Мягкая периимплантная ткань вокруг различных материалов абатмента

Зубные имплантаты закрепляются в кости челюсти за счет прямого соединения между костью и имплантатом. Однако успех и приживаемость имплантата зависят не только от остеоинтеграции. Мягкая ткань, окружающая трансмукозную часть зубного имплантата, отделяет периимплантатную кость от полости рта. Этот воротник из мягких тканей называется периимплантатной слизистой оболочкой. Прикрепление мягких тканей к поверхности имплантата служит биологическим уплотнением, предотвращающим развитие воспалительных периимплантатных заболеваний (т. периимплантатный мукозит и периимплантит) Таким образом, уплотнение мягких тканей вокруг имплантатов обеспечивает здоровые условия и стабильную остеоинтеграцию, а, следовательно, и долгосрочную приживаемость имплантата. В то время как уплотнение мягких тканей вокруг зубов развивается во время прорезывания зубов, слизистая оболочка вокруг имплантата формируется после хирургической раны, созданной для установки имплантата. Фаза заживления раны может наступить после закрытия слизисто-надкостничного лоскута вокруг шейки имплантата, установленного при так называемой одноэтапной процедуре, или после повторного хирургического вмешательства для соединения абатментов с уже установленным зубным имплантатом (двухэтапная процедура). ).

Похоже, что на адгезию мягких тканей влияют свойства (материал абатмента и микрорельеф) компонентов имплантата, которые соприкасаются с мягкими тканями. Было обнаружено, что материал абатмента также влияет на кровотечение при зондировании (BoP) мягких тканей вокруг имплантата.

Поскольку заживление раны происходит в присутствии биоматериала (т. е. инородного тела) в критической области, необходимо учитывать положительное или отрицательное влияние процессов заживления раны на этот биоматериал и адаптацию мягких тканей к этому биоматериалу. Биосовместимость, адгезия к мягким тканям, удержание налета, механическое поведение и эстетика входят в число критериев выбора материала абатмента. Титан остается самым надежным материалом, учитывая его механическую стойкость, биосовместимость, модификацию поверхности, повышающую адгезию клеток и удержание зубного налета. Однако в случае повышенных эстетических требований, особенно для тонкого биотипа, абатменты из диоксида циркония и керамики из алюминия дают лучшие результаты с сопоставимыми техническими и биологическими результатами с титановыми абатментами.

Полиэфирэфиркетон (PEEK) представляет собой прочный термопластичный материал, изготовленный из полиэфиркетоновой смолы. Благодаря своей высокой механической прочности и долговечности, хорошим электрическим характеристикам и выдающейся устойчивости к гидролизу PEEK широко используется в аэрокосмической, автомобильной, химической, электронной, нефтяной и пищевой промышленности. Недавно был разработан PEEK медицинского назначения. Медицинский PEEK имеет те же физические свойства, что и PEEK; однако PEEK-OPTIMA™ также является биосовместимым, обладает высокой химической стойкостью и устойчив к нескольким различным методам стерилизации. Следует отметить, что модуль упругости PEEK аналогичен модулю упругости кости, что предотвращает потерю маргинальной кости в случае окклюзионной перегрузки. Благодаря вышеупомянутым свойствам PEEK используется в качестве материала абатмента.

Морфология абатмента также заслуживает внимания. Некоторую физиологическую рецессию мягких тканей можно наблюдать со временем вокруг реставраций имплантатами, когда рядом с мягкими тканями выбирается расходящийся профиль выхода (наиболее распространенный). Недавно было показано, как можно наблюдать некоторую коронковую миграцию десны при использовании абатментов с коническим профилем эмерджентности. На самом деле, используя эти конические абатменты или конструкцию имплантата с конической формой на уровне имплантата шейки (трансмукозный уровень), со временем может быть достигнута не только миграция мягких тканей, но и миграция твердых тканей.

Заживление слизистой оболочки вокруг имплантата характеризуется быстрым формированием сосудистых структур и рекрутированием воспалительных клеток с последующим созреванием ткани, которая в конечном итоге создает прочный барьер супракрестальной соединительной ткани и длинного соединительного эпителия, что эффективно предотвращает разрастание бактериальной биопленки. . Замечено, что ангиогенез как критическая часть заживления ран достигает пика через 2 недели со снижением в течение 10 недель, в то время как привлечение воспалительных клеток (В-клеток и Т-клеток) происходит кластерами и уменьшается от 4 до 8 недель заживления в соединительной ткани. .

Тем не менее, мало что известно об очень раннем ответе, который мог бы определить гистологическую организацию мягких тканей вокруг имплантата в целом и при контакте с различными макроскопически и микроскопически модифицированными материалами. Мягкие ткани вокруг имплантата являются частью десны и слизистой оболочки полости рта, и установка имплантата происходит через создание раны. Миофибробласты играют ключевую роль в физиологической реконструкции соединительной ткани после травмы и в возникновении патологических деформаций ткани, которые характеризуют фиброз. Они представляют собой важный клеточный источник коллагена I типа, который необходим при заживлении ран. Чрезмерное сокращение и перепроизводство внеклеточного матрикса, в основном коллагена, миофибробластами может вызвать фиброз тканей с образованием гипертрофического рубца, характеризующегося снижением прочности на растяжение и дезориентацией коллагеновых волокон. В полнослойных кожных ранах дифференцировка миофибробластов начинается примерно через неделю после ранения, а пик сокращения приходится на 5-15 сутки после ранения, но в полости рта этот этап происходит раньше, чем в коже, ввиду более короткого времени заживления этих тканей.

Таким образом, целью настоящего исследования была оценка миофибробластного компонента тканей слизистой оболочки вокруг имплантата при использовании различных материалов формирователя десны (титан gr4, титан gr 5, цирконий и PEEK) через 24 часа после установки.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Этический аспект Этот протокол будет оцениваться Этическим комитетом Университета Сапиенца в Риме после одобрения Департамента. Каждому пациенту будет предоставлено письменное информированное согласие.

Дизайн исследования Биомолекулярные исследования биоптатов, взятых из мягких тканей вокруг имплантата через 24 часа после установки имплантата и формирователя десны из четырех различных материалов (титан gr4, титан gr 5, цирконий и PEEK).

Операторы, слепота и выделение Имплантаты и абатменты будут устанавливаться одним оператором, не задействованным в других функциях во время исследования. Второй оператор, не участвующий в установке имплантата или абатмента, выполнит биопсию. Лаборант будет слеп к распределению биоптатов. Тип абатмента, связанного с каждым имплантатом, будет указан в закрытом конверте, который будет открываться только при установке имплантата. Пациенты будут проинформированы о типе используемых имплантатов и абатментов, но не о точном расположении каждого из них.

Характеристики выборки В общей сложности 10 пациентов, набранных для имплантации в Стоматологической клинике Университета Сапиенца в Риме, примут участие в исследовании после выполнения критериев включения и исключения.

Критерии включения:

(I) Возраст ≥ 18 лет (II) Отсутствие системных заболеваний/расстройств (III) Курение ≤ 5 сигарет в день (IV) Здоровый или пролеченный пародонтологический аппарат (V) Показатель полного зубного налета (FMPS) ≤ 15% на исходном уровне (VI) ) Показатель полноротовой кровоточивости (FMBS) ≤ 15% на исходном уровне (VII) Наличие беззубого пространства, требующего лечения «все на четырех» или «все на шести» с съемным протезом (VIII) Ширина кератинизированной десны ≥ 2 на уровне гребня

Критерии исключения: (исключение факторов риска / смешанных факторов):

(I) Беременность/лактация (II) Применение системных антибиотиков в течение последних 3 месяцев (III) Использование системных антибиотиков в качестве профилактики эндокардита (IV) Пациенты, которые постоянно лечатся (т.е. 2 недели или дольше) лекарствами, которые, как известно, влияют на ткани пародонта (например. фенитоин, антагонисты кальция, циклоспорин, варфарин и нестероидные противовоспалительные препараты) за последний месяц до начала исследования (V) Лучевая терапия в области шеи и головы (VI) ВИЧ, туберкулез, гепатит или другие инфекционные заболевания (VII) Злоупотребление с наркотиками или алкоголем (VIII) Курение > 5 сигарет в день (IX) Нелеченый пародонтит (X) FMPS > 15% в начале исследования (XI) FMBS > 15% в начале исследования (XII) Имплантаты с периимплантным анамнезом (XIII) Ширина ороговевшей ткани над гребнем <2 мм (XIV) Необходимость реконструкции кости вокруг устанавливаемых имплантатов

Клиническое лечение

Протокол будет следовать Tomasi et al 2014 с модификацией исходного образца, взятого при разрезании для подготовки лоскута. Вкратце, после местной анестезии, подъема лоскута и установки имплантата (Sweden and Martina SpA, Падуя, Италия) к каждому имплантату после двойное слепое выделение и лоскуты будут ушиты. Пациенты будут полоскать рот хлоргексидином в течение 1 недели до снятия швов. Через 24 часа после установки имплантата будет использовано изготовленное по индивидуальному заказу режущее устройство для извлечения периферической биопсии мягких тканей вокруг имплантата. Направляющий штифт будет присоединен к абатменту, и круглый пуансон с режущей кромкой будет протолкнут апикально вокруг абатмента, рассечет воротник мягких тканей вокруг имплантата толщиной 1,5 мм и удалит его вместе с абатментом и режущим устройством. Всю систему помещают в 4% формалин и через 48 часов переносят в 70% раствор этанола.

Цито-гистологический анализ

Иммунофлуоресцентное окрашивание клеток и конфокальная микроскопия. После сбора пробойником вокруг шейки имплантата клетки получают методом эксплантации. Образцы размером 2 мм сначала измельчают, а затем помещают в колбу для культивирования и инкубируют в полной среде с 5% CO2 при 37°C. В качестве альтернативы образцы помещают в DMEM с высоким содержанием глюкозы, дополненную 15% FBS и антибиотиками, и хранят при 4°C в течение 24 часов. Затем клетки фиксируют в 4% PFA в PBS в течение 30 мин при комнатной температуре. Чтобы пометить интересующие молекулы, клетки пермеабилизируют в PBS/10% козьей сыворотке/0,3% Triton X-100 (1 ч, 20°C), а затем первичные антитела (против цитоскелетных/связанных с цитоскелетом белков и белков матрикса) в PBS/0,1% BSA/0,3% Triton X-100 (4°C, 20°C), промывали и инкубировали со вторичным антителом, DAPI и/или фаллоидином (4°C, 20°C). Конфокальная флуоресцентная (Leica SP8) и эпифлуоресцентная микроскопия (система DeltaVision) выполняются с использованием объективов 20x/0,50 NA и 40x/0,80 NA (Olympus FV1000).

Микроскопия биоптата. Образцы ткани, полученные после хирургического удаления, фиксируют в формалине и делают срезы с помощью вибратома (Leica, VT100s) для получения срезов толщиной 200 мкм. Для оптимизации проникновения антител проводят последовательную 24-часовую инкубацию (4°C) для каждой стадии первичной и вторичной инкубации антител и промывки (PBS/2% козья сыворотка/0,1% Triton X-100/0,05% NaN3). Изображения получают с помощью двухфотонной микроскопии с объективом 20x/NA 0,95 (Olympus XLUMPlanFI 206) и возбуждением при 910/1090/1180 нм.

статистический анализ

Всего будет взято 80 образцов при введении имплантата и через 24 часа после него, каждый из которых будет проанализирован трижды. Результаты будут выражены в виде средних значений и значений стандартного отклонения, а также ANOVA и теста Манна-Уитни с помощью соответствующего программного обеспечения (STATA версии 13.1; StataCorp LP; College Station, TX), используемого для определения различий между четырьмя материалами абатментов.