Einfluss von Edoxaban auf Gerinnbarkeit und Thrombinbildung: Eine in-vitro-Studie mit Fokus auf Thrombelastographie

Versuchsprotokoll

1. Am Tag des Experiments werden Blutproben in Röhrchen mit 3,2 % Citrat gesammelt.
2. Ein Citrat-Blutröhrchen wird zentrifugiert, um Plasma für Biomarker-Messungen (C-reaktives Protein (CRP), Fibrinogen, von-Willebrand-Faktor (vWF), Interleukin (IL)-6, p-Selectin, Plasminogen-Aktivator-Inhibitor (PAI)-1 zu sammeln , Matrixmetalloproteinase (MMP)-9).
3. Blutproben werden mit verschiedenen Edoxaban-Konzentrationen inkubiert (kein Edoxaban, subtherapeutischer Bereich – 30 nM, therapeutischer Bereich – 300 nM und supratherapeutischer Bereich – 900 nM) (3).

A) Das Cora® Hemostasis Analyzer System (Cora®) wird verwendet, um die qualitative und quantitative Bewertung der hämostatischen Eigenschaften einer Blutprobe in Gegenwart oder Abwesenheit von Edoxaban zu beurteilen. Das CORA ist ein integriertes Computermodul mit Ethernet-Anschlussfähigkeit und bietet kontinuierliche Resonanzfrequenz-Viskoelastizitätsmessungen unter Verwendung einer mikrofluidischen Einwegkartusche mit vier Kanälen, um gleichzeitig die maximale Thrombozyten-Fibrin-Gerinnselstärke, die Fibringerinnselstärke und die Reaktion auf Thrombozytenaggregationshemmer oder Antikoagulantien zu bestimmen. Die Kartusche hat vier Kanäle – Citrat-Kaolin (CK)-Kanal, der die Thrombozyten-Fibrin-Gerinnselstärke misst, Anti-Xa-Kanal, DTI-Kanal und FFC-Kanal, der den Beitrag von funktionellem Fibrinogen misst.

Darüber hinaus werden unter Verwendung der V-Kurven-Software die folgenden Parameter der Thrombinerzeugungskinetik aus dem CK-Kanal bewertet: R – Latenzzeit von dem Zeitpunkt, zu dem das Blut in den TEG®-Analysator gegeben wurde, bis zur anfänglichen Fibrinbildung . Dies stellt den enzymatischen Teil der Gerinnung dar.

K - Die K-Zeit ist ein Maß für die Geschwindigkeit, mit der ein bestimmtes Maß an Gerinnungsstärke erreicht wird. Dies repräsentiert die Gerinnselkinetik.

alpha – misst die Schnelligkeit des Fibrinaufbaus und der Quervernetzung (Gerinnselstärkung). Dies repräsentiert den Fibrinogenspiegel.

MA – Maximale Amplitude ist eine direkte Funktion der maximalen dynamischen Eigenschaften der Fibrin- und Blutplättchenbindung über GPIIb/IIIa und stellt die endgültige Stärke des Fibringerinnsels dar. Dies repräsentiert die Blutplättchenfunktion/Aggregation.

TMRTG – Zeit bis zur maximalen Rate der Thrombusbildung. MRTG – Maximale Rate der Thrombusbildung. TG - Gesamterzeugter Thrombus. TMRL – Zeit bis zur maximalen Lyserate MRL – maximale Lyserate L – Gesamtlyse D – Delta ist die Differenz zwischen der R-Zeit und der Zeit des anfänglichen Teilungspunkts (SP, min) der TEG-Kurve (R – SP), die repräsentiert das Zeitintervall des größten Gerinnselwachstums sekundär zur Spitzenbildung von Thrombin.

B) Kalibriertes automatisiertes Thrombogramm®-System (CAT): Verzögerungszeit, Spitzenthrombinproduktion, mittlerer Geschwindigkeitsindex und endogenes Thrombinpotential (ETP) werden durch ein kalibriertes automatisiertes Thrombogramm in plättchenarmem Plasma (Thrombinoskop von Stago) bewertet.