Effetto della lesione endometriale prima del trasferimento di embrioni congelati sul tasso di gravidanza

Le donne idonee saranno invitate a partecipare allo studio, quindi verrà ottenuto da loro un consenso informato e firmato. Una volta ottenuto il consenso del paziente, questi devono essere inclusi nello studio.

Raccolta dati:

Durante la prima visita, tutti i pazienti saranno sottoposti a un esame clinico completo e verrà raccolta un'anamnesi dettagliata. Ogni paziente avrà un Case Record Form (CRF) in cui verranno registrati i seguenti dati.

• Numero del paziente (secondo il programma di randomizzazione).
• Età, indice di massa corporea.
• Anamnesi medica e chirurgica passata.
• Durata dell'infertilità.

Procedura:

Lesione endometriale:

Una singola lesione indotta verrà eseguita sull'endometrio posteriore il giorno 7 del ciclo di trasferimento utilizzando il protocollo del catetere di Cook modificato per la vitrificazione Gli embrioni verranno prima caricati con una soluzione di equilibrio contenente il 7,5% di glicole etilenico (EG) e il 7,5% di dimetilsolfossido (DSMO) (Sigma-Aldrich) per 5-10 minuti a temperatura ambiente e quindi con soluzione di vetrificazione contenente 15% EG, 15% DSMO e 0,5 mol/L di saccarosio per 50-60 secondi a temperatura ambiente. Dopo aver osservato il restringimento cellulare, gli embrioni verranno rapidamente conservati in azoto liquido (LN) per almeno 2 mesi. Al riscaldamento, gli embrioni verranno rimossi dal LN e gli embrioni verranno esposti alla soluzione di scongelamento contenente saccarosio alla temperatura di 37°C per 50-60 secondi e quindi gli embrioni verranno sequenzialmente incubati in soluzioni diluenti prima di essere trasferiti.

Valutazione e trasferimento degli embrioni scongelati Dopo lo scongelamento, ogni embrione verrà valutato due volte, una volta immediatamente per il numero di blastomeri sopravvissuti e un'altra dopo 18 ore dopo lo scongelamento in coltura in vitro per la valutazione della mitosi e del numero di blastomeri. Gli embrioni saranno considerati sopravvissuti se >50% di ciascun blastomero è intatto e selezionato per il trasferimento intrauterino (a seconda degli embrioni dei pazienti, verranno trasferiti 2 o 3 embrioni).

Gli embrioni saranno classificati come completamente intatti o con morfologia eccellente (100% di cellule sopravvissute con <10% di frammentazione) o buona morfologia (100% di cellule sopravvissute con 10%-20% di frammentazione), parzialmente danneggiati o scarsa morfologia (≥50% di cellule sopravvissute con o senza alcuna frammentazione) ed embrioni degenerati (<50% di cellule sopravvissute). Verranno trasferiti solo embrioni completamente intatti e parzialmente danneggiati. Gli embrioni degenerati o arrestati non verranno trasferiti.

Protocollo di preparazione dell'endometrio prima del trasferimento di embrioni congelati (FET):

Esistono diversi protocolli per i cicli FET. Questo è vero sia per i FET "a ciclo naturale" che per i trasferimenti di embrioni congelati-scongelati a "ciclo di sostituzione ormonale". Useremo cicli di sostituzione ormonale perché hanno migliori tassi di successo. Tuttavia, alcune cliniche offrono un approccio FET a ciclo naturale. Le percentuali di successo sono più alte con la sostituzione ormonale o cicli FET "controllati".

Medicinali e farmaci in un ciclo FET di trasferimento di embrioni congelati

1. Verrà somministrato un agonista dell'ormone di rilascio delle gonadotropine (come il lupron), a metà luteo (giorno 21) o in sovrapposizione con una pillola anticoncezionale.
2. La down-regolazione sarà confermata dagli ultrasuoni e dagli esami del sangue.
3. L'estradiolo valerato 2 mg due volte al giorno (per via orale) inizierà dopo il periodo. Potrebbe essere necessario aumentare questa dose dopo il monitoraggio dello spessore della mucosa uterina.
4. Quando l'endometrio ha uno spessore "buono" (> 8 mm), verrà avviato il progesterone (iniezione intramuscolare o un prodotto vaginale).
5. Il trasferimento dell'embrione verrà pianificato per 3-6 giorni dopo, a seconda dello stadio di sviluppo degli embrioni da trasferire.
6. Estrogeni e progesterone continueranno nella fase luteinica.
7. Il test di gravidanza verrà eseguito 9-14 giorni dopo il trasferimento, a seconda dello stadio di sviluppo degli embrioni sostituiti e delle preferenze della clinica per la fertilità.
8. In caso di gravidanza, gli estrogeni e il progesterone continueranno fino a circa 10-15 settimane di gravidanza e poi svezzeranno.