O papel das modificações epigenéticas no transtorno do espectro autista

20 casos confirmados de autismo estarão envolvidos neste estudo.

1. Os pacientes com autismo serão diagnosticados de acordo com: Gilliam Autism Rating Scale versão árabe: uma avaliação da gravidade do autismo usando a escala de classificação de autismo de Gilliam versão árabe: este teste foi usado para diagnóstico e avaliação da gravidade das características autistas para idades 3- 22 anos. É composto por 56 itens, subdivididos em 4 subescalas: comunicação, interação social, comportamentos estereotipados, desenvolvimento e pontuação total.
2. Amostras de sangue em jejum serão coletadas de crianças autistas para metilação do DNA e análise quantitativa da reação em cadeia da polimerase em tempo real

Amostras de sangue em jejum serão coletadas de autismo e controles para extração de DNA. Sangue periférico (2ml) será coletado da veia cubital para seringas plásticas. Linfócitos serão isolados de amostras de sangue. Examinaremos a metilação do gene nos linfócitos do sangue periférico de pacientes com autismo virgens de drogas e controles.

O DNA será isolado de linfócitos, purificado e processado para modificação do bissulfato. O tratamento com bissulfato do DNA genômico será realizado utilizando o kit de metilação do DNA de acordo com as instruções do fabricante. O tratamento com bissulfito do DNA genômico converte citosina em uracil, mas deixa 5' citosinas metiladas inalteradas. Reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real será usada para determinar o estado de metilação do DNA do fator neurotrófico derivado de Brian e genes de proteínas ácidas fibrilares da glia usando primers específicos para os genes humanos.

Uma avaliação da gravidade do autismo usando a escala de classificação de autismo de Gilliam versão árabe: Este teste foi usado para diagnóstico e avaliação da gravidade das características autistas para idades de 3 a 22 anos. É composto por 56 itens, subdivididos em 4 subescalas: comunicação, interação social, comportamentos estereotipados, desenvolvimento e pontuação total. A versão árabe foi validada com boa confiabilidade e validade e utilizada em muitos estudos anteriores. Quanto mais baixas forem as pontuações, pior é a condição.

A escala será feita por psicólogo treinado e certificado. O protocolo e o consentimento informado para este estudo serão revisados ​​e aprovados pelo comitê de ética da Faculdade de Medicina da Universidade de Assiut, Egito.

20 crianças de desenvolvimento típico com idade e gênero correspondentes serão designadas para o grupo de controle normal.

1. As crianças de controle serão examinadas por um psiquiatra para excluir quaisquer características autistas subclínicas.
2. Amostras de sangue em jejum serão coletadas de crianças de controle para metilação do DNA e análise quantitativa da reação em cadeia da polimerase em tempo real

Amostras de sangue em jejum serão coletadas de autismo e controles para extração de DNA. Sangue periférico (2ml) será coletado da veia cubital para seringas plásticas. Linfócitos serão isolados de amostras de sangue. Examinaremos a metilação do gene nos linfócitos do sangue periférico de pacientes com autismo virgens de drogas e controles.

O DNA será isolado de linfócitos, purificado e processado para modificação do bissulfato. O tratamento com bissulfato do DNA genômico será realizado utilizando o kit de metilação do DNA de acordo com as instruções do fabricante. O tratamento com bissulfito do DNA genômico converte citosina em uracil, mas deixa 5' citosinas metiladas inalteradas. Reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real será usada para determinar o estado de metilação do DNA do fator neurotrófico derivado de Brian e genes de proteínas ácidas fibrilares da glia usando primers específicos para os genes humanos.