评估维生素 A 状态的新型同位素稀释技术

背景：

目前还没有可靠的方法来评估婴幼儿的维生素 A (VA)。 血清 VA 浓度不是 VA 状态的真实指标，而现有的氘-VA 同位素稀释法确定全身 VA 状态需要 3 周，不适用于婴儿和儿童。 研究人员的研究小组最近开发了一个新的简化方程来测量 4-5 天内的 VA 池大小，与房室模型预测值相关，并高精度地估计成人的 VA 池大小。 在这项研究中，我们在健康婴儿和患有炎症的婴儿中验证了该方法。

假设：

可以估计婴儿和儿童的全身 VA 状态，而无需考虑炎症情况下的分数分解代谢率

具体的目标：

在这项研究中，研究人员建议使用基于模型的区室分析从血浆中口服剂量衍生的 13C10-VA 和 13C4-VA 的分数确定早期时间点方程，以评估有或没有炎症的婴儿的 VA 库大小时间。

方法：

共有 183 名婴儿（9-18 月龄）将参与本研究，“超级儿童研究”的以下两个阶段确保每个婴儿的静脉血样本不超过 2 份，即使多个时间点（在至少 4 个科目/时间点）在 28 天的学习期间将可用于数学建模。 在这项研究中，研究人员将使用两种不同的稳定同位素维生素 A，例如 13C10-乙酸视黄酯和 13C4-乙酸视黄酯。 400 μg 这些同位素溶解在 0.5 mL 葵花籽油中，将使用直接替换移液管直接提供到婴儿口中。 母亲将被要求在口服给药后母乳喂养婴儿以增强标记的维生素 A 的吸收。血液样本中 13C10- 和 13C4- 醋酸视黄酯的比活性将通过液相色谱-串联质谱法 (LC/MS/MS) 测量). 将使用饮食和发病率问卷。 研究人员还将使用 PENTA 疫苗作为诱导受控炎症的手段（与自然感染非常相似）。 PENTA 是五种不同疫苗抗原（乙型肝炎 (HBV)/b 型流感嗜血杆菌 (Hib)/破伤风-白喉-全细胞百日咳 (TDwP)）的组合。 这种疫苗接种对婴儿有益​​，因为世界卫生组织建议加强疫苗接种剂量。 在研究结束时，还将向“未接种疫苗”组中的研究婴儿提供 PENTA 疫苗。

(A) 115 名婴儿将被随机分为 16 组，其中 40 名婴儿将被分配到第一组，而其他婴儿将被分配到其他 15 组（n=5/组）。 在第 0 天（0 点），所有婴儿 (n=115) 将接受口服剂量的 13C10-视黄醇乙酸酯。 从给药后 6 小时到第 16 天的 9 个不同时间点采集血样 (5 mL)。 在第 16 天（0 点），随机抽取第一组 50% 的婴儿（n=20）以及其他 6 组的 30 名婴儿接种 PENTA 疫苗，而另外 50% 的婴儿（n=20）第一组中的 45 名婴儿以及其他 9 组中的 45 名婴儿将不接种疫苗。 接种疫苗后 24 小时（第 17 天），将从接种疫苗组的婴儿中采集指尖血样以测量 CRP（QuikRead go，Orion，Finland）。 在 PENTA 疫苗接种后未发生炎症（CRP > 5mg/L）的婴儿将被排除在研究之外。 在第 17 天（0 点），所有婴儿 (n=115) 将接受另一次口服剂量的 13C4-视黄醇乙酸酯。 从第 16 天到第 28 天，在 11 个不同的时间点为每个接种疫苗和未接种疫苗的婴儿收集血样 (5mL)。 该研究还将通过确定婴儿子样本中同位素给药后 72 小时内排泄的粪便总量来评估同位素视黄醇的吸收

(B) 本阶段将招收 68 名婴儿。 其中，28名婴儿将被随机分配到7组（n=4/组）。 他们将在第 -1 天接种 PENTA 疫苗，并在第二天（第 0 天）接种口服剂量的 13C4-视黄醇乙酸酯。 从第 1 天到第 28 天，在 8 个不同的时间点收集血样 (5mL)。 在单独的设计中，40 名婴儿将在第 0 天接受口服剂量的 13C10-视黄醇乙酸酯，并在第 4 天收集血样 (5mL)。在第 7 天，他们将再次口服剂量的 13C4-视黄醇乙酸酯 (400 μg，溶于 0.5 mL 葵花籽油）。 在第 10 天，婴儿将接种 PENTA 疫苗（n=30）或不接种疫苗（n=10），接种后 1 天，将从出现炎症（CRP > 5mg/L）的婴儿身上采集血液样本（5 mL）在疫苗组和对照组的婴儿中（第 11 天）。

结果措施：

用于评估一组有或没有炎症的婴儿的 VA 池大小的早期时间点方程