Nová technika ředění izotopů k posouzení stavu vitaminu A

Pozadí:

Neexistuje žádná spolehlivá metoda pro hodnocení vitaminu A (VA) u kojenců a malých dětí. Koncentrace VA v séru není autentickým indikátorem stavu VA, zatímco stávající metody ředění izotopu deuteria a izotopu VA k určení stavu VA celého těla vyžadují 3 týdny a nejsou použitelné pro kojence a děti. Výzkumná skupina výzkumníka nedávno vyvinula novou zjednodušenou rovnici pro měření velikosti VA poolu za 4-5 dní, korelovanou s hodnotou předpokládanou kompartmentovým modelem a odhadem velikosti VA poolu u dospělých s vysokou přesností. V této studii ověřujeme metodu u zdravých kojenců a kojenců se zánětlivým stavem.

Hypotéza:

Stav VA celého těla u kojenců a dětí lze odhadnout bez zohlednění frakční katabolické rychlosti v kontextu zánětlivého stavu

Specifické cíle:

V této studii výzkumníci navrhují stanovit rovnici časného časového bodu pro hodnocení velikosti VA poolu u kojenců se zánětlivým stavem nebo bez něj pomocí modelové kompartmentové analýzy z frakce 13C10-VA a 13C4-VA v plazmě pocházející z perorální dávky. čas.

Metody:

Celkem 183 kojenců (ve věku 9–18 měsíců) se zúčastní této studie v následujících dvou fázích „Super Kid studie“, která zajistí maximálně 2 vzorky žilní krve od každého kojence, i když v několika časových bodech (v pro matematické modelování budou k dispozici alespoň 4 subjekty / časový bod) během 28denního studijního období. V této studii budou výzkumníci používat dva různé stabilní izotopové vitaminy A, např. 13C10-retinylacetát a 13C4-retinylacetát. 400 μg těchto izotopů rozpuštěných v 0,5 ml slunečnicového oleje bude poskytnuto přímo do úst dítěte pomocí pipety s přímou výměnou. Matky budou požádány, aby kojily své dítě po perorálním podání, aby se zvýšila absorpce značeného vitaminu A. Specifická aktivita 13C10- a 13C4-retinylacetátu ve vzorcích krve bude měřena kapalinovou chromatografií-tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC/MS/MS ). Budou použity dietní a morbidní dotazníky. Vyšetřovatelé budou také používat vakcíny PENTA jako prostředek k vyvolání kontrolovaného zánětu (což napodobuje přirozenou infekci). PENTA je kombinací pěti různých antigenů vakcíny (hepatitida B (HBV)/ Haemophilus influenza typu b (Hib) / tetanus-záškrt-celobuněčný černý kašel (TDwP)). Toto očkování je pro kojence prospěšné, protože Světová zdravotnická organizace doporučuje přeočkovací dávku. Na konci studie budou vakcíny PENTA poskytnuty také studovaným kojencům ve skupině „bez vakcíny“.

(A) 115 kojenců bude náhodně zařazeno do 16 skupin, z toho 40 kojenců bude v první skupině, zatímco ostatní kojenci budou zařazeni do dalších 15 skupin (n=5/skupina). V den 0 (v 0h) dostanou všichni kojenci (n=115) orální dávku 13C10-retinylacetátu. Vzorky krve (5 ml) budou odebrány od 6 hodin do 16. dne dávkování v 9 různých časových bodech. V den 16 (v 0 hodin) náhodně vybraných 50 % kojenců (n=20) v první skupině, stejně jako 30 kojenců v dalších 6 skupinách, dostane vakcíny PENTA, zatímco ostatních 50 % kojenců (n=20) v první skupině, stejně jako 45 kojenců v dalších 9 skupinách, neobdrží žádné vakcíny. 24 hodin po vakcinaci (17. den) bude od kojenců ve očkované skupině odebrán vzorek krve z prstu pro měření CRP (QuikRead go, Orion, Finsko). Kojenci, u kterých se po vakcinaci PENTA nerozvine zánět (CRP > 5 mg/l), budou ze studie vyloučeni. V den 17 (v 0h) dostanou všichni kojenci (n=115) další perorální dávku 13C4-retinylacetátu. Vzorky krve (5 ml) budou odebírány ode dne 16 do dne 28 v 11 různých časových bodech pro každé z očkovaných a neočkovaných dětí. Tato studie bude také hodnotit absorpci izotopového retinolu stanovením celkové vyloučené stolice až 72 hodin po podání izotopu u dílčího vzorku kojenců.

(B) Do této fáze bude zapsáno 68 kojenců. Z nich bude 28 kojenců rozděleno náhodně do 7 skupin (n=4/skupina). V den -1 dostanou vakcíny PENTA a další den (den 0) dostanou perorální dávku 13C4-retinylacetátu. Vzorky krve (5 ml) budou odebírány ode dne 1 do dne 28 v 8 různých časových bodech. V samostatném provedení dostane 40 kojenců perorální dávku 13C10-retinylacetátu v den 0 a vzorky krve (5 ml) budou odebrány v den 4. V den 7 dostanou všichni další perorální dávku 13C4-retinylacetátu (400 μg, rozpuštěného v 0,5 ml slunečnicového oleje). 10. den dostanou kojenci vakcíny PENTA (n=30) nebo žádnou vakcínu (n=10) a 1 den po očkování budou odebrány vzorky krve (5 ml) od kojenců, u kterých se rozvine zánět (CRP > 5 mg/l) ve skupině s vakcínou a také od kojenců v kontrolní skupině (11. den).

Výsledná opatření:

Rovnice raného časového bodu pro hodnocení velikosti bazénu VA ve skupině kojenců se zánětem nebo bez něj