Ocena działania przeciwbakteryjnego diody laserowej i nanocząsteczek tlenku cynku w dezynfekcji ubytków

Niniejsze badanie zostanie przeprowadzone na dorosłych pacjentach uczęszczających na oddział stomatologii zachowawczej na Wydziale Medycyny Jamy Ustnej i Stomatologii Uniwersytetu w Kairze w Egipcie. Zabiegi przeprowadzi doktorantka Sarah Atef Khattab (B.D.S. 2011) z uniwersytetu w Kairze bez asystenta. Badacz ponosi ostateczną odpowiedzialność za wszystkie czynności związane z prowadzeniem projektu badawczego, w tym za rekrutację pacjentów, wyjaśnianie im i przeprowadzanie procedur.

A: Protokół wykopalisk:

Zęby pacjentów spełniających kryteria włączenia będą znieczulane, izolowane koferdamem. Ubytek otwarty za pomocą konwencjonalnych instrumentów obrotowych o dużej prędkości. Centralna biomasa próchnicotwórcza oraz powierzchowne partie martwiczej zębiny zostaną usunięte wiertłami okrągłymi. Zmiana próchnicza zostanie całkowicie usunięta na styku szkliwo/zębina. Procedura wykopywania zostanie zakończona, gdy tylko miękka i wilgotna zębina zostanie usunięta, a pozostała tkanka będzie skórzasta, ale nie trudna do zbadania. Próbka zębiny zostanie następnie pobrana z podstawy ubytku za pomocą sterylnej koparki łyżkowej jako punkt odniesienia do oceny bakteriologicznej. Następnie, po zastosowaniu którejkolwiek z interwencji, kolejna próbka zębiny zostanie pobrana za pomocą sterylnej koparki i przeniesiona do sterylnych probówek i przekazana do laboratorium w celu analizy mikrobiologicznej.

B. Zastosowanie zabiegów: b.1: dioda laserowa Każde ubytki będą naświetlane w trybie kontaktowym ciągłą falą promieniowania. Światło lasera jest przenoszone przez elastyczną końcówkę światłowodową 600µm za pomocą specjalnej rękojeści. Światłowód będzie przed każdym użyciem dezynfekowany 70% alkoholem etylowym i wprowadzany do ubytku na głębokość 1 milimetra ciągłym ruchem spiralnym zgodnie z ruchem wskazówek zegara od góry do podłogi i przeciwnie do ruchu wskazówek zegara w odwrotnym kierunku. Ta procedura poprawia dystrybucję światła laserowego wewnątrz ubytku i pozwala uniknąć nadmiernego wytwarzania ciepła na wewnętrznej powierzchni ubytku. Czas napromieniowania będzie wynosił 15 sekund i zostanie powtórzony 5 razy z 15-sekundowymi przerwami z kontaktem, zgodnie z instrukcjami producenta. Podczas tego badania moc wyjściowa zostanie ustawiona na 1,5 wata.

b.2: Nanocząsteczki tlenku cynku: Nanoproszek tlenku cynku zostanie zmieszany z etanolem i zastosowany w ubytku, gdzie etanol odparuje, podczas gdy nanocząsteczki tlenku cynku wnikają w próchnicowe dno ubytku.

UWAGA: W obu metodach przed aplikacją środka dezynfekującego pobierana jest próbka zębiny, następnie do ubytku wprowadzane są nanocząsteczki tlenku cynku i pozostawiane na 5 minut, po czym pobierana jest kolejna próbka. Druga próbka zostanie porównana z pierwszą próbką pobraną przed dezynfekcją ubytku pod względem liczby Streptococcus mutans.

c. Ocena wyniku: Próbki zębiny objętej próchnicą zostaną pobrane sterylnym ekskawatorem przed i po zastosowaniu obu interwencji. Próbki zębiny zostaną przeniesione do sterylnego pojemnika zawierającego 1 mililitr pożywki tioglikolowej używanej jako nośnik, następnie ten sterylny pojemnik będzie przechowywany w pojemniku na lód i zabrany do laboratorium mikrobiologicznego w celu przetworzenia w ciągu godziny przez innego badającego, który jest ślepy na rodzaj środka stosowanego po usunięciu próchnicy częściowej. Próbki będą worteksowane przez dwie minuty, rozcieńczone dziesiętnie i 0,1 ml zostanie wysiane na płytki z agarem Mitis Salivarius Bacytracin, płytki te będą inkubowane beztlenowo przez 48 godzin w temperaturze 37 stopni Celsjusza, a następnie w warunkach tlenowych przez 24 godziny w temperaturze pokojowej. Liczba kolonii zostanie wyrażona jako jednostki tworzące kolonie (CFU/ml) w porównaniu przed i po zastosowaniu środka przeciwbakteryjnego.