Значение фиколина 2 в определении серологической активности при хроническом воспалительном заболевании кишечника

Фон

Предпосылки Подобно маннан-связывающему лектину (MBL), фиколины являются важными растворимыми рецепторами для связанных с микробами молекулярных паттернов, ведущих к активации комплемента лектинового пути. Фиколины структурно связаны с маннан-связывающим лектином, но из-за их другого домена распознавания углеводов представляют собой собственное семейство лектинов (1). Одиночные полипептидные цепи фиколинов образуют тримеры, а тримеры в конечном итоге образуют структуры более высокого порядка (от тетрамеров до гексамеров), которые составляют функциональный белок. У человека есть три фиколина: фиколин-1 (М-фиколин), -2 (L-фиколин) и -3 (Н-фиколин), тогда как фиколин-2 и -3 присутствуют в сыворотке, фиколин-1 обнаружен в поверхность моноцитов. И фиколин-2, и фиколин-3 вырабатываются в печени с дополнительным источником фиколина-3 в легких. Как и MBL, фиколины должны собираться с MBL-ассоциированными сериновыми протеазами (MASP), чтобы активировать путь комплемента (1). В нашем исследовании возможной роли влияния системы комплемента на выработку антител против Saccharomyces cerevisiae, связанных с БК (ASCA), мы заметили, что у пациентов с хроническим воспалительным заболеванием кишечника (ХВЗК), особенно у пациентов с болезнью Крона (БК), обнаружены высокие концентрации фиколина 2 в сыворотке крови.

Наша исследовательская группа интересуется взаимодействием врожденной иммунной системы с микроорганизмами кишечной флоры, уделяя особое внимание возможным дефектам врожденных иммунных механизмов. Мы имеем более чем десятилетний опыт работы в этой области, уделяя особое внимание ASCA и MBL. Мы имели возможность постоянно публиковать нашу работу об этих теориях.

Наши более ранние и настоящие исследования роли маннан-связывающего лектина и лектинового пути комплемента при БК привели к обнаружению повышенной концентрации фиколина-2 в сыворотке пациентов с БК. Более того, мы обнаружили, что у пациентов с болезнью Крона с индексом Харви-Брэдшоу >3 концентрация фиколина 2 была значительно выше, чем у пациентов с индексом Харви-Брэдшоу ≤3.

Гипотезы исследования

Предстоит проверить следующие гипотезы:

1. Концентрация фиколина 2 выше у пациентов с болезнью Крона с активным заболеванием, чем у пациентов с болезнью Крона в стадии ремиссии.
2. Фиколин 2 коррелирует с эндоскопической активностью.
3. Фиколин 2 коррелирует с кальпротектином.

Цель

Результаты первой части исследования должны быть подтверждены в проспективном и более подробном исследовании с большей группой пациентов, проверяющем нашу (новую) рабочую гипотезу о том, что фиколин 2 представляет собой сывороточный маркер активности заболевания при БК.

Поскольку в настоящее время трудно надежно определить активность заболевания у пациентов с болезнью Крона с использованием маркеров сыворотки и стула без одновременного эндоскопического исследования, весьма желателен другой специфический и легкодоступный маркер заболевания, который хорошо коррелирует с активностью заболевания. В частности, потому, что текущий стандартный маркер для мониторинга активности заболевания (фекальный кальпротектин) гораздо менее приемлем, чем тестирование параметров в крови.

Таким образом, исследование направлено на ответ на вопрос, присутствует ли фиколин 2 в больших концентрациях в крови пациентов с болезнью Крона с активным воспалением по сравнению с пациентами с БК в стадии ремиссии или с пациентами с язвенным колитом (ЯК).

Методы

Для целей исследования индекс эндоскопической активности будет записываться с использованием SES-CD (упрощенная эндоскопическая оценка для CD) для пациентов с болезнью Крона и шкалы Mayo для пациентов с колитом.

Для приготовления сыворотки берется около 5 мл крови. (5,5 мл или 4,9 мл S Monovette или 4,7 мл или 4,9 мл сывороточного геля Monovette).

Вторая пробирка крови будет взята для определения СРБ. Чтобы измерить кальпротектин, пациента попросят предоставить образец стула незадолго до или вскоре после эндоскопического исследования (в течение одной недели).

Значения фиколина в сыворотке измеряются с помощью иммуноферментного сорбентного анализа (ELISA) в лаборатории Департамента клинических исследований Бернского университета; все остальные значения определяются в обычных диагностических лабораториях.