Recettori del complemento C5a nell'idrosadenite suppurativa

L'idrosadenite suppurativa è una malattia follicolare infiammatoria cronica della pelle debilitante. La prevalenza stimata dell'HS varia tra l'1 e il 4%, anche se fino a poco tempo fa era una malattia sottodiagnosticata (Revuz J, 2009). Nella fase acuta, i pazienti presentano noduli infiammati dolorosi (foruncoli) e ascessi all'inguine, ai glutei e alle ascelle. In una fase avanzata si verifica la formazione del tratto sinusale e la cicatrizzazione. Le opzioni terapeutiche comprendono gli antibiotici, l'anti-TNF ei metodi chirurgici (ampie escissioni e deroofing). Tuttavia, la maggior parte dei pazienti non risponde o risponde solo parzialmente o temporaneamente ai trattamenti (von der Werth JM, 2001; Napolitano M, 2017; Nazary M, 2011; van der Zee HH, 2012).

La patogenesi dell'HS è in gran parte sconosciuta e le possibili cause includono l'ostruzione della ghiandola apocrina o del follicolo pilifero, l'eccessiva sudorazione, la disfunzione degli androgeni e le malattie genetiche. Le risposte citochiniche difettose e l'infiltrazione di una varietà di cellule immunitarie suggeriscono la natura autoinfiammatoria della malattia (Giamarellos-Bourboulis EJ, 2007; van der Zee HH; 2011; van der Zee HH, 2012), che è in linea con il significativo miglioramento osservato in pazienti a cui è stato somministrato adalimumab, un bloccante del fattore di necrosi tumorale-a (TNF-a) (Kimball AB, 2016). I neutrofili sono stati identificati nelle lesioni cutanee e sono considerati il ​​principale tipo di cellula per la produzione di pus. Il complemento C5a è un importante fattore chemiotattico che stimola l'infiltrazione dei neutrofili. Il ruolo di C5a ha appena iniziato a essere studiato nell'HS. (Blok JL, 2016; Kanni T, 2018). Uno studio di fase 2 in aperto ha dimostrato che un tasso di risposta clinica dell'HS del 50% è stato raggiunto fino all'83% dei pazienti che ricevevano un anticorpo C5a (IFX-1, NCT 03001622). Pertanto, il targeting della segnalazione C5a può rappresentare una promettente strategia terapeutica nell'HS.

La maggior parte degli effetti C5a deriva dal legame con il recettore canonico del complemento 5a 1, C5aR. Tuttavia, esiste un secondo recettore C5a, C5L2, i cui ruoli sono ancora controversi. Per C5L2 sono state proposte proprietà sia pro che antinfiammatorie. Questi risultati contraddittori possono dipendere da specifiche condizioni fisiologiche o patologiche (Zhang T, 2017). ChemoCentryx dispone di una serie di potenti e selettivi inibitori C5aR (C5aRi) a piccole molecole che vengono sviluppati per malattie infiammatorie come la vasculite associata ad ANCA, la glomerulopatia C3 e l'HS. In questa proposta, utilizzeremo questi C5aRi per esaminare gli effetti differenziali del targeting C5aR.

Progettazione dello studio

Un sistema di coltura cutanea ex vivo sarà utilizzato per esaminare gli effetti dell'inibizione di C5aR sull'attivazione/attività infiammatoria dei neutrofili. Verranno prelevate biopsie cutanee lesionali e perilesionali di quattro millimetri (4 mm) da escissioni cutanee di 40 pazienti con idrosadenite suppurativa nota. Verrà utilizzato il materiale di escissione cutanea in eccesso derivante dal trattamento di "deroofment" dei pazienti affetti da HS. Le biopsie peri-lesionali e lesionali saranno raccolte per il confronto. Questi campioni verranno consegnati a ChemoCentryx per l'analisi diretta o il trattamento con inibitori C5a e/o C5a. L'analisi includerà, ma non solo, l'analisi istologica, l'esame delle popolazioni di cellule immunitarie e dei marcatori di superficie, dei livelli di espressione proteica e genica dei fattori del complemento, delle citochine e delle chemochine. Per queste analisi verranno utilizzati citometria a flusso, immunoistochimica, ELISA e altri test standard. Questi studi estenderanno gli studi in corso con il Dr. Kavita e colleghi e verificheranno l'ipotesi che la continua attivazione dei neutrofili e di altri leucociti che esprimono C5a nelle lesioni cutanee dei pazienti affetti da HS contribuisca al danno tissutale.

Abbiamo in programma di raccogliere campioni di plasma da 40 pazienti affetti da HS con malattia attiva. Tutta la raccolta dei campioni seguirà un protocollo ben definito, con un massimo di 30 ml di sangue raccolto. I campioni verranno immediatamente trasportati a ChemoCentryx per l'elaborazione. Verranno esaminate le popolazioni di cellule immunitarie, i livelli di espressione di C5aR e altri fattori correlati, le risposte alle stimolazioni ex vivo e altre caratteristiche delle cellule del sangue. Il plasma e il siero saranno raccolti e analizzati per i livelli di fattori del complemento, citochine e chemochine. I campioni di plasma saranno utilizzati anche per stimolare le cellule immunitarie purificate da donatori sanitari. L'inibitore di C5a e C5aR sarà utilizzato per determinare il ruolo di C5aR in questi saggi in vitro.

I partecipanti saranno acconsentiti e arruolati per una singola visita di studio iniziale con raccolta di sangue e/o tessuto cutaneo. Il completamento di questa visita sarà considerato la fine della partecipazione dell'individuo allo studio. I partecipanti possono, tuttavia, a discrezione del ricercatore principale, essere acconsentiti e arruolati nuovamente per una futura visita di studio con prelievo di sangue e/o tessuto cutaneo. I partecipanti nuovamente iscritti manterranno il loro codice di studio iniziale e i campioni raccolti saranno etichettati con data e numero di visita.