Origens do Desenvolvimento dos Transtornos de Saúde Mental

Os transtornos mentais comuns (TMC), como a depressão, contribuem significativamente para a carga global de doenças. A exposição fetal ao ambiente intrauterino adverso mediado por fatores do ciclo de vida pode aumentar o risco de doenças não transmissíveis mais tarde na vida. Os micronutrientes maternos, como a vitamina B12 e o folato, desempenham um papel importante no desenvolvimento fetal precoce por meio de seu efeito no metabolismo de um carbono.

A deficiência de vitamina B12 é comum em mulheres indianas; no entanto, as diretrizes recomendam apenas suplementação de ferro e ácido fólico durante a gravidez. Este estudo tem como objetivo investigar os efeitos da B12 materna, folato durante a gravidez na saúde mental e resultados neurocognitivos na prole durante a idade adulta.

A coorte de nascimentos Pune Maternal Nutrition Study (PMNS) (n = 762) foi estabelecida em 1993 na Unidade de Diabetes do KEM Hospital Pune com dados em série bem caracterizados e amostras biológicas arquivadas. Os sujeitos da coorte estão agora na faixa etária de 20 a 22 anos e isso oferece uma oportunidade para examinar os objetivos propostos.

Objetivos primários:

Examinar a associação específica entre os níveis maternos de vitamina B12, folato e homocisteína (independentemente e em interação uns com os outros) às 18 e 28 semanas de gestação e resultados neurocognitivos e risco de DMC por volta dos 21 anos de idade, controlando o efeito de outros nutrientes ( ingestão de calorias, proteínas e gorduras e níveis de vitamina C, D, ferritina).

Hipótese: Que níveis mais baixos de vitamina B12 e folato materno mais altos e níveis mais altos de homocisteína em 18 e 28 semanas de gestação estarão associados a escores de funcionamento cognitivo mais baixos em testes neuropsicológicos e maior prevalência de TMC em homens e mulheres com idade entre 20 e 22 anos.

Este padrão nutricional (baixa B12, alto folato, alta homocisteína) na mãe será associado a:

1. Espessura cortical menor, cérebro total menor, volumes do hipocampo e conectividade funcional do córtex pré-frontal dorsolateral do hipocampo alterada.
2. Temperamento perturbado e dimensões de caráter no espectro de internalização e externalização.

Além disso, serão examinados os efeitos mediadores e modificadores de outros fatores do curso da vida, como crescimento e nutrição na infância, educação, status socioeconômico, estresse no início da vida e estilo de vida sobre o risco de DMC.

Objetivos secundários:

1. Testar a causalidade da associação entre vitamina B12 materna, folato, homocisteína e resultados neurocognitivos por análise de randomização mendeliana (triangulação e análise de variável instrumental) usando determinantes genéticos maternos de vitamina B12 (TCN2rs1801198, FUT2rs492602) e homocisteína (MTHFRrs1801133).
2. Para avaliar se as associações acima são mediadas por níveis de biomarcadores de neurodesenvolvimento (fator neurotrófico derivado do cérebro sérico BDNF, níveis de fator de crescimento semelhante à insulina IGF-1) medidos aos 6,12 e 18 anos de idade na coorte.
3. Examinar se a suplementação nutricional na vida adulta (vitamina B12 com ou sem múltiplos micronutrientes ou placebo) pode modular o efeito do status materno de vitamina B12 nos resultados neurocognitivos na idade adulta jovem.

Métodos Desenho do estudo Indivíduos da coorte prospectiva longitudinal do PMNS (n=690) serão recrutados para avaliação transversal. O tempo necessário para as avaliações será de aproximadamente 2-3 horas (excluindo neuroimagem). Os membros do sexo feminino da coorte que estão grávidas no momento da avaliação seriam excluídos da neuroimagem, mas seriam rastreados para DMC.

Procedimentos:

Os participantes da coorte serão abordados pelos pesquisadores de campo que os acompanham há muitos anos. Os participantes receberão a folha de informações do estudo e uma oportunidade para discutir suas dúvidas e preocupações em relação ao estudo com o investigador. Os indivíduos que dão consentimento informado serão recrutados.

A equipe de pesquisa (um psiquiatra e um psicólogo clínico) será treinada e monitorada na administração da avaliação das ferramentas e a confiabilidade entre avaliadores será examinada periodicamente. Os indivíduos serão examinados na unidade de Diabetes do Hospital KEM, onde serão realizadas as seguintes avaliações.

1. Dados sociodemográficos gerais e uma entrevista estruturada:

   Proforma semiestruturada será usada para registrar detalhes demográficos atuais e status socioeconômico (avaliado no Índice de Padrão de Vida que fornece informações sobre ocupação, arranjo residencial, status educacional, posses), fatores de risco de estilo de vida (atividade física, estresse - Escala de estresse percebido de Cohen, uso de substâncias, comportamentos de alto risco, estresse no início da vida - Questionário Internacional de Experiências Adversas na Infância da Organização Mundial da Saúde). A história familiar de doença mental será avaliada na entrevista familiar para estudos genéticos.

2. Exame físico Um exame físico geral seria realizado para avaliar altura, peso, índice de massa corporal IMC, sinais de quaisquer deficiências nutricionais, pulsação em repouso e pressão arterial.

3. Avaliação neurocognitiva Será aplicada uma bateria padronizada de testes neuropsicológicos para avaliar os domínios das funções executivas, memória de trabalho, inteligência, memória verbal. Os testes levarão 60 minutos para serem administrados

   1. Matrizes progressivas padrão de Raven (SPM): Esta é uma medida de inteligência que pode ser usada em adultos. O teste contém 60 itens em 5 conjuntos, cada um contendo 12 itens. O número de respostas corretas é registrado. O teste produz uma única pontuação bruta e classificação percentil
   2. Teste de trilha de cores: Este é um teste de funções executivas. Envolve 2 partes A e B, onde os sujeitos devem conectar círculos numerados de 1 a 25, seguidos de conectar círculos numerados em cores alternadas (amarelo e rosa). O tempo para concluir a tarefa e o número de erros são registrados. Mais tempo indica desempenho ruim.
   3. Teste de extensão de dígitos: Este é um teste de memória de trabalho. É apresentada uma sequência crescente de dígitos que o sujeito deve recordar para a frente e depois para trás. A sequência mais longa de palavras repetidas corretamente é registrada.
   4. Projeto de bloco: Este é um teste para habilidade visuoespacial. A tarefa é replicar os designs mostrados nos cartões usando blocos vermelhos e brancos. O tempo gasto para completar o teste é registrado. Mais tempo indica desempenho ruim.
   5. Recordação de palavras: a versão da OMS/Universidade da Califórnia em Los Angeles (UCLA) do teste auditivo de aprendizado verbal de Rey mede o aprendizado verbal e a memória. O teste envolve a recordação imediata e tardia da lista A de 15 substantivos com uma interferência apresentada na lista B. As palavras usadas foram traduzidas para o idioma local. O número de palavras corretamente lembradas é registrado.

4. Avaliações psicológicas:

   Dimensões de temperamento e caráter: isso seria avaliado no inventário curto de temperamento e caráter - R. Este é um questionário de autorrelato de 140 itens que produz pontuações em 4 dimensões de temperamento (evitação de danos, dependência de recompensa, busca de novidades, persistência) e 3 dimensões de caráter dimensões (autodirecionamento, cooperação e autotranscendência).

5. Avaliação de saúde mental -diagnóstico Todos os indivíduos serão avaliados em uma entrevista clínica estruturada (Mini entrevista neuropsiquiátrica plus (MINI) 6.0; que produz diagnóstico psiquiátrico sindrômico com base no Manual de diagnóstico e estatística (DSM) 5. TMC de interesse avaliado seria depressão e transtornos de ansiedade. Todos os indivíduos que atendem aos critérios do MINI serão reavaliados por exame clínico abrangente do estado mental por 2 psiquiatras qualificados para confirmar o diagnóstico. Qualquer indivíduo com diagnóstico psiquiátrico sindrômico receberia tratamento de acordo com os protocolos clínicos padrão.
6. Ressonância magnética MRI do cérebro para sequências estruturais e estado de repouso fMRI seria realizada em um scanner 3Tesla MRI. Os exames de ressonância magnética seriam realizados em um subconjunto de coorte selecionado com base em seus níveis maternos de vitamina B12 usando um projeto de estudo de controle de caso aninhado. 146 membros têm um nível materno de vitamina B12 em 18 semanas de 175 pmol/l (n=175). Contabilizando o atrito, um número estimado de 200 indivíduos (100 em cada grupo) será escaneado. As seguintes sequências de RM seriam realizadas - MPRAGE estrutural 3D ponderada em T1 (magnetização preparada por eco gradiente rápido), fMRI com sequência EPI gradiente-eco 2D.
7. Avaliações de laboratório:

As avaliações para BDNF sérico e IGF-1 serão realizadas em amostras de soro arquivadas de indivíduos da coorte coletadas aos 6,12,18 anos de idade usando kits ELISA disponíveis comercialmente. A análise será realizada no laboratório da Unidade de Diabetes do Hospital KEM, que participa do Serviço Nacional de Avaliação da Qualidade Externa do Reino Unido (UKNEQAS).

Estimativa de energia e análise estatística:

Existem 690 membros da coorte disponíveis para avaliações. Assumindo uma taxa de participação de 90% (da experiência de estudos anteriores sobre a coorte), estimamos que 621 indivíduos seriam recrutados para o estudo. Usando um teste com nível de significância de 5%, o estudo terá 80% de poder para detectar e associação de 0,11 desvio padrão de resultado contínuo (por exemplo, pontuação do teste neurocognitivo) por desvio padrão de exposição contínua (por exemplo, nível materno de vitamina B12) Dados sobre o tamanho materno pré-gravidez (altura, dobras cutâneas, perímetro cefálico) estado nutricional durante a gravidez (ingestão nutricional, micronutrientes circulantes, atividade física) tamanho do recém-nascido (peso ao nascer, comprimento, perímetro cefálico) nutrição infantil, crescimento e desenvolvimento (IMC, medidas de gordura corporal, dobras cutâneas) e fatores de risco cardiometabólicos (resistência à insulina, estado glicêmico, adiposidade) avaliados anteriormente na coorte estão disponíveis e serão extraídos.

A técnica de modelagem de regressão seria usada principalmente para testar a hipótese proposta. Mais especificamente, os resultados neurocognitivos seriam modelados em função da(s) exposição(ões) após o ajuste para o efeito do mediador e as variáveis ​​de confusão, levando em consideração as características dos dados (não linearidade, resposta multivariada, etc.) . Uma técnica semelhante seria adotada para avaliar a forma e a força da relação entre os resultados da ressonância magnética e os resultados de DMC com a(s) exposição(ões), respectivamente. O uso apropriado dos modelos lineares ou modelo linear generalizado seria feito com base na natureza dos resultados. Os tamanhos de efeito juntamente com os intervalos de confiança e diagramas apropriados para visualizar os efeitos/relações seriam realizados.

O software Open Clinica seria usado para design de banco de dados e entrada de dados, enquanto toda a limpeza, análise e visualização dos dados seriam feitas usando o software estatístico R.

A análise de randomização mendeliana (triangulação e análise de variável instrumental) usando determinantes genéticos maternos dos genes da vitamina B12 (TCN2, FUT2) e da homocisteína (MTHFR) será realizada para examinar o papel causal da vitamina B12 e do metabolismo de um carbono nos resultados neurocognitivos. A análise genética dos genes da vitamina B12 (TCN2rs1801198, FUT2rs492602) e da homocisteína (MTHFRrs1801133) foi realizada em 526 mães e crianças da coorte e está disponível.