De rol van epigenetische modificaties bij autismespectrumstoornis

Bij deze studie zullen 20 bevestigde gevallen van autisme worden betrokken.

1. De autismepatiënten zullen worden gediagnosticeerd volgens: Gilliam Autism Rating Scale Arabische versie: een beoordeling van de ernst van autisme met behulp van de Gilliam autisme beoordelingsschaal Arabische versie: deze test werd gebruikt voor diagnose en beoordeling van de ernst van autistische kenmerken voor leeftijden 3- 22 jaar. Het bestaat uit 56 items, onderverdeeld in 4 subschalen: communicatie, sociale interactie, stereotiep gedrag, ontwikkeling en totaalscore.
2. Nuchtere bloedmonsters zullen worden verzameld van kinderen met autisme voor DNA-methylatie en kwantitatieve real-time polymerasekettingreactieanalyse

Nuchtere bloedmonsters zullen worden verzameld van zowel autisme als controles voor DNA-extractie. Perifeer bloed (2 ml) wordt uit de cubitale ader in plastic spuiten getrokken. Lymfocyten worden geïsoleerd uit bloedmonsters. We zullen de genmethylering onderzoeken in de perifere bloedlymfocyten van niet-medicamenteuze autismepatiënten en controlepersonen.

DNA zal worden geïsoleerd uit lymfocyten, gezuiverd en verwerkt voor bisulfaatmodificatie. Bisulfaatbehandeling van genomisch DNA zal worden uitgevoerd met behulp van een DNA-methylatiekit volgens de instructies van de fabrikant. Bisulfietbehandeling van genomisch DNA zet cytosine om in uracil, maar laat gemethyleerde 5'-cytosines ongewijzigd. Kwantitatieve real-time Polymerase-kettingreactie zal worden gebruikt om de DNA-methylatiestatus van de Brian-afgeleide neurotrofe factor en glia fibrillaire zure eiwitgenen te bepalen met behulp van primers die specifiek zijn voor de menselijke genen.

Een beoordeling van de ernst van autisme met behulp van de Gilliam autisme-beoordelingsschaal Arabische versie: Deze test werd gebruikt voor diagnose en beoordeling van de ernst van autistische kenmerken in de leeftijd van 3-22 jaar. Het bestaat uit 56 items, onderverdeeld in 4 subschalen: communicatie, sociale interactie, stereotiep gedrag, ontwikkeling en totaalscore. De Arabische versie is gevalideerd met een goede betrouwbaarheid en validiteit en is eerder in veel studies gebruikt. Hoe lager de scores zijn, hoe slechter de toestand is.

De schaal wordt gedaan door een getrainde en gecertificeerde psycholoog. Het protocol en de geïnformeerde toestemming voor deze studie zullen worden beoordeeld en goedgekeurd door de ethische commissie van de Faculteit der Geneeskunde, Universiteit van Assiut, Egypte.

20 qua leeftijd en geslacht overeenkomende kinderen met een typische ontwikkeling die zullen worden toegewezen aan de normale controlegroep.

1. Controlekinderen zullen worden onderzocht door een psychiater om eventuele subklinische autistische kenmerken uit te sluiten.
2. Nuchtere bloedmonsters zullen worden verzameld van controlekinderen voor DNA-methylatie en kwantitatieve real-time polymerasekettingreactieanalyse

Nuchtere bloedmonsters zullen worden verzameld van zowel autisme als controles voor DNA-extractie. Perifeer bloed (2 ml) wordt uit de cubitale ader in plastic spuiten getrokken. Lymfocyten worden geïsoleerd uit bloedmonsters. We zullen de genmethylering onderzoeken in de perifere bloedlymfocyten van niet-medicamenteuze autismepatiënten en controlepersonen.

DNA zal worden geïsoleerd uit lymfocyten, gezuiverd en verwerkt voor bisulfaatmodificatie. Bisulfaatbehandeling van genomisch DNA zal worden uitgevoerd met behulp van een DNA-methylatiekit volgens de instructies van de fabrikant. Bisulfietbehandeling van genomisch DNA zet cytosine om in uracil, maar laat gemethyleerde 5'-cytosines ongewijzigd. Kwantitatieve real-time Polymerase-kettingreactie zal worden gebruikt om de DNA-methylatiestatus van de Brian-afgeleide neurotrofe factor en glia fibrillaire zure eiwitgenen te bepalen met behulp van primers die specifiek zijn voor de menselijke genen.