Metodi Microbiologici Non Convenzionali nella Diagnosi di Candidemia

La diagnosi precoce delle infezioni fungine invasive, in particolare della candidemia e della candidiasi invasiva, è essenziale per l'inizio tempestivo di un'adeguata terapia antifungina e per il miglioramento degli esiti dei pazienti. Nonostante sia considerata l'attuale standard diagnostico di riferimento, l'emocoltura ha una sensibilità limitata e può rimanere negativa in una proporzione sostanziale di pazienti con candidiasi invasiva. Inoltre, l'identificazione basata sulla coltura dei patogeni fungini è dispendiosa in termini di tempo e può ritardare le decisioni di trattamento mirato.

Per affrontare queste limitazioni, sono stati sviluppati approcci diagnostici alternativi, inclusi il rilevamento di biomarcatori della parete cellulare fungina e i saggi molecolari. I biomarcatori sierici come il (1,3)-β-D-glucano, l'antigene mannano e gli anticorpi anti-mannano possono fornire un'indicazione più precoce dell'infezione invasiva da Candida rispetto all'emocoltura. Anche il rilevamento molecolare del DNA di Candida mediante reazione a catena della polimerasi (PCR) può offrire una maggiore sensibilità e un tempo di risposta più rapido.

Questo studio diagnostico interventistico valuta l'utilità clinica e diagnostica di un pannello combinato di test microbiologici non convenzionali in pazienti adulti con sospetto clinico di infezione fungina invasiva/sistemica e fattori di rischio per malattia fungina invasiva (ad esempio, ricovero in terapia intensiva, cateteri venosi centrali, antibiotici ad ampio spettro, nutrizione parenterale, terapia con corticosteroidi, chemioterapia, immunosoppressione, neutropenia, emodialisi, ventilazione meccanica e colonizzazione da Candida).

I partecipanti si sottopongono al test di emocoltura di routine per batteri e funghi come parte della cura clinica standard. Inoltre, vengono raccolti campioni di sangue per i seguenti test diagnostici:

(1,3)-β-D-glucano sierico

Antigene mannano e anticorpi anti-mannano

Rilevamento basato su PCR del DNA di Candida da sangue intero EDTA

I campioni vengono processati secondo le procedure di laboratorio di routine nei laboratori di microbiologia partecipanti. Gli isolati di Candida positivi all'emocoltura vengono identificati e conservati per ulteriori analisi. I partecipanti vengono categorizzati in gruppi di studio in base ai risultati dell'emocoltura (gruppo con emocoltura positiva per Candida, gruppo con emocoltura positiva per batteri e gruppo con emocoltura negativa). Un gruppo di controllo di volontari sani può essere incluso a scopo comparativo.

L'obiettivo primario è determinare se il pannello diagnostico non convenzionale combinato migliora il rilevamento della candidemia/candidiasi invasiva rispetto alla sola emocoltura convenzionale. Gli obiettivi secondari includono la valutazione delle prestazioni diagnostiche dei singoli biomarcatori e del test PCR, la valutazione del tempo alla diagnosi e l'analisi dei modelli di risposta delle citochine dell'ospite associati a diversi patogeni fungini.

L'obiettivo generale dello studio è supportare lo sviluppo di un algoritmo diagnostico ottimizzato per la malattia fungina invasiva, migliorare il rilevamento precoce e ridurre il trattamento antifungino non necessario o ritardato nei pazienti critici.