Influência da Edoxabana na Coagulabilidade e na Geração de Trombina: Um Estudo In Vitro com Foco na Trombelastografia

protocolo experimental

1. No dia do experimento serão coletadas amostras de sangue em tubos de citrato 3,2%.
2. Um tubo de sangue citratado será centrifugado para coletar plasma para medições de biomarcadores (proteína C reativa (PCR), fibrinogênio, fator de von Willebrand (vWF), interleucina (IL)-6, p-selectina, inibidor do ativador do plasminogênio (PAI)-1 , metaloproteinase de matriz (MMP)-9).
3. As amostras de sangue serão incubadas com diferentes concentrações de edoxaban (sem edoxaban, faixa subterapêutica - 30 nM, faixa terapêutica -300 nM e faixa supraterapêutica - 900 nM) (3).

A) O Sistema Analisador de Hemostasia Cora® (Cora®) será utilizado para avaliação qualitativa e quantitativa das propriedades hemostáticas de uma amostra de sangue na presença ou ausência de edoxabana. O CORA é um módulo de computador integrado com capacidade de conexão Ethernet e fornece medições contínuas de viscoelasticidade de frequência de ressonância usando um cartucho microfluídico descartável de quatro canais para determinar a resistência máxima simultânea do coágulo plaqueta-fibrina, força do coágulo de fibrina e resposta a agentes antiplaquetários ou anticoagulantes. O cartucho tem quatro canais - canal de Caulim Citratado (CK) que mede a força do coágulo de plaquetas-fibrina, canal anti-Xa, canal DTI e canal FFC que mede a contribuição do fibrinogênio funcional.

Além disso, usando o software V-curve, serão avaliados os seguintes parâmetros da cinética de geração de trombina do canal CK- R - Período de tempo de latência desde o momento em que o sangue foi colocado no analisador TEG® até a formação inicial de fibrina . Isso representa a porção enzimática da coagulação.

O tempo K - K é uma medida da velocidade para atingir um certo nível de força do coágulo. Isso representa a cinética do coágulo.

alfa - mede a rapidez do acúmulo de fibrina e reticulação (fortalecimento do coágulo). Isso representa o nível de fibrinogênio.

MA - A amplitude máxima é uma função direta das propriedades dinâmicas máximas da fibrina e da ligação plaquetária via GPIIb/IIIa e representa a resistência máxima do coágulo de fibrina. Isso representa a função/agregação plaquetária.

TMRTG - Tempo até a taxa máxima de geração de trombo. MRTG - Taxa máxima de geração de trombos. TG - Trombo total gerado. TMRL - ​​Tempo até a taxa máxima de lise MRL - ​​Taxa máxima de lise L - Lise total D - Delta é a diferença entre o tempo R e o tempo do ponto de divisão inicial (SP, mins) do traçado TEG (R - SP), representando o intervalo de tempo de maior crescimento do coágulo secundário ao pico de geração de trombina.

B) Sistema Calibrado Automated Thrombogram® (CAT): Tempo de atraso, pico de produção de trombina, índice de velocidade média e potencial de trombina endógena (ETP) serão avaliados por trombograma automatizado calibrado em plasma pobre em plaquetas (Thrombinoscope by Stago).