Receptory C5a dopełniacza w Hidradenitis Suppurativa

Hidradenitis suppurativa jest wyniszczającą przewlekłą zapalną chorobą mieszków włosowych. Szacowana częstość występowania HS waha się między 1 a 4%, mimo że do niedawna była to choroba niedodiagnozowana (Revuz J, 2009). W ostrej fazie pacjenci zgłaszają się z bolesnymi zapalnymi guzkami (czyrakami) i ropniami w pachwinach, pośladkach i pachach. W późnym stadium dochodzi do powstawania i bliznowacenia zatok. Możliwości leczenia obejmują antybiotykoterapię, leki anty-TNF oraz metody chirurgiczne (szerokie wycięcia i deroofing). Jednak większość pacjentów nie reaguje na leczenie lub reaguje tylko częściowo lub tymczasowo (von der Werth JM, 2001; Napolitano M, 2017; Nazary M, 2011; van der Zee HH, 2012).

Patogeneza HS jest w dużej mierze nieznana, a możliwe przyczyny to zatkany gruczoł apokrynowy lub mieszek włosowy, nadmierne pocenie się, dysfunkcja androgenów i zaburzenia genetyczne. Wadliwe odpowiedzi cytokin i naciek różnych komórek odpornościowych sugerują autozapalny charakter choroby (Giamarellos-Bourboulis EJ, 2007; van der Zee HH; 2011; van der Zee HH, 2012), co jest zgodne ze znaczną poprawą zaobserwowano u pacjentów, którym podawano bloker czynnika martwicy nowotworu a (TNF-a) adalimumab (Kimball AB, 2016). Neutrofile zostały zidentyfikowane w zmianach skórnych i są uważane za główny typ komórek produkujących ropę. Dopełniacz C5a jest głównym czynnikiem chemotaktycznym, który stymuluje naciek neutrofili. Niedawno zaczęto badać rolę C5a w RO. (Blok JL, 2016; Kanni T, 2018). Otwarte badanie fazy 2 wykazało, że u 83% pacjentów otrzymujących przeciwciało C5a (IFX-1, NCT 03001622) uzyskano odsetek odpowiedzi klinicznych na poziomie 50% HS. Zatem celowanie w sygnalizację C5a może stanowić obiecującą strategię terapeutyczną w HS.

Większość efektów C5a wynika z wiązania z kanonicznym receptorem 1 dopełniacza 5a, C5aR. Istnieje jednak drugi receptor C5a, C5L2, którego rola jest nadal kontrowersyjna. Dla C5L2 zaproponowano zarówno właściwości pro-, jak i przeciwzapalne. Te sprzeczne wyniki mogą zależeć od określonych warunków fizjologicznych lub patologicznych (Zhang T, 2017). ChemoCentryx zawiera serię silnych i selektywnych małocząsteczkowych inhibitorów C5aR (C5aRi), które są opracowywane dla chorób zapalnych, takich jak zapalenie naczyń związane z ANCA, glomerulopatia C3 i HS. W tej propozycji wykorzystamy te C5aRi do zbadania zróżnicowanych efektów celowania w C5aR.

Projekt badania

System hodowli skóry ex vivo zostanie wykorzystany do zbadania wpływu hamowania C5aR na aktywację/aktywność zapalną neutrofili. Z wycinków skóry 40 pacjentów ze stwierdzonym Hidradenitis Suppurativa zostaną pobrane 4-milimetrowe (4 mm) biopsje zmian skórnych i okolic zmian skórnych. Wykorzystany zostanie nadmiarowy materiał do wycięcia skóry z leczenia „deroofment” pacjentów z HS. Dla porównania zostaną zebrane biopsje okołozmianowe i zmiany chorobowe. Próbki te zostaną dostarczone do ChemoCentryx w celu bezpośredniej analizy lub leczenia inhibitorami C5a i/lub C5a. Analiza obejmie między innymi analizę histologiczną, badanie populacji komórek odpornościowych i markerów powierzchniowych, poziomów ekspresji białek i genów czynników dopełniacza, cytokin i chemokin. Do tych analiz zostanie wykorzystana cytometria przepływowa, immunohistochemia, ELISA i inne standardowe testy. Badania te poszerzą trwające badania z dr Kavitą i współpracownikami i przetestują hipotezę, że ciągła aktywacja neutrofili i innych leukocytów wykazujących ekspresję C5a w zmianach skórnych pacjentów z HS przyczynia się do uszkodzenia tkanek.

Planujemy pobrać próbki osocza od 40 pacjentów z HS z aktywną chorobą. Wszystkie pobieranie próbek będzie odbywać się zgodnie z dobrze zdefiniowanym protokołem, z maksymalnie 30 ml zebranej krwi. Próbki zostaną natychmiast przetransportowane do ChemoCentryx w celu przetworzenia. Zbadane zostaną populacje komórek odpornościowych, poziomy ekspresji C5aR i innych pokrewnych czynników, odpowiedzi na stymulacje ex vivo oraz inne cechy komórek krwi. Osocze i surowica zostaną pobrane i przeanalizowane pod kątem poziomów czynników dopełniacza, cytokin i chemokin. Próbki osocza zostaną również wykorzystane do stymulacji komórek odpornościowych oczyszczonych od zdrowych dawców. Inhibitor C5a i C5aR zostanie użyty do określenia roli C5aR w tych testach in vitro.

Uczestnicy otrzymają zgodę i zostaną zapisani na jedną wstępną wizytę badawczą z pobraniem krwi i/lub tkanki skórnej. Zakończenie tej wizyty będzie uważane za zakończenie udziału danej osoby w badaniu. Uczestnicy mogą jednak, według uznania głównego badacza, uzyskać zgodę i zostać ponownie zapisani na przyszłą wizytę studyjną z pobraniem krwi i/lub tkanki skórnej. Ponownie zarejestrowani uczestnicy zachowają swój początkowy kod badania, a pobrane próbki będą oznaczone datą i numerem wizyty.