Receptores C5a do complemento na hidradenite supurativa

A hidradenite supurativa é uma doença inflamatória crônica debilitante da pele folicular. A prevalência estimada da HS varia entre 1 e 4%, embora tenha sido uma doença subdiagnosticada até recentemente (Revuz J, 2009). Na fase aguda, os pacientes apresentam nódulos inflamados dolorosos (furúnculos) e abscessos na virilha, nádegas e axilas. Em um estágio tardio, ocorre formação e cicatrização do trato sinusal. As opções de tratamento incluem os antibióticos, anti-TNF e métodos cirúrgicos (excisões amplas e deroofing). No entanto, a maioria dos pacientes não responde ou responde apenas parcial ou temporariamente aos tratamentos (von der Werth JM, 2001; Napolitano M, 2017; Nazary M, 2011; van der Zee HH, 2012).

A patogênese da HS é amplamente desconhecida, e as possíveis causas incluem glândula apócrina ou folículo piloso obstruído, sudorese excessiva, disfunção androgênica e distúrbios genéticos. Respostas de citocinas defeituosas e a infiltração de uma variedade de células imunes sugerem a natureza autoinflamatória da doença (Giamarellos-Bourboulis EJ, 2007; van der Zee HH; 2011; van der Zee HH, 2012), o que está de acordo com a melhora significativa observado em pacientes que receberam o bloqueador do fator de necrose tumoral-a (TNF-a) adalimumabe (Kimball AB, 2016). Os neutrófilos foram identificados em lesões cutâneas e são considerados o principal tipo de célula a produzir pus. O complemento C5a é um importante fator quimiotático que estimula a infiltração de neutrófilos. O papel do C5a começou recentemente a ser estudado no HS. (Blok JL, 2016; Kanni T, 2018). Um estudo aberto de fase 2 demonstrou que uma taxa de resposta clínica de HS de 50% foi alcançada em até 83% dos pacientes que receberam um anticorpo C5a (IFX-1, NCT 03001622). Assim, direcionar a sinalização C5a pode representar uma estratégia terapêutica promissora na HS.

A maioria dos efeitos do C5a resulta da ligação ao receptor canônico 5a do complemento 1, C5aR. No entanto, existe um segundo receptor C5a, C5L2, cujas funções ainda são controversas. Propriedades pró e anti-inflamatórias foram propostas para C5L2. Esses resultados contraditórios podem depender de condições fisiológicas ou patológicas específicas (Zhang T, 2017). ChemoCentryx tem uma série de inibidores potentes e seletivos de C5aR de pequena molécula (C5aRi) que estão sendo desenvolvidos para doenças inflamatórias, como vasculite associada a ANCA, glomerulopatia C3 e HS. Nesta proposta, usaremos esses C5aRi para examinar os efeitos diferenciais do direcionamento de C5aR.

Design de estudo

Um sistema de cultura de pele ex vivo será utilizado para examinar os efeitos da inibição de C5aR na ativação de neutrófilos/atividades inflamatórias. Biópsias de pele lesional e perilesional de quatro milímetros (4 mm) serão retiradas de excisões de pele de 40 pacientes com conhecida Hidradenite Supurativa. O material de excisão de pele excedente do tratamento "deroofment" de pacientes com HS será usado. Biópsias peri-lesional e lesional serão coletadas para comparação. Essas amostras serão entregues à ChemoCentryx para análise direta ou tratamento com inibidores de C5a e/ou C5a. A análise incluirá, mas não se limitará à análise histológica, examinando populações de células imunes e marcadores de superfície, níveis de expressão de proteínas e genes de fatores de complemento, citocinas e quimiocinas. Citometria de fluxo, imuno-histoquímica, ELISA e outros ensaios padrão serão utilizados para essas análises. Esses estudos estenderão os estudos em andamento com o Dr. Kavita e colegas e testarão a hipótese de que a ativação contínua de neutrófilos e outros leucócitos que expressam C5a nas lesões cutâneas de pacientes com HS contribuem para o dano tecidual.

Planejamos coletar amostras de plasma de 40 pacientes com HS com doença ativa. Todas as coletas de amostras seguirão um protocolo bem definido, com no máximo 30ml de sangue coletado. As amostras serão imediatamente transportadas para o ChemoCentryx para processamento. Populações de células imunes, níveis de expressão de C5aR e outros fatores relacionados, respostas a estímulos ex vivo e outras características das células sanguíneas serão examinadas. Plasma e soro serão coletados e analisados ​​quanto aos níveis de fatores do complemento, citocinas e quimiocinas. As amostras de plasma também serão usadas para estimular células imunes purificadas de doadores saudáveis. O inibidor de C5a e C5aR será usado para determinar o papel de C5aR nesses ensaios in vitro.

Os participantes serão consentidos e inscritos para uma única visita inicial do estudo com coleta de sangue e/ou tecido cutâneo. A conclusão desta visita será considerada o fim da participação do indivíduo no estudo. Os participantes podem, no entanto, a critério do investigador principal, ser consentidos e inscritos novamente para uma visita de estudo futura com coleta de sangue e/ou tecido cutâneo. Os participantes reinscritos manterão seu código inicial do estudo e as amostras coletadas terão a data e o número da visita rotulados.