Uma avaliação do probiótico no curso clínico de pacientes com câncer colorretal

JUSTIFICATIVA: O estudo teve como objetivo determinar os efeitos do consumo de probióticos contendo seis microorganismos viáveis ​​de 3g x 1010 cepas de Lactobacillus e Bifidobacteria por seis meses em resultados clínicos e oito níveis de citocinas inflamatórias relacionadas ao câncer colorretal em pacientes com câncer colorretal. Entre as citocinas investigadas estavam Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-α), Interferon gama (IFN-γ), Interleucina 6 (IL-6), Interleucina 10 (IL-10), Interleucina 12 (IL-12), Interleucina 17A (IL -17A), Interleucina 17-C (IL-17C) e Interleucina 22 (IL-22)

MÉTODOS:

Um estudo randomizado, duplo-cego, controlado por placebo foi realizado envolvendo pacientes diagnosticados com câncer colorretal e planejados para ressecção colorretal no Universiti Kebangsaan Malaysia Medical Center (UKMMC)

CÁLCULO DE AMOSTRA:

O efeito da intervenção foi descrito usando riscos relativos e intervalos de confiança de 95% e análises por protocolo serão realizadas. Dados anteriores indicam que a taxa de falha entre os controles é de 0,8. Se a verdadeira taxa de falha para sujeitos experimentais for 0,4, o estudo exigiu 22 sujeitos experimentais e 22 sujeitos de controle para ser capaz de rejeitar a hipótese nula de que as taxas de falha para sujeitos experimentais e de controle são iguais com probabilidade (poder) 0,8. A probabilidade de erro Tipo I associada a este teste desta hipótese nula é de 0,05. Uma estatística qui-quadrada não corrigida será aplicada para avaliar esta hipótese nula. Assumindo a taxa de abandono de 30%, o total de pacientes necessários para este estudo de intervenção para os pacientes com CRC é de 60 (30 pacientes para cada braço).

AVALIAÇÃO CLÍNICA DO PACIENTE:

As características clínicas do paciente, incluindo idade, sexo, tabagismo, comorbidades, estágio do câncer, subtipo patológico do tumor e localização foram identificadas. Os pacientes recrutados foram randomizados por meio de randomização simples para serem tratados com probióticos ou placebo. O desvendamento do teste foi feito após a conclusão da análise de dados. Os pacientes submetidos à quimioterapia durante o período de intervenção de seis meses foram revisados ​​e a diarreia induzida por quimioterapia foi avaliada com base no Common Terminology Criteria for Adverse Events versão 3.0 (CTCAEv3.0).

PRODUTO DE TRATAMENTO E PROCEDIMENTO:

O produto probiótico envolvido no estudo foi o HEXBIO® fabricado pela B-Crobes Laboratories Sdn. Bhd., Malásia. HEXBIO® contém 30 bilhões de unidades formadoras de colônias (CFU) de seis cepas viáveis ​​de Lactobacillus e Bifidobacteria, incluindo 107 mg de Lactobacillus acidophilus BCMC® 12130, Lactobacillus lactis BCMC® 12451, Lactobacillus casei subsp BCMC® 12313, Bifidobacterium longum BCMC® 02120, Bifidobacterium bifidum BCMC® 02290 e Bifidobacterium infantis BCMC® 02129. As amostras de placebo produzidas eram idênticas aos probióticos em termos de sabor e textura sem microorganismos vivos. Ambas as amostras foram preparadas na forma de grânulos acondicionados em sachês de papel alumínio e mantidos em temperatura ambiente. HEXBIO® foi rotulado como AGE 1 enquanto o placebo como AGE 2.

Para garantir que os antibióticos administrados no pós-operatório não interfiram nos resultados do estudo, os pacientes foram instruídos a consumir o produto quatro semanas após as cirurgias. Os pacientes foram obrigados a tomar os produtos por via oral duas vezes ao dia durante seis meses. Boa adesão foi considerada quando os pacientes consumiram mais de 70% do total de produtos administrados. Qualquer coisa menos do que isso foi considerado como não conformidade.

COLETA DE AMOSTRAS DE SANGUE:

Antes da cirurgia, cinco mL de sangue foram retirados de todos os pacientes recrutados. O sangue foi levado para o BD vacutainer e deixado coagular por 30 minutos. Foi então centrifugado por 15 minutos a 1000Xg onde o soro separado foi armazenado em freezer a -80°C até ser analisado. As etapas foram repetidas após a conclusão do período de intervenção de seis meses.

Ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA):

As amostras de soro foram testadas usando o kit multiplex de ensaio imunoenzimático (ELISA) de acordo com a diretriz do fabricante (R&D System Human Magnetic Luminex Assay: LXSAHM-08).