Edoxabans inverkan på koagulerbarhet och trombingenerering: en in vitro-studie med fokus på trombelastografi

Experimentellt protokoll

1. På dagen för experimentet kommer blodprover att samlas in i 3,2 % citratrör.
2. Ett rör med citratblod kommer att centrifugeras för att samla in plasma för biomarkörmätningar (C-reaktivt protein (CRP), fibrinogen, von Willebrand-faktor (vWF), interleukin (IL)-6, p-selektin, plasminogenaktivatorhämmare (PAI)-1 matrismetalloproteinas (MMP)-9).
3. Blodprover kommer att inkuberas med olika koncentrationer av edoxaban (ingen edoxaban, subterapeutiskt område - 30 nM, terapeutiskt område -300 nM och supraterapeutiskt område - 900 nM) (3).

A) Cora® Hemostasis Analyzer System (Cora®) kommer att användas för att bedöma kvalitativ och kvantitativ bedömning av de hemostatiska egenskaperna hos ett blodprov i närvaro eller frånvaro av edoxaban. CORA är en integrerad datormodul med Ethernet-anslutningsmöjlighet och ger kontinuerliga resonansfrekvensviskoelasticitetsmätningar med hjälp av en fyra-kanals mikrofluidikpatron för att bestämma samtidig maximal trombocyt-fibrinkagelstyrka, fibrinkoagelstyrka och respons på antiblodplättsmedel eller antikoagulantia. Patronen har fyra kanaler - citratkaolin (CK)-kanal som mäter trombocyt-fibrin-koagelstyrkan, anti-Xa-kanal, DTI-kanal och FFC-kanal som mäter bidraget av funktionellt fibrinogen.

Dessutom kommer följande parametrar för trombingenereringskinetik att utvärderas från CK-kanalen med hjälp av V-kurva-mjukvaran - R - Tidsperiod för latens från det att blodet placerades i TEG®-analysatorn tills den initiala fibrinbildningen . Detta representerar den enzymatiska delen av koagulationen.

K - K tid är ett mått på hastigheten för att nå en viss nivå av koagelstyrka. Detta representerar koagelkinetik.

alfa - mäter hastigheten för fibrinuppbyggnad och tvärbindning (koagelförstärkning). Detta representerar fibrinogennivån.

MA - Maximum Amplitude är en direkt funktion av de maximala dynamiska egenskaperna hos fibrin- och trombocytbindning via GPIIb/IIIa och representerar den ultimata styrkan hos fibrinklumpen. Detta representerar trombocytfunktion/aggregation.

TMRTG - Tid till maximal hastighet för trombgenerering. MRTG - Maximal hastighet av trombgenerering. TG - Total tromb genererad. TMRL - ​​Tid till maximal lyseringshastighet MRL - ​​Maximal lyseringshastighet L - Total lysering D - Delta är skillnaden mellan R-tid och tiden för initial delningspunkt (SP, min) av TEG-spårningen (R - SP), som representerar tidsintervallet för största koageltillväxt sekundärt till toppgenerering av trombin.

B) Kalibrerat Automated Thrombogram® (CAT) System: Fördröjningstid, toppproduktion av trombin, medelhastighetsindex och endogen trombinpotential (ETP) kommer att bedömas med ett kalibrerat automatiserat trombogram i blodplättsfattig plasma (Trombinoskop av Stago).