Новый метод изотопного разведения для оценки статуса витамина А

Фон:

Не существует надежного метода оценки уровня витамина А (ВА) у младенцев и детей младшего возраста. Концентрация VA в сыворотке не является достоверным показателем состояния VA, в то время как существующие методы разведения изотопов дейтерия и VA для определения статуса VA всего тела требуют 3 недель и не применимы для младенцев и детей. Исследовательская группа недавно разработала новое упрощенное уравнение для измерения размера пула VA через 4-5 дней, коррелирует с прогнозируемым значением компартментальной модели и оценивает размер пула VA у взрослых с высокой точностью. В этом исследовании мы проверяем метод на здоровых младенцах и младенцах с воспалительным заболеванием.

Гипотеза:

Статус VA всего тела у младенцев и детей можно оценить без учета фракционной скорости катаболизма в контексте воспалительного состояния.

Конкретные цели:

В этом исследовании исследователи предлагают определить уравнение ранней временной точки для оценки размера пула VA у младенцев с воспалительным состоянием или без него с использованием основанного на модели компартмент-анализа фракции 13C10-VA и 13C4-VA, полученных перорально, в плазме в течение время.

Методы:

В общей сложности 183 младенца (в возрасте 9-18 месяцев) будут участвовать в этом исследовании на следующих двух этапах «исследования Super Kid», которые гарантируют не более 2 образцов венозной крови от каждого младенца, даже если несколько моментов времени (в минимум 4 предмета/момент времени) в течение 28-дневного периода обучения будут доступны для математического моделирования. В этом исследовании исследователи будут использовать два разных стабильных изотопа витамина А, например, 13C10-ретинилацетат и 13C4-ретинилацетат. 400 мкг этих изотопов, растворенных в 0,5 мл подсолнечного масла, будут введены ребенку непосредственно в рот с помощью сменной пипетки. Матерей попросят кормить ребенка грудью после перорального приема, чтобы улучшить усвоение меченого витамина А. Удельная активность 13C10- и 13C4-ретинилацетата в образцах крови будет измеряться с помощью жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии (ЖХ/МС/МС). ). Будут использоваться анкеты по питанию и заболеваемости. Исследователи также будут использовать вакцины PENTA в качестве средства для индукции контролируемого воспаления (близко имитирующего естественную инфекцию). PENTA представляет собой комбинацию пяти различных вакцинных антигенов (гепатит B (HBV)/гемофильная инфекция типа b (Hib)/столбняк-дифтерия-цельноклеточный коклюш (TDwP)). Эта вакцинация полезна для младенцев, поскольку Всемирная организация здравоохранения рекомендует ревакцинацию. В конце исследования вакцины PENTA также будут предоставлены исследуемым младенцам в группе «без вакцин».

(A) 115 младенцев будут случайным образом отобраны в 16 групп, из них 40 младенцев будут в первой группе, а остальные младенцы будут распределены в остальные 15 групп (n=5/группа). В день 0 (в 0 часов) все младенцы (n = 115) получат пероральную дозу 13C10-ретинилацетата. Образцы крови (5 мл) будут взяты с 6 часов до 16-го дня дозирования в 9 различных временных точках. На 16-й день (в 0 часов) случайно выбранные 50% младенцев (n=20) в первой группе, а также 30 младенцев в других 6 группах получат вакцины PENTA, а остальные 50% младенцев (n=20) в первой группе, а также 45 младенцев в других 9 группах вакцины не получат. Через 24 часа после вакцинации (на 17-й день) у младенцев в вакцинированной группе будет взят образец крови из пальца для измерения СРБ (QuikRead go, Orion, Финляндия). Младенцы, у которых не развилось воспаление (СРБ > 5 мг/л) после вакцинации PENTA, будут исключены из исследования. На 17-й день (в 0 ч) все младенцы (n = 115) получат еще одну пероральную дозу 13C4-ретинилацетата. Образцы крови (5 мл) будут собираться с 16-го по 28-й день в 11 различных моментов времени для каждого из вакцинированных и невакцинированных младенцев. В этом исследовании также будет оцениваться абсорбция изотопного ретинола путем определения общего количества выделенного стула в течение 72 часов после введения изотопа в подвыборке младенцев.

(B) 68 младенцев будут зарегистрированы на этом этапе. Из них 28 младенцев будут случайным образом разделены на 7 групп (n=4/группа). Они получат вакцины PENTA в день -1, а на следующий день (день 0) они получат пероральную дозу 13C4-ретинилацетата. Образцы крови (5 мл) будут собираться с 1 по 28 день в 8 разных временных точках. В отдельном дизайне 40 младенцев получат пероральную дозу 13C10-ретинилацетата в 0-й день, а образцы крови (5 мл) будут взяты на 4-й день. На 7-й день все они получат еще одну пероральную дозу 13C4-ретинилацетата (400 мл). мкг, растворенных в 0,5 мл подсолнечного масла). На 10-й день младенцы будут получать вакцины PENTA (n=30) или не будут получать вакцину (n=10), а через 1 день после вакцинации будут взяты образцы крови (5 мл) у младенцев, у которых разовьется воспаление (СРБ > 5 мг/л). в группе вакцинации, а также от младенцев в контрольной группе (11-й день).

Критерии оценки:

Уравнение ранней временной точки для оценки размера пула VA в группе младенцев с воспалением или без него