Epigeneettisten modifikaatioiden rooli autismispektrihäiriössä

Tähän tutkimukseen osallistuu 20 vahvistettua autismitapausta.

1. Autismipotilaat diagnosoidaan seuraavasti: Gilliam Autism Rating Scale Arabiankielinen versio: Autismin vakavuuden arviointi Gilliam autismin luokitusasteikolla arabiankielinen versio: Tätä testiä käytettiin diagnosoimiseen ja autististen piirteiden vakavuuden arvioimiseen 3-vuotiaille. 22 vuotta. Se koostuu 56 osasta, jotka on jaettu 4 ala-asteikkoon: kommunikaatio, sosiaalinen vuorovaikutus, stereotyyppinen käyttäytyminen, kehitys ja kokonaispisteet.
2. Autismilapsilta otetaan paastoverinäytteet DNA-metylaatiota ja kvantitatiivista reaaliaikaista polymeraasiketjureaktioanalyysiä varten

Paastoverinäytteitä kerätään sekä autismista että kontrolleista DNA:n erottamista varten. Perifeerinen veri (2 ml) otetaan kubitaalisesta laskimosta muoviruiskuihin. Lymfosyytit eristetään verinäytteistä. Tutkimme geenimetylaatiota perifeerisen veren lymfosyyteissä lääkkeitä käyttämättömien autismipotilaiden ja kontrollihenkilöiden.

DNA eristetään lymfosyyteistä, puhdistetaan ja käsitellään bisulfaattimodifikaatiota varten. Genomisen DNA:n bisulfaattikäsittely suoritetaan DNA-metylaatiosarjalla valmistajan ohjeiden mukaisesti. Genomisen DNA:n bisulfiittikäsittely muuttaa sytosiinin urasiiliksi, mutta jättää metyloidut 5'-sytosiinit ennalleen. Kvantitatiivista reaaliaikaista polymeraasiketjureaktiota käytetään määrittämään Brianista peräisin olevan neurotrofisen tekijän ja gliafibrillaarisen happaman proteiinin geenien DNA-metylaatiostatus käyttämällä ihmisen geeneille spesifisiä alukkeita.

Autismin vakavuuden arviointi Gilliam-autismin luokitusasteikolla arabiankielinen versio: Tätä testiä käytettiin 3–22-vuotiaiden autististen piirteiden diagnosointiin ja vakavuuden arvioimiseen. Se koostuu 56 osasta, jotka on jaettu 4 ala-asteikkoon: kommunikaatio, sosiaalinen vuorovaikutus, stereotyyppinen käyttäytyminen, kehitys ja kokonaispisteet. Arabialainen versio on validoitu hyvällä luotettavuudella ja validiteetilla, ja sitä on käytetty useissa tutkimuksissa aiemmin. Mitä alhaisemmat pisteet ovat, sitä huonompi tilanne on.

Asteikon suorittaa koulutettu ja sertifioitu psykologi. Tämän tutkimuksen protokolla ja tietoinen suostumus tarkistetaan ja hyväksytään Egyptin Assiutin yliopiston lääketieteellisen tiedekunnan eettisessä komiteassa.

20 ikä-sukupuolista vastaavaa tyypillistä kehitystä lasta, jotka määrätään normaaliin kontrolliryhmään.

1. Psykiatri tutkii kontrollilapset mahdollisten subkliinisten autististen piirteiden poissulkemiseksi.
2. Kontrollilapsilta otetaan paastoverinäytteet DNA-metylointia ja kvantitatiivista reaaliaikaista polymeraasiketjureaktioanalyysiä varten

Paastoverinäytteitä kerätään sekä autismista että kontrolleista DNA:n erottamista varten. Perifeerinen veri (2 ml) otetaan kubitaalisesta laskimosta muoviruiskuihin. Lymfosyytit eristetään verinäytteistä. Tutkimme geenimetylaatiota perifeerisen veren lymfosyyteissä lääkkeitä käyttämättömien autismipotilaiden ja kontrollihenkilöiden.

DNA eristetään lymfosyyteistä, puhdistetaan ja käsitellään bisulfaattimodifikaatiota varten. Genomisen DNA:n bisulfaattikäsittely suoritetaan DNA-metylaatiosarjalla valmistajan ohjeiden mukaisesti. Genomisen DNA:n bisulfiittikäsittely muuttaa sytosiinin urasiiliksi, mutta jättää metyloidut 5'-sytosiinit ennalleen. Kvantitatiivista reaaliaikaista polymeraasiketjureaktiota käytetään määrittämään Brianista peräisin olevan neurotrofisen tekijän ja gliafibrillaarisen happaman proteiinin geenien DNA-metylaatiostatus käyttämällä ihmisen geeneille spesifisiä alukkeita.