Znaczenie fikoliny 2 w oznaczaniu aktywności serologicznej w przewlekłym nieswoistym zapaleniu jelit

Tło

Tło Podobnie jak lektyna wiążąca mannan (MBL), fikoliny są ważnymi rozpuszczalnymi receptorami wzorców molekularnych związanych z drobnoustrojami, prowadzącymi do aktywacji szlaku lektynowego dopełniacza. Fikoliny są strukturalnie spokrewnione z MBL, ale ze względu na inną domenę rozpoznawania węglowodanów reprezentują własną rodzinę lektyn (1). Pojedyncze łańcuchy polipeptydowe fikolin tworzą trimery, a ostatecznie trimery tworzą struktury wyższego rzędu (od tetramerów do heksamerów), które składają się na funkcjonalne białko. Człowiek ma trzy fikoliny: fikolinę-1 (fikolinę M), fikolinę -2 (fikolinę L) i fikolinę -3 (fikolinę H), podczas gdy fikolina-2 i -3 są obecne w surowicy, fikolina-1 znajduje się na powierzchnia monocytów. Zarówno fikolina-2, jak i -3 są wytwarzane w wątrobie z dodatkowym źródłem fikoliny-3 w płucach. Podobnie jak MBL, fikoliny muszą łączyć się z proteazami serynowymi związanymi z MBL (MASP) w celu aktywacji szlaku dopełniacza (1). W naszym badaniu nad możliwą rolą wpływu układu dopełniacza na rozwój przeciwciał przeciwko Saccharomyces cerevisiae (ASCA) związanych z CD, zauważyliśmy, że pacjenci z przewlekłą chorobą zapalną jelit (CIBD), szczególnie pacjenci z chorobą Leśniowskiego-Crohna (CD), wykazywały wysokie stężenie fikoliny 2 w surowicy.

Nasza grupa badawcza interesuje się interakcjami wrodzonego układu odpornościowego z mikroorganizmami flory jelitowej, skupiając się na możliwych defektach mechanizmów odporności wrodzonej. Mamy ponad dziesięcioletnie doświadczenie w tej dziedzinie, ze szczególnym uwzględnieniem ASCA i MBL. Mogliśmy stale publikować nasze prace dotyczące tych teorii.

Nasze wcześniejsze i obecne badania nad rolą MBL i szlaku lektynowego dopełniacza w CD doprowadziły do ​​stwierdzenia zwiększonego stężenia fikoliny-2 w surowicach pacjentów z CD. Ponadto stwierdziliśmy, że pacjenci z CD z indeksem Harveya-Bradshawa > 3 mieli znacznie wyższe stężenia fikoliny 2 niż ci z indeksem Harveya-Bradshawa ≤ 3.

Hipotezy badawcze

Do sprawdzenia mają być następujące hipotezy:

1. Stężenie fikoliny 2 jest wyższe u pacjentów z chorobą Leśniowskiego-Crohna z aktywną postacią choroby niż u pacjentów z CD w okresie remisji.
2. Ficolin 2 koreluje z aktywnością endoskopową.
3. Fikolina 2 koreluje z kalprotektyną.

Cel

Wyniki pierwszej części badania mają zostać potwierdzone w prospektywnym i bardziej szczegółowym badaniu z udziałem większej kohorty pacjentów, sprawdzającym naszą (nową) roboczą hipotezę, że fikolina 2 jest markerem aktywności choroby w CD w surowicy.

Ponieważ obecnie trudno jest wiarygodnie określić aktywność choroby u pacjentów z CD za pomocą markerów surowicy i kału bez równoczesnego badania endoskopowego, bardzo pożądany byłby inny specyficzny i łatwy do uzyskania marker choroby, który dobrze koreluje z aktywnością choroby. Szczególnie dlatego, że obecny standardowy marker do monitorowania aktywności choroby (kalprotektyna w kale) jest znacznie mniej akceptowany niż badanie parametrów we krwi.

Celem pracy jest zatem odpowiedź na pytanie, czy fikolina 2 występuje w większym stężeniu we krwi pacjentów z chorobą Leśniowskiego-Crohna z czynnym stanem zapalnym w porównaniu z pacjentami z celiakią w remisji lub z wrzodziejącym zapaleniem jelita grubego (UC).

Metody

Na potrzeby badania indeks aktywności endoskopowej zostanie zapisany przy użyciu skali SES-CD (uproszczony wynik endoskopowy dla CD) dla pacjentów z chorobą Crohna oraz punktacji Mayo dla pacjentów z zapaleniem okrężnicy.

W celu przygotowania surowicy zostanie pobrane około 5 ml krwi. (5,5 ml lub 4,9 ml S Monovette lub 4,7 ml lub 4,9 ml serum w żelu Monovette).

Do oznaczenia CRP zostanie pobrana druga probówka z krwią. W celu oznaczenia kalprotektyny pacjent zostanie poproszony o oddanie próbki kału na krótko przed badaniem endoskopowym lub krótko po nim (w ciągu tygodnia).

Wartości fikoliny w surowicy są mierzone za pomocą testu enzymatycznego sorbentu immunologicznego (ELISA) w laboratorium na Wydziale Badań Klinicznych Uniwersytetu w Bernie; wszystkie inne wartości są określane w rutynowych laboratoriach diagnostycznych.