Niekonwencjonalne metody mikrobiologiczne w diagnostyce kandydemii

Wczesna diagnoza inwazyjnych zakażeń grzybiczych, szczególnie kandydemii i inwazyjnej kandydozy, jest niezbędna dla terminowego rozpoczęcia odpowiedniej terapii przeciwgrzybiczej i poprawy wyników leczenia pacjentów. Mimo że uważa się ją za obecny złoty standard diagnostyczny, hodowla krwi ma ograniczoną czułość i może pozostawać ujemna u znacznej części pacjentów z inwazyjną kandydozą. Ponadto, hodowlana identyfikacja patogenów grzybiczych jest czasochłonna i może opóźniać celowane decyzje terapeutyczne.

W celu przezwyciężenia tych ograniczeń opracowano alternatywne podejścia diagnostyczne, w tym wykrywanie biomarkerów ściany komórkowej grzybów oraz testy molekularne. Biomarkery surowicy, takie jak (1,3)-β-D-glukan, antygen mannanowy i przeciwciała przeciwko mannanowi, mogą zapewnić wcześniejszą wskazówkę dotyczącą inwazyjnego zakażenia Candida w porównaniu z hodowlą krwi. Molekularne wykrywanie DNA Candida za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) może również oferować wyższą czułość i krótszy czas realizacji.

To interwencyjne badanie diagnostyczne ocenia kliniczną i diagnostyczną przydatność zestawu połączonych niekonwencjonalnych testów mikrobiologicznych u dorosłych pacjentów z klinicznym podejrzeniem inwazyjnego/układowego zakażenia grzybiczego i czynnikami ryzyka inwazyjnej choroby grzybiczej (np. przyjęcie na OIT, cewniki żylne centralne, antybiotyki o szerokim spektrum, żywienie pozajelitowe, terapia kortykosteroidami, chemioterapia, immunosupresja, neutropenia, hemodializa, wentylacja mechaniczna i kolonizacja Candida).

Uczestnicy przechodzą rutynowe badanie hodowli krwi na obecność bakterii i grzybów jako część standardowej opieki klinicznej. Dodatkowo pobiera się próbki krwi do następujących testów diagnostycznych:

Surowica (1,3)-β-D-glukan

Antygen mannanowy i przeciwciała przeciwko mannanowi

PCR-owe wykrywanie DNA Candida z krwi pełnej z EDTA

Próbki są przetwarzane zgodnie z rutynowymi procedurami laboratoryjnymi w uczestniczących laboratoriach mikrobiologicznych. Izolaty Candida dodatnie w hodowli krwi są identyfikowane i przechowywane do dalszych analiz. Uczestnicy są kategoryzowani do grup badawczych na podstawie wyników hodowli krwi (grupa z dodatnią hodowlą krwi na Candida, grupa z dodatnią hodowlą krwi na bakterie oraz grupa z ujemną hodowlą krwi). Grupa kontrolna zdrowych ochotników może zostać włączona do celów porównawczych.

Głównym celem jest ustalenie, czy połączony niekonwencjonalny panel diagnostyczny poprawia wykrywanie kandydemii/inwazyjnej kandydozy w porównaniu z samą konwencjonalną hodowlą krwi. Cele drugorzędne obejmują ocenę wydajności diagnostycznej poszczególnych biomarkerów i testowania PCR, ocenę czasu do diagnozy oraz analizę wzorców odpowiedzi cytokin gospodarza związanych z różnymi patogenami grzybiczymi.

Ogólnym celem badania jest wsparcie rozwoju zoptymalizowanego algorytmu diagnostycznego dla inwazyjnej choroby grzybiczej, poprawa wczesnego wykrywania oraz zmniejszenie niepotrzebnego lub opóźnionego leczenia przeciwgrzybiczego u pacjentów w stanie krytycznym.