Влияние эдоксабана на коагуляцию и образование тромбина: исследование in vitro с акцентом на тромбеастографию

Экспериментальный протокол

1. В день эксперимента образцы крови будут собраны в пробирки с 3,2% цитратом.
2. Одна пробирка с цитратной кровью будет центрифугирована для сбора плазмы для измерения биомаркеров (С-реактивный белок (СРБ), фибриноген, фактор фон Виллебранда (vWF), интерлейкин (IL)-6, p-селектин, ингибитор активатора плазминогена (PAI)-1). , матриксная металлопротеиназа (ММП)-9).
3. Образцы крови инкубируют с различными концентрациями эдоксабана (без эдоксабана, субтерапевтический диапазон - 30 нМ, терапевтический диапазон -300 нМ и супратерапевтический диапазон - 900 нМ) (3).

A) Система анализа гемостаза Cora® (Cora®) будет использоваться для качественной и количественной оценки гемостатических свойств образца крови в присутствии или в отсутствие эдоксабана. CORA представляет собой интегрированный компьютерный модуль с возможностью подключения к сети Ethernet и обеспечивает непрерывные измерения вязкоупругости на резонансной частоте с использованием одноразового четырехканального микрожидкостного картриджа для одновременного определения максимальной прочности тромбоцитарно-фибринового сгустка, прочности фибринового сгустка и реакции на антиагреганты или антикоагулянты. Картридж имеет четыре канала: канал цитратного каолина (CK), который измеряет прочность тромбоцитарно-фибринового сгустка, канал анти-Ха, канал DTI и канал FFC, который измеряет вклад функционального фибриногена.

Кроме того, с помощью программного обеспечения V-curve будут оцениваться следующие параметры кинетики образования тромбина по каналу CK: R - латентный период времени с момента помещения крови в анализатор TEG® до начального образования фибрина. . Это представляет собой ферментативную часть коагуляции.

K - время K является мерой скорости достижения определенного уровня прочности сгустка. Это представляет кинетику сгустка.

альфа - измеряет скорость образования фибрина и перекрестного связывания (укрепление сгустка). Это представляет собой уровень фибриногена.

МА — максимальная амплитуда — это прямая функция максимальных динамических свойств фибрина и связывания тромбоцитов через GPIIb/IIIa, и она представляет предельную прочность фибринового сгустка. Это представляет функцию/агрегацию тромбоцитов.

TMRTG - время до максимальной скорости тромбообразования. MRTG - максимальная скорость тромбообразования. TG - Общее образование тромбов. TMRL — время до достижения максимальной скорости лизиса MRL — максимальная скорость лизиса L — общий лизис D — дельта — это разница между временем R и временем начальной точки разделения (SP, мин) записи ТЭГ (R — SP), представляющая временной интервал наибольшего роста сгустка, вторичный по отношению к пиковой выработке тромбина.

B) Система калиброванной автоматической тромбограммы® (CAT): время запаздывания, пиковая продукция тромбина, индекс средней скорости и эндогенный тромбиновый потенциал (ETP) будут оцениваться с помощью калиброванной автоматической тромбограммы в обедненной тромбоцитами плазме (тромбиноскоп Stago).