Significato della ficolina 2 nella determinazione dell'attività sierologica nella malattia infiammatoria cronica intestinale

Sfondo

Sfondo Come la lectina legante il mannano (MBL), le ficoline sono importanti recettori solubili per i modelli molecolari associati ai microbi che portano all'attivazione del complemento della via della lectina. Le ficoline sono strutturalmente correlate alle MBL, ma a causa del loro diverso dominio di riconoscimento dei carboidrati rappresentano una propria famiglia di lectine (1). Le singole catene polipeptidiche delle ficoline formano trimeri e infine i trimeri formano strutture di ordine superiore (dai tetrameri fino agli esameri) che costituiscono la proteina funzionale. Gli esseri umani hanno tre ficoline: Ficolin-1 (M-ficolin), -2 (L-ficolin) e -3 (H-ficolin), mentre ficolin-2 e -3 sono presenti nel siero, ficolin-1 si trova sul superficie dei monociti. Entrambi, ficolin-2 e -3 sono prodotti nel fegato con una fonte aggiuntiva di ficolin-3 nel polmone. Come l'MBL, le ficoline devono assemblarsi con le serin proteasi associate all'MBL (MASP) per attivare la via del complemento (1). Nel nostro studio su un possibile ruolo dell'influenza del sistema del complemento nello sviluppo di anticorpi anti-Saccharomyces cerevisiae (ASCA) associati alla CD, abbiamo notato che i pazienti con malattia infiammatoria cronica intestinale (CIBD), in particolare i pazienti con malattia di Crohn (CD), mostrava elevate concentrazioni sieriche di ficolina 2.

Il nostro gruppo di ricerca è interessato all'interazione del sistema immunitario innato con i microrganismi della flora intestinale, concentrandosi su possibili difetti nei meccanismi immunitari innati. Abbiamo più di dieci anni di esperienza nel settore, con particolare attenzione ad ASCA e MBL. Siamo stati in grado di pubblicare continuamente il nostro lavoro su queste teorie.

I nostri studi precedenti e attuali sul ruolo della MBL e sulla via della lectina del complemento nella celiachia hanno portato alla scoperta di un aumento della concentrazione di ficolina-2 nel siero dei pazienti con celiachia. Inoltre, abbiamo scoperto che i pazienti CD con un indice di Harvey-Bradshaw > 3 avevano concentrazioni di ficolina 2 significativamente più elevate rispetto a quelli con un indice di Harvey-Bradshaw di ≤ 3.

Ipotesi di studio

Sono da verificare le seguenti ipotesi:

1. La concentrazione di ficolina 2 è più alta nei pazienti di Crohn con malattia attiva rispetto ai pazienti con celiachia in remissione.
2. La ficolina 2 correla con l'attività endoscopica.
3. La ficolina 2 correla con la calprotectina.

Obbiettivo

I risultati della prima parte dello studio devono essere confermati in uno studio prospettico e più dettagliato con una coorte di pazienti più ampia, testando la nostra (nuova) ipotesi di lavoro secondo cui la ficolina 2 rappresenta un marker sierico per l'attività della malattia nella celiachia.

Dal momento che attualmente è difficile determinare in modo affidabile l'attività della malattia nei pazienti affetti da MC utilizzando marcatori sierici e fecali senza esame endoscopico simultaneo, un altro marcatore della malattia specifico e facile da ottenere che si correli bene con l'attività della malattia sarebbe molto gradito. In particolare perché l'attuale marcatore standard, per monitorare l'attività della malattia (calprotectina fecale), è molto meno accettato rispetto al test dei parametri nel sangue.

Pertanto, lo studio mira a rispondere alla domanda se la ficolina 2 sia presente in concentrazioni maggiori nel sangue dei pazienti con malattia di Crohn con infiammazione attiva rispetto ai pazienti con CD in remissione o ai pazienti con colite ulcerosa (UC).

Metodi

Ai fini dello studio, l'indice di attività endoscopica sarà registrato utilizzando il SES-CD (simplified endoscopic score for CD) per i pazienti con Crohn e il Mayo score per i pazienti con colite.

Saranno prelevati circa 5 ml di sangue per preparare il siero. (5,5 ml o 4,9 ml S Monovette o 4,7 ml o 4,9 ml siero gel Monovette).

Verrà prelevata una seconda provetta di sangue per la determinazione della PCR. Per misurare la calprotectina, al paziente verrà chiesto di fornire un campione di feci poco prima o subito dopo l'esame endoscopico (entro una settimana).

I valori sierici di ficolina sono misurati mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) nel laboratorio del Dipartimento di ricerca clinica dell'Università di Berna; tutti gli altri valori sono determinati nei laboratori diagnostici di routine.