeżyło z fragmentacją <10%) lub o dobrej morfologii (100% komórek przeżyło z fragmentacją 10%-20%), częściowo uszkodzone lub o słabej morfologii (≥50% komórek przeżyło z lub bez jakiejkolwiek fragmentacji) i zdegenerowanych zarodków (<50% komórek przeżyło). Tylko w pełni nienaruszone i częściowo uszkodzone zarodki zostaną przeniesione. Zdegenerowane lub zatrzymane embriony nie zostaną przeniesione.

Protokół przygotowania endometrium przed transferem zamrożonego zarodka (FET):

Istnieją różne protokoły dla cykli FET. Dotyczy to zarówno FET w „cyklu naturalnym”, jak i zamrożonych i rozmrożonych transferów zarodków w „cyklu wymiany hormonalnej”. Będziemy stosować hormonalne cykle zastępcze, ponieważ mają one lepsze wskaźniki sukcesu. Jednak niektóre kliniki oferują podejście FET oparte na naturalnym cyklu. Wskaźniki sukcesu są wyższe w przypadku wymiany hormonalnej lub „kontrolowanych” cykli FET.

Leki i leki w cyklu FET transferu zamrożonych zarodków

1. Agonista hormonu uwalniającego gonadotropinę (taki jak Lupron) zostanie podany, albo w połowie lutei (dzień 21) albo nakładając się na pigułkę antykoncepcyjną.
2. Regulacja w dół zostanie potwierdzona przez USG i badania krwi.
3. Walerianian estradiolu 2 mg dwa razy dziennie (doustnie) należy rozpocząć po okresie. Może być konieczne zwiększenie tej dawki po monitorowaniu grubości błony śluzowej macicy.
4. Gdy endometrium ma „dobrą” grubość (> 8 mm), zostanie uruchomiony progesteron (zastrzyki domięśniowe lub preparat dopochwowy).
5. Transfer zarodków planowany jest na 3-6 dni później - w zależności od etapu rozwoju zarodków do transferu.
6. Estrogen i progesteron będą kontynuowane w fazie lutealnej.
7. Test ciążowy zostanie wykonany 9-14 dni po transferze - w zależności od etapu rozwoju zastępowanych zarodków i preferencji kliniki niepłodności.
8. W przypadku ciąży estrogen i progesteron będą kontynuowane do około 10-15 tygodnia ciąży, a następnie odstawione od piersi.