Mjuk peri-implantatvävnad runt olika distansmaterial

Tandimplantat förankras i käkbenet genom en direkt bindning mellan benet och implantatet. Framgång och överlevnad för ett implantat beror dock inte enbart på osseointegration. En mjuk vävnad, som omger den transmukosala delen av ett tandimplantat, separerar peri-implantatbenet från munhålan. Denna mjukdelskrage kallas "peri-implantat mucosa". Den mjuka vävnadens fäste på implantatets yta fungerar som en biologisk tätning som förhindrar utvecklingen av inflammatoriska periimplantatsjukdomar (dvs. peri-implantat mukosit och peri-implantit) Således säkerställer mjukvävnadsförseglingen runt implantaten friska tillstånd och stabil osseointegration och därmed även den långsiktiga överlevnaden av ett implantat. Medan mjukvävnadstätningen runt tänderna utvecklas under tandutbrott, bildas peri-implantatets slemhinna efter det operationssår som skapats för att införa implantatet. Sårläkningsfasen kan inträffa efter stängning av en mucoperiosteal flik runt halsdelen av ett implantat placerat i ett så kallat enstegsförfarande eller efter ett andra kirurgiskt ingrepp för distansanslutningar till ett redan installerat tandimplantat (tvåstegsprocedur). ).

Det verkar som om vidhäftningen av mjukvävnad påverkas av egenskaperna (distansmaterial och mikrotopografi) hos implantatkomponenterna som placeras i kontakt med mjukvävnaderna. Distansmaterial visade sig också påverka blödning vid sondering (BoP) vid peri-implantatets mjuka vävnader.

Eftersom sårläkning sker i närvaro av ett biomaterial (d.v.s. en främmande kropp) vid en kritisk region, måste positiva eller negativa störningar av sårläkningshändelser med detta biomaterial och anpassning av mjukvävnaden till detta biomaterial tas i beaktande. Biokompatibilitet, mjukvävnadsvidhäftning, plackretention, mekaniskt beteende och estetik listas bland kriterierna för val av materialdistans. Titan förblir det mest tillförlitliga materialet med tanke på dess mekaniska motstånd, biokompatibilitet, modifiering av ytan som ökar cellvidhäftningen och plackretention. Men i fallet med ökade estetiska krav, särskilt för tunna biotyper, ger zirkoniumoxid och keramiska aluminiumdistanser bättre resultat med jämförbara tekniska och biologiska resultat som titandistanser.

Polyetereterketon (PEEK) är ett starkt termoplastiskt material framställt av polyetereterketonharts. På grund av sin höga mekaniska styrka och hållbarhet, goda elektriska egenskaper och enastående motståndskraft mot hydrolys, har PEEK använts flitigt inom flyg-, bil-, kemi-, elektronik-, petroleum- och livsmedels- och dryckesindustrin. Nyligen utvecklades en PEEK av medicinsk kvalitet. PEEK av medicinsk kvalitet har samma fysiska egenskaper som PEEK; PEEK-OPTIMA™ är dock också biokompatibelt, har hög kemikalieresistens och motstår flera olika steriliseringsmetoder. Det är anmärkningsvärt att nämna att PEEK har en elasticitetsmodul som liknar den hos benet och förhindrar marginell benförlust i händelse av ocklusal överbelastning. På grund av ovan nämnda egenskaper har PEEK använts som distansmaterial.

Morfologin hos distansen förtjänar också överväganden. Viss fysiologisk mjukdelsnedgång kan ses i tiden runt implantatrestaureringar när en divergerande emergensprofil (den vanligaste) väljs bredvid mjukvävnaden. Nyligen har det visats hur viss gingival koronal migration kan ses med användning av avsmalnande uppkomstprofildistanser. Genom att använda dessa avsmalnande distanser eller en implantatdesign med en avsmalnande form på halsimplantatnivån (transmukosal nivå), kunde inte bara mjukvävnadsmigrering utan även hårdvävnadsmigrering uppnås med tiden.

Läkning av peri-implantat slemhinna kännetecknas av en snabb bildning av vaskulära strukturer och rekrytering av inflammatoriska celler följt av mognad av en vävnad som så småningom etablerar en fast barriär av suprakrestal bindväv och lång junctional epitel, vilket effektivt förhindrar nedväxt av en bakteriell biofilm . Angiogenes som en kritisk del av sårläkning noteras som topp efter 2 veckor med en minskning under 10 veckor, medan rekryteringen av inflammatoriska celler (B-celler och T-celler) sker i kluster och minskar från 4 till 8 veckors läkning i bindväv. .

Det finns dock lite tillgängligt om det mycket tidiga svaret som kan bestämma den histologiska organisationen av peri-implantat mjukvävnader i allmänhet och i kontakt med olika makroskopiska och mikroskopiskt modifierade material. Peri-implantatets mjuka vävnader är en del av tandköttet och munslemhinnan och implantatplacering sker genom skapandet av ett sår. Myofibroblaster representerar nyckelspelare i den fysiologiska rekonstruktionen av bindväv efter skada och för att generera de patologiska vävnadsdeformationer som kännetecknar fibros. De utgör en kritisk cellulär källa för typ I-kollagen, vilket är nödvändigt under sårläkning. Överdriven sammandragning och överproduktion av extracellulär matris, främst kollagen, av myofibroblaster kan orsaka vävnadsfibros med bildning av hypertrofiska ärr som kännetecknas av minskad draghållfasthet och desorienterade kollagenfibrer. I hudsår med full tjocklek börjar myofibroblastdifferentieringen ungefär en vecka efter såret, och sammandragningen toppar 5-15 dagar efter såret, men i munhålan sker detta steg tidigare än i huden, med tanke på den kortare läkningstiden för dessa vävnader.

Därför var syftet med denna studie att utvärdera myofibroblastkomponenten i peri-implantat slemhinnevävnader vid olika läkande distansmaterial (titan gr4, titanium gr 5, zirkonium och PEEK) 24 timmar efter placering.

MATERIAL OCH METODER Etisk aspekt Detta protokoll kommer att utvärderas av den etiska kommittén vid Sapienza-universitetet i Rom efter institutionens godkännande. Varje patient kommer att få ett skriftligt informerat samtycke.

Studiedesign Biomolekylär studie av biopsier tagna från periimplantatets mjukvävnad 24 timmar efter implantation och placering av läkningsdistansen av fyra olika material (titan gr4, titanium gr 5, zirkonium och PEEK).

Operatörer, blindhet och allokering Implantat och distanser kommer att placeras av en enda operatör, som inte är involverad i andra funktioner under studien. En andra operatör, som inte är involverad i implantat- eller distansplacering, kommer att utföra biopsi. Laboratorieoperatören kommer att vara blind för tilldelningen av biopsier. Typen av distans som är associerad med varje implantat kommer att bestämmas i ett stängt kuvert som kommer att öppnas först när implantatet placeras. Patienterna kommer att informeras om vilken typ av implantat och distanser som används men inte om den exakta platsen för var och en.

Provegenskaper Totalt 10 patienter som rekryterats för implantatbehandling vid tandkliniken vid Sapienza-universitetet i Rom kommer att delta i studien efter att inklusions- och uteslutningskriterierna har uppfyllts.

Inklusionskriterier:

(I) Ålder ≥ 18 år (II) Frånvaro av systemiska sjukdomar/störningar (III) Rökning ≤ 5 cigaretter per dag (IV) Periodontalt frisk eller behandlad (V) Plackpoäng i hela munnen (FMPS) ≤ 15 % vid baslinjen (VI) ) Blödningspoäng för full mun (FMBS) ≤ 15 % vid baslinjen (VII) Förekomst av tandlöst utrymme som behöver en behandling med allt på fyra eller alla på sex med överprotes (VIII) Bredd på den keratiniserade gingiva ≥ 2 i nivå med krönet

Uteslutningskriterier: (uteslutning av risk/konfounderande faktorer):

(I) Graviditet/amning (II) Användning av systemiska antibiotika under de senaste 3 månaderna (III) Användning av systemiska antibiotika som profylax för endokardit (IV) En kroniskt behandlad patient (dvs. 2 veckor eller längre) med läkemedel som är kända för att påverka parodontala vävnader (t.ex. fenytoin, kalciumantagonister, ciklosporin, warfarin och icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel) sista månaden innan studiestart (V) Strålbehandling i hals-huvudregionen (VI) HIV, TB, hepatit eller andra infektionssjukdomar (VII) Missbruk med droger eller alkohol (VIII) Rökta cigaretter> 5 cigaretter per dag (IX) Obehandlad parodontit (X) FMPS> 15 % vid baslinjen (XI) FMBS> 15 % vid baslinjen (XII) Implantat med peri-implantathistoria (XIII) Bredd av keratiniserad vävnad över krön <2 mm (XIV) Behov av benrekonstruktion runt implantat som ska sättas in

Klinisk behandling

Protokollet kommer att följa Tomasi et al 2014 med modifiering av ett baslinjeprov taget vid snitt för beredning av fliken. Kortfattat, efter lokalbedövning, flikhöjning och implantatplacering (Sverige och Martina SpA, Padova, Italien), kommer en specialdesignad distans av fyra olika material (tigran gr4, tigran gr 5, zirkonium och PEEK) att kopplas till varje implantat efter en dubbelblindad allokering och flikar kommer att sys. Patienterna kommer att skölja med klorhexidin i 1 vecka tills suturen tas bort. Efter 24 timmar från implantatplacering kommer en specialtillverkad skäranordning att användas för att hämta en periferiell biopsi av peri-implantatets mjukvävnad. En styrstift kommer att kopplas till distansen och en cirkulär stans med en skäregg kommer att tvingas apikalt runt distansen dissekeras en 1,5 mm tjock krage av peri-implantat mjukvävnad och ta bort den tillsammans med distansen och skäranordningen. Hela systemet kommer att placeras i 4% formalin och överföras till en 70% etanollösning efter 48 timmar.

Cito- histologisk analys

Cell Immunofluorescerande färgning och konfokal mikroskopi. När de har skördats med ett slag runt implantathalsen, erhålls celler med hjälp av explantationsmetoden. Proverna på 2 mm hackas först och placeras sedan i en odlingskolv och inkuberas i kompletta medier i 5 % CO2 vid 37°C. Alternativt placeras prover i DMEM med hög glukoshalt kompletterad med 15 % FBS och antibiotika, och förvaras vid 4 C i 24 timmar. Celler fixeras sedan i 4% PFA i PBS under 30 minuter vid rumstemperatur. För att märka molekylerna av intresse permeabiliseras cellerna i PBS/10% getserum/0,3% Triton X-100 (1h, 20°C), följt av primära antikroppar (mot cytoskelett/cytoskelettassocierade proteiner och matrisproteiner) i PBS/0,1% BSA/0,3% Triton X-100 (4°C, 20°C), tvättades och inkuberades med sekundär antikropp, DAPI och/eller falloidin (4°C, 20°C). Konfokal fluorescens (Leica SP8) och epifluorescensmikroskopi (DeltaVision-systemet) utförs med 20x/0,50 NA och 40x/0,80 NA objektiv (Olympus FV1000).

Biopsivävnadsmikroskopi. Vävnadsprover erhållna efter kirurgiskt avlägsnande fixeras i formalin och sektioneras med en vibratom (Leica, VT100s) för att erhålla 200 μm tjocka skivor. För optimerad antikroppspenetration utförs sekventiell 24 timmars inkubation (4°C) för varje primär och sekundär antikroppsinkubations- och tvättsteg (PBS/2 % getserum/0,1 % Triton X-100/0,05 % NaN3). Bilder förvärvas med tvåfotonmikroskopi med ett 20x /NA 0,95 objektiv (Olympus XLUMPlanFI 206) och excitation vid 910/1090/1180 nm.

Statistisk analys

Totalt 80 prover kommer att tas vid implantatinförande och 24 timmar efter, vart och ett analyseras tre gånger. Resultaten kommer att uttryckas som medelvärden och SD-värden och ANOVA- och Mann-Whitney-test från lämplig programvara (STATA version 13.1; StataCorp LP; College Station, TX) som används för att hitta skillnaden mellan de fyra distansmaterialen