Puha implantátum körüli szövet különböző műcsonk anyagok körül

A fogászati ​​implantátumok a csont és az implantátum közötti közvetlen kötésen keresztül rögzülnek az állcsontba. Az implantátum sikere és túlélése azonban nem kizárólag az osseointegráción múlik. A fogászati ​​implantátum nyálkahártyán keresztüli részét körülvevő lágyszövet választja el az implantátum körüli csontot a szájüregtől. Ezt a lágyrész-gallért "implantátum körüli nyálkahártyának" nevezik. Az implantátum felületéhez való lágyrészrögzítés biológiai tömítésként szolgál, amely megakadályozza a gyulladásos periimplantátum-betegségek kialakulását (pl. periimplantális nyálkahártyagyulladás és periimplantitis) Így az implantátumok körüli lágyszöveti tömítés egészséges körülményeket és stabil csontos integrációt, ezáltal az implantátum hosszú távú túlélését is biztosítja. Míg a fogak körüli lágyszöveti tömítés a fog kitörése során alakul ki, addig az implantátum behelyezése során keletkezett műtéti seb után kialakul az implantátum körüli nyálkahártya. A sebgyógyulási szakasz az úgynevezett egylépcsős eljárás során behelyezett implantátum nyaki része körüli nyálkahártya-lebeny lezárását követően, vagy egy második műtéti beavatkozás után következhet be, amely a már behelyezett fogászati ​​implantátumhoz való pillércsatlakozásokhoz szükséges (kétlépcsős eljárás). ).

Úgy tűnik, hogy a lágyrészek adhézióját a lágyszövetekkel érintkezésbe kerülő implantátum komponensek tulajdonságai (csonkanyag és mikrotopográfia) befolyásolják. Azt találták, hogy a felfekvő anyag befolyásolja a vérzést a szondázáskor (BoP) az implantátum körüli lágyszövetekben is.

Mivel a sebgyógyulás egy bioanyag (azaz idegen test) jelenlétében megy végbe egy kritikus területen, figyelembe kell venni a sebgyógyulási események pozitív vagy negatív interferenciáját ezzel a bioanyaggal és a lágyszövetek ehhez a bioanyaghoz való alkalmazkodását. A biokompatibilitás, a lágyszövetek adhéziója, a plakk visszatartása, a mechanikai viselkedés és az esztétika az anyagválasztás kritériumai között szerepel. A titán továbbra is a legmegbízhatóbb anyag mechanikai ellenálló képessége, biokompatibilitása, a felület módosulása, ami növeli a sejtadhéziót és a plakk megtartását. Azonban a megnövekedett esztétikai igények esetén, különösen a vékony biotípusok esetében, a cirkónium- és kerámia alumínium műcsonkok jobb eredményeket adnak a titán felépítményekkel összehasonlítható műszaki és biológiai eredményekkel.

A poliéter-éterketon (PEEK) egy erős hőre lágyuló anyag, amelyet poliéter-éter-keton gyantából állítanak elő. Nagy mechanikai szilárdsága és tartóssága, jó elektromos tulajdonságai és kiemelkedő hidrolízisállósága miatt a PEEK-et széles körben használják a repülőgépiparban, az autóiparban, a vegyiparban, az elektronikai iparban, a kőolaj-, valamint az élelmiszer- és italiparban. A közelmúltban egy orvosi minőségű PEEK-et fejlesztettek ki. Az orvosi minőségű PEEK ugyanazokkal a fizikai tulajdonságokkal rendelkezik, mint a PEEK; ugyanakkor a PEEK-OPTIMA™ biológiailag is kompatibilis, magas vegyszerállósággal rendelkezik, és számos különböző sterilizációs módszernek ellenáll. Érdemes megemlíteni, hogy a PEEK rugalmassági modulusa hasonló a csontéhoz, ami megakadályozza a marginális csontvesztést okkluzális túlterhelés esetén. A fent említett tulajdonságok miatt a PEEK-et támasztóanyagként használták.

A műcsonk morfológiája is megfontolandó. Némi fiziológiás lágyszöveti recesszió időben észlelhető az implantátum restauráció körül, amikor a lágyszövet mellett eltérő (a leggyakoribb) megjelenési profilt választanak. A közelmúltban bebizonyosodott, hogy az ínykoronális vándorlás hogyan figyelhető meg a kúpos kiemelkedési profilú felépítmények használatával. Valójában ezeknek a kúpos műcsonkoknak vagy a nyaki implantátum szintjén (transmukozális szinten) elkeskenyedő alakú implantátum-kialakítással nem csak a lágyszövetek, hanem a keményszövetek migrációja is elérhető idővel.

Az implantátum körüli nyálkahártya gyógyulását a vaszkuláris struktúrák gyors kialakulása és a gyulladásos sejtek felszaporodása jellemzi, amelyet egy szövet érése követ, amely végül szilárd gátat hoz létre a szupracrestalis kötőszövet és a hosszú junkcionális hám között, ami hatékonyan megakadályozza a bakteriális biofilm lefejlődését. . Az angiogenezis, mint a sebgyógyulás kritikus része, 2 héten belül tetőzik, és 10 hét alatt csökken, míg a gyulladásos sejtek (B-sejtek és T-sejtek) csoportosulva jelennek meg, és a kötőszövetben a gyógyulás 4-ről 8 hétre csökken. .

A nagyon korai válaszreakciókról azonban kevés adat áll rendelkezésre, amely meghatározhatná az implantátum körüli lágyszövetek szövettani elrendeződését általában és a különböző makroszkópikus és mikroszkóposan módosított anyagokkal érintkezve. Az implantátum körüli lágyszövetek a fogíny és a szájnyálkahártya részét képezik, és az implantátum beültetése seb keletkezésével történik. A myofibroblasztok kulcsszerepet képviselnek a kötőszövet sérülés utáni fiziológiás rekonstrukciójában és a fibrózisra jellemző kóros szöveti deformációk létrehozásában. Az I. típusú kollagén kritikus sejtforrását képezik, amely elengedhetetlen a sebgyógyulás során. Az extracelluláris mátrix, főleg a kollagén túlzott összehúzódása és túltermelése a myofibroblasztok által szöveti fibrózist okozhat, hipertrófiás heg képződésével, amelyet csökkent szakítószilárdság és dezorientált kollagénrostok jellemeznek. A teljes vastagságú bőrsebekben a myofibroblasztok differenciálódása körülbelül egy héttel a sebzés után kezdődik, és a kontrakció 5-15 nappal a sebzés után tetőzik, de a szájüregben ez a lépés korábban következik be, mint a bőrben, tekintettel e szövetek rövidebb gyógyulási idejére.

Ezért jelen tanulmány célja a periimplantális nyálkahártya szövetek myofibroblaszt komponensének értékelése volt különböző gyógyító felfekvési anyagokon (titán gr4, titán gr 5, cirkónium és PEEK) 24 órával a beültetés után.

ANYAG ÉS MÓDSZER Etikai szempont Ezt a protokollt a Római Sapienza Egyetem Etikai Bizottsága értékeli a tanszék jóváhagyása után. Minden beteg írásos beleegyező nyilatkozatot kap.

Vizsgálatterv Az implantátum körüli lágyszövetből 24 órával vett biopsziák biomolekuláris vizsgálata négy különböző anyag (titán gr4, titán gr 5, cirkónium és PEEK) beültetése és gyógyító műcsonk elhelyezése után.

Operátorok, vakság és allokáció Az implantátumokat és a felépítményeket egyetlen kezelő helyezi el, aki nem vesz részt más funkciókban a vizsgálat során. Egy második operátor, aki nem vesz részt az implantátum vagy a műcsonk elhelyezésében, elvégzi a biopsziát. A laboratórium kezelője vak lesz a biopsziák kiosztását illetően. Az egyes implantátumokhoz tartozó felépítmény típusát egy zárt borítékban határozzák meg, amelyet csak az implantátum behelyezésekor nyitnak ki. A betegek tájékoztatást kapnak a használt implantátumok és műcsonkok típusáról, de nem mindegyikük pontos helyéről.

A minta jellemzői A Római Sapienza Egyetem fogászati ​​klinikáján összesen 10 implantációs kezelésre toborzott beteg vesz részt a vizsgálatban, miután teljesítették a felvételi és kizárási kritériumokat.

Bevételi kritériumok:

(I) Életkor ≥ 18 év (II) Szisztémás betegségek / rendellenességek hiánya (III) Dohányzás ≤ 5 cigaretta naponta (IV) Periodontálisan egészséges vagy kezelt (V) Teljes száj plakk pontszám (FMPS) ≤ 15% a kiinduláskor (VI ) Teljes szájú vérzési pontszám (FMBS) ≤ 15% a kiindulási értéknél (VII) Fogatlanság, amely négy vagy mind a hat kezelést igényel túlfogsorral (VIII) A keratinizált íny szélessége ≥ 2 a gerinc szintjén

Kizárási kritériumok: (kockázati / zavaró tényezők kizárása):

(I) Terhesség / szoptatás (II) Szisztémás antibiotikumok alkalmazása az elmúlt 3 hónapban (III) Szisztémás antibiotikumok alkalmazása endocarditis megelőzésére (IV) Krónikusan (azaz 2 hetes vagy hosszabb ideig) kezelt beteg olyan gyógyszerekkel, amelyekről ismert, hogy hatással vannak a parodontális szövetekre (például. fenitoin, kalcium antagonisták, ciklosporin, warfarin és nem szteroid gyulladáscsökkentők) a vizsgálat megkezdése előtti utolsó hónapban (V) Sugárterápia a nyak-fej régióban (VI) HIV, TB, hepatitis vagy más fertőző betegségek (VII) Visszaélés kábítószerrel vagy alkohollal (VIII) Elszívott cigaretta > 5 cigaretta naponta (IX) Kezeletlen parodontitis (X) FMPS> 15% a kiinduláskor (XI) FMBS> 15% a kiinduláskor (XII) Implantátumok implantátum körüli anamnézissel (XIII) Szélesség keratinizált szövet a gerinc felett <2 mm (XIV) Csont-rekonstrukció szükségessége a behelyezendő implantátumok körül

Klinikai kezelés

A protokoll Tomasi és munkatársai 2014-es eljárását követi a szárny előkészítéséhez bemetszéskor vett alapminta módosításával. Röviden, a helyi érzéstelenítést, a lebenyemelést és az implantátum beültetést követően (Svédország és Martina SpA, Padova, Olaszország) egy speciálisan kialakított műcsonkot négy különböző anyagból (tigran gr4, tigran gr 5, cirkónium és PEEK) csatlakoztatunk minden implantátumhoz. duplavak kiosztás és szárnyak varrásra kerülnek. A betegeket klórhexidinnel kell öblíteni 1 hétig a varrat eltávolításáig. Az implantátum beültetésétől számított 24 óra elteltével egy testre szabott vágóeszközt használnak az implantátum körüli lágyszövet kerületi biopsziájának kinyerésére. Az ütközőhöz egy vezetőcsapot csatlakoztatunk, és egy vágóélű kör alakú lyukasztót apikálisan a műcsonk köré kényszerítünk, 1,5 mm vastag, implantátum körüli lágyrész gallért feldarabolunk, és az ütközővel és a vágóeszközzel együtt eltávolítjuk. Az egész rendszert 4%-os formalinba helyezik, és 48 óra elteltével 70%-os etanolos oldatba helyezik.

Cito-szövettani elemzés

Sejt immunfluoreszcens festés és konfokális mikroszkópia. Az implantátum nyaka körüli lyukasztással begyűjtött sejteket az explantációs módszerrel nyerik ki. A 2 mm-es mintákat először ledaráljuk, majd tenyészlombikba helyezzük, és teljes tápközegben, 5% CO2-ban 37 °C-on inkubáljuk. Alternatív megoldásként a mintákat 15% FBS-sel és antibiotikumokkal kiegészített magas glükóztartalmú DMEM-be helyezzük, és 4 C-on 24 órán át tároljuk. A sejteket ezután 4% PFA-ban PBS-ben fixáljuk 30 percig szobahőmérsékleten. A kérdéses molekulák megjelöléséhez a sejteket permeabilizáljuk PBS/10% kecskeszérum/0,3% elegyben. Triton X-100 (1 óra, 20 °C), majd elsődleges antitestek (citoszkeletális/citoszkeletonhoz kapcsolódó fehérjék és mátrixfehérjék ellen) PBS/0,1% BSA/0,3% Triton X-100 (4 °C, 20 °C), mossuk, és másodlagos antitesttel, DAPI-val és/vagy falloidinnal inkubáljuk (4 °C, 20 °C). A konfokális fluoreszcenciát (Leica SP8) és az epifluoreszcens mikroszkópiát (DeltaVision rendszer) 20x/0,50 NA és 40x/0,80 NA objektívekkel (Olympus FV1000) végezzük.

Biopsziás szövetmikroszkópia. A sebészi eltávolítás után kapott szövetmintákat formalinban rögzítik, és vibratommal (Leica, VT100s) metszik, így 200 μm vastag szeleteket kapnak. Az optimalizált antitest behatolás érdekében 24 órás szekvenciális inkubációt (4 °C) kell végrehajtani minden elsődleges és másodlagos antitest inkubációs és mosási lépésnél (PBS/2% kecskeszérum/0,1% Triton X-100/0,05% NaN3). A képeket 20x /NA 0,95 objektívvel (Olympus XLUMPlanFI 206) és 910/1090/1180 nm-es gerjesztéssel készített kétfotonos mikroszkóppal.

Statisztikai analízis

Összesen 80 mintát vesznek az implantátum behelyezésekor és 24 órával azután, mindegyiket háromszor elemzik. Az eredményeket átlag- és SD-értékekkel, valamint megfelelő szoftverrel (STATA 13.1-es verzió; StataCorp LP; College Station, TX) végzett ANOVA- és Mann-Whitney-teszttel fejezzük ki, amelyeket a négy ütközőanyag közötti különbség megállapítására használunk.