Influence de l'edoxaban sur la coagulabilité et la génération de thrombine : une étude in vitro axée sur la thrombélastographie

protocole experimental

1. Le jour de l'expérience, des échantillons de sang seront prélevés dans des tubes de citrate à 3,2 %.
2. Un tube de sang citraté sera centrifugé pour recueillir le plasma pour les mesures de biomarqueurs (protéine C-réactive (CRP), fibrinogène, facteur von Willebrand (vWF), interleukine (IL)-6, p-sélectine, inhibiteur de l'activateur du plasminogène (PAI)-1 , métalloprotéinase matricielle (MMP)-9).
3. Les échantillons de sang seront incubés avec différentes concentrations d'edoxaban (pas d'edoxaban, plage sous-thérapeutique - 30 nM, plage thérapeutique -300 nM et plage suprathérapeutique - 900 nM) (3).

A) Le système d'analyseur d'hémostase Cora® (Cora®) sera utilisé pour évaluer l'évaluation qualitative et quantitative des propriétés hémostatiques d'un échantillon de sang en présence ou en l'absence d'edoxaban. Le CORA est un module informatique intégré avec une capacité de connexion Ethernet et fournit des mesures continues de viscoélasticité de fréquence de résonance à l'aide d'une cartouche microfluidique jetable à quatre canaux pour déterminer la force maximale simultanée du caillot plaquettaire-fibrine, la force du caillot de fibrine et la réponse aux agents antiplaquettaires ou aux anticoagulants. La cartouche comporte quatre canaux - un canal de kaolin citraté (CK) qui mesure la résistance du caillot de fibrine plaquettaire, un canal anti-Xa, un canal DTI et un canal FFC qui mesure la contribution du fibrinogène fonctionnel.

De plus, à l'aide du logiciel V-curve, les paramètres suivants de la cinétique de génération de thrombine seront évalués à partir du canal CK - R - Période de temps de latence à partir du moment où le sang a été placé dans l'analyseur TEG® jusqu'à la formation initiale de fibrine . Cela représente la partie enzymatique de la coagulation.

Le temps K - K est une mesure de la vitesse pour atteindre un certain niveau de résistance du caillot. Cela représente la cinétique du caillot.

alpha - mesure la rapidité de l'accumulation et de la réticulation de la fibrine (renforcement du caillot). Cela représente le niveau de fibrinogène.

MA - L'amplitude maximale est une fonction directe des propriétés dynamiques maximales de la liaison de la fibrine et des plaquettes via GPIIb/IIIa et représente la force ultime du caillot de fibrine. Cela représente la fonction/l'agrégation plaquettaire.

TMRTG - Temps jusqu'au taux maximal de génération de thrombus. MRTG - Taux maximal de génération de thrombus. TG - Thrombus total généré. TMRL - ​​Temps jusqu'au taux maximal de lyse MRL - ​​Taux maximal de lyse L - Lyse totale D - Delta est la différence entre le temps R et le temps du point de partage initial (SP, mins) du tracé TEG (R - SP), représentant l'intervalle de temps de la plus grande croissance de caillot secondaire à la génération maximale de thrombine.

B) Système de thrombogramme automatisé calibré (CAT) : le temps de latence, le pic de production de thrombine, l'indice de vitesse moyenne et le potentiel de thrombine endogène (ETP) seront évalués par un thrombogramme automatisé calibré dans du plasma pauvre en plaquettes (thrombinoscope de Stago).