Nova técnica de diluição de isótopos para avaliar o status da vitamina A

Fundo:

Não existe um método confiável para avaliação de vitamina A (VA) para lactentes e crianças pequenas. A concentração sérica de VA não é um indicador autêntico do status de VA, enquanto os métodos existentes de diluição de isótopos de deutério-VA para determinar o status de VA de todo o corpo requerem 3 semanas e não são aplicáveis ​​a bebês e crianças. O grupo de pesquisa do investigador desenvolveu recentemente uma nova equação simplificada para medir o tamanho do pool de VA em 4-5 dias, correlacionada com o valor predito pelo modelo compartimental e estimar o tamanho do pool de VA em adultos com alta precisão. Neste estudo, validamos o método em lactentes saudáveis ​​e lactentes com condição inflamatória.

Hipótese:

O estado de AV de corpo inteiro em bebês e crianças pode ser estimado sem considerar a taxa catabólica fracionada no contexto de uma condição inflamatória

Objetivos específicos:

Neste estudo, os pesquisadores propõem determinar a equação do ponto de tempo inicial para avaliar o tamanho do pool de VA em bebês com ou sem condição inflamatória usando análise compartimental baseada em modelo da fração de 13C10-VA e 13C4-VA derivados de dose oral no plasma ao longo tempo.

Métodos:

Um total de 183 bebês (de 9 a 18 meses de idade) participarão deste estudo nas duas fases seguintes do "estudo Super Kid" que garantem não mais do que 2 amostras de sangue venoso de cada bebê, embora vários pontos de tempo (em menos 4 assuntos / ponto de tempo) durante um período de estudo de 28 dias estará disponível para modelagem matemática. Neste estudo, os investigadores usarão dois isotópicos diferentes de vitamina A estável, por exemplo, acetato de 13C10-retinil e acetato de 13C4-retinil. 400 μg desses isótopos, dissolvidos em 0,5 mL de óleo de girassol, serão fornecidos diretamente na boca da criança usando uma pipeta de substituição direta. As mães serão solicitadas a amamentar seus bebês após a administração oral para aumentar a absorção da vitamina A marcada. A atividade específica de 13C10- e 13C4- acetato de retinol nas amostras de sangue será medida por cromatografia líquida-espectrometria de massa tandem (LC/MS/MS ). Serão utilizados questionários dietéticos e de morbidade. Os investigadores também usarão as vacinas PENTA como um meio de induzir inflamação controlada (imita de perto a infecção natural). PENTA é uma combinação de cinco diferentes antígenos vacinais (Hepatite B (HBV)/Haemophilus influenza tipo b (Hib)/Tétano-Difteria-pertussis de células inteiras (TDwP)). Esta vacinação é benéfica para os lactentes, uma vez que a Organização Mundial de Saúde recomenda uma dose de vacinação de reforço. No final do estudo, as vacinas PENTA também serão fornecidas aos bebês do estudo no grupo "sem vacina".

(A) 115 bebês serão inscritos aleatoriamente em 16 grupos, 40 bebês estarão no primeiro grupo, enquanto outros bebês serão designados nos outros 15 grupos (n = 5/grupo). No dia 0 (às 0h), todos os lactentes (n=115) receberão uma dose oral de acetato de 13C10-retinil. Amostras de sangue (5 mL) serão coletadas das 6h ao 16º dia de dosagem em 9 pontos de tempo diferentes. No dia 16 (às 0h), 50% dos lactentes (n=20) selecionados aleatoriamente no primeiro grupo, bem como 30 lactentes nos outros 6 grupos, receberão vacinas PENTA, enquanto os outros 50% lactentes (n=20) no primeiro grupo, assim como 45 lactentes nos outros 9 grupos, não receberão vacinas. 24 horas após a vacinação (no dia 17) uma amostra de sangue de picada no dedo será obtida das crianças do grupo vacinado para medir a PCR (QuikRead go, Orion, Finlândia). Os lactentes que não desenvolverem inflamação (PCR > 5mg/L) após a vacinação com PENTA serão excluídos do estudo. No dia 17 (às 0h), todos os lactentes (n=115) receberão outra dose oral de acetato de 13C4-retinil. Amostras de sangue (5 mL) serão coletadas do dia 16 ao dia 28 em 11 pontos de tempo diferentes para cada um dos bebês vacinados e não vacinados. Este estudo também avaliará a absorção de retinol isotópico determinando no total de fezes excretadas até 72 h após a dosagem de isótopos em uma subamostra de lactentes

(B) 68 lactentes serão inscritos nesta fase. Destes, 28 lactentes serão divididos aleatoriamente em 7 grupos (n=4/grupo). Eles receberão vacinas PENTA no dia -1 e no dia seguinte (dia 0) receberão uma dose oral de acetato de 13C4-retinil. Amostras de sangue (5mL) serão coletadas do dia 1 ao dia 28 em 8 momentos diferentes. Em um projeto separado, 40 bebês receberão uma dose oral de acetato de 13C10-retinil no dia 0 e amostras de sangue (5mL) serão coletadas no dia 4. No dia 7, todos receberão outra dose oral de acetato de 13C4-retinil (400 μg, dissolvido em 0,5 mL de óleo de girassol). No dia 10, os bebês receberão vacinas PENTA (n=30) ou nenhuma vacina (n=10) e 1 dia após a vacinação, amostras de sangue (5 mL) serão obtidas de bebês que desenvolverem inflamação (CRP> 5mg/L) no grupo de vacina e também de lactentes no grupo de controle (dia 11).

Medidas de resultado:

A equação do ponto de tempo inicial para avaliar o tamanho do pool de VA em um grupo de bebês com ou sem inflamação