Tecido mole peri-implantar ao redor de diferentes materiais de pilares

Os implantes dentários são ancorados no osso maxilar através de uma ligação direta entre o osso e o implante. O sucesso e a sobrevivência de um implante não dependem apenas da osseointegração. Um tecido mole, que envolve a parte transmucosa de um implante dentário, separa o osso peri-implantar da cavidade oral. Este colar de tecido mole é chamado de "mucosa peri-implantar". A fixação do tecido mole à superfície do implante serve como um selo biológico que previne o desenvolvimento de doenças inflamatórias peri-implantares (i.e. mucosite peri-implantar e peri-implantite) Assim, a vedação do tecido mole ao redor dos implantes garante condições saudáveis ​​e osseointegração estável e, portanto, também a sobrevivência a longo prazo de um implante. Enquanto a vedação do tecido mole ao redor dos dentes se desenvolve durante a erupção dentária, a mucosa peri-implantar se forma após a ferida cirúrgica criada para inserir o implante. A fase de cicatrização da ferida pode ocorrer após o fechamento de um retalho mucoperiosteal ao redor da porção do pescoço de um implante colocado em um procedimento chamado de um estágio ou após uma segunda intervenção cirúrgica para conexões de pilares a um implante dentário já instalado (procedimento de dois estágios ).

Parece que a adesão dos tecidos moles é influenciada pelas propriedades (material do pilar e microtopografia) dos componentes do implante que são colocados em contato com os tecidos moles. Verificou-se que o material do pilar também influencia o sangramento à sondagem (BoP) nos tecidos moles peri-implantares.

Como a cicatrização de feridas ocorre na presença de um biomaterial (ou seja, um corpo estranho) em uma região crítica, as interferências positivas ou negativas dos eventos de cicatrização de feridas com esse biomaterial e a adaptação do tecido mole a esse biomaterial devem ser levadas em consideração. Biocompatibilidade, adesão de tecidos moles, retenção de placa, comportamento mecânico e estética estão listados entre os critérios de seleção de materiais de pilares. O titânio continua sendo o material mais confiável devido à sua resistência mecânica, biocompatibilidade, modificação da superfície aumentando a adesão celular e retenção de placa. No entanto, no caso de demandas estéticas aumentadas, particularmente para biotipos finos, os pilares de zircônia e alumínio cerâmico oferecem melhores resultados com resultados técnicos e biológicos comparáveis ​​aos pilares de titânio.

Polieteretercetona (PEEK) é um forte material termoplástico produzido a partir de resina de polieteretercetona. Devido à sua alta resistência mecânica e durabilidade, boas características elétricas e excelente resistência à hidrólise, o PEEK tem sido amplamente utilizado nas indústrias aeroespacial, automotiva, química, eletrônica, de petróleo e de alimentos e bebidas. Recentemente, um PEEK de grau médico foi desenvolvido. O PEEK de grau médico tem as mesmas propriedades físicas do PEEK; no entanto, o PEEK-OPTIMA™ também é biocompatível, tem alta resistência química e resiste a vários métodos de esterilização diferentes. Vale ressaltar que o PEEK possui um módulo de elasticidade semelhante ao do osso evitando a perda óssea marginal em caso de sobrecarga oclusal. Devido às propriedades acima mencionadas, o PEEK tem sido usado como material de pilar.

A morfologia do pilar também merece considerações. Algumas recessões fisiológicas dos tecidos moles podem ser observadas ao redor das restaurações de implantes quando um perfil de emergência divergente (o mais comum) é escolhido próximo ao tecido mole. Recentemente, foi demonstrado como alguma migração coronal gengival pode ser vista com o uso de pilares de perfil de emergência cônicos. De fato, usando esses pilares cônicos ou um design de implante com formato cônico no nível do implante do pescoço (nível transmucoso), não apenas a migração de tecidos moles, mas também a migração de tecidos duros podem ser alcançados ao longo do tempo.

A cicatrização da mucosa peri-implantar é caracterizada por uma rápida formação de estruturas vasculares e recrutamento de células inflamatórias, seguida pela maturação de um tecido que eventualmente estabelece uma barreira firme de tecido conjuntivo supracrestal e epitélio juncional longo, o que efetivamente impede o crescimento de um biofilme bacteriano. . A angiogênese como uma parte crítica da cicatrização de feridas atinge o pico em 2 semanas com um declínio em 10 semanas, enquanto o recrutamento de células inflamatórias (células B e células T) ocorre em grupos e diminui de 4 a 8 semanas de cicatrização no tecido conjuntivo .

No entanto, pouco está disponível sobre a resposta muito precoce que possa determinar a organização histológica dos tecidos moles peri-implantares em geral e em contato com diferentes materiais macroscópicos e microscopicamente modificados. Os tecidos moles peri-implantares fazem parte da gengiva e da mucosa oral e a colocação do implante ocorre através da criação de uma ferida. Os miofibroblastos representam jogadores-chave na reconstrução fisiológica do tecido conjuntivo após a lesão e na geração das deformações patológicas do tecido que caracterizam a fibrose. Eles constituem uma fonte celular crítica de colágeno tipo I, que é essencial durante a cicatrização de feridas. A contração excessiva e a superprodução de matriz extracelular, principalmente colágeno, pelos miofibroblastos podem causar fibrose tecidual com formação de cicatriz hipertrófica caracterizada por resistência tênsil reduzida e fibras colágenas desorientadas. Em feridas cutâneas de espessura total, a diferenciação dos miofibroblastos inicia-se aproximadamente uma semana após o ferimento, e a contração atinge o pico em 5-15 dias pós-ferimento, mas na cavidade oral essa etapa ocorre mais cedo do que na pele, devido ao menor tempo de cicatrização desses tecidos.

Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar o componente miofibroblástico dos tecidos da mucosa peri-implantar em diferentes materiais de pilares de cicatrização (titânio gr4, titânio gr 5, zircônio e PEEK) 24 horas após a colocação.

MATERIAIS E MÉTODOS Aspecto ético Este protocolo será avaliado pelo Comitê de Ética da Universidade Sapienza de Roma após a aprovação do Departamento. Cada paciente receberá um consentimento informado por escrito.

Desenho do estudo Estudo biomolecular de biópsias retiradas do tecido mole peri-implante 24 horas após a colocação do implante e do pilar de cicatrização de quatro materiais diferentes (titânio gr4, titânio gr 5, zircônio e PEEK).

Operadores, cegueira e alocação Os implantes e pilares serão colocados por um único operador, não envolvido em outras funções durante o estudo. Um segundo operador, não envolvido na colocação do implante ou pilar, fará a biópsia. O operador do laboratório será cego quanto à alocação de biópsias. O tipo de pilar associado a cada implante será determinado em envelope fechado que só será aberto no momento da colocação do implante. Os pacientes serão informados sobre o tipo de implantes e pilares utilizados, mas não sobre a localização exata de cada um.

Características da amostra Um total de 10 pacientes recrutados para tratamento de implantes na clínica odontológica da Universidade Sapienza de Roma participarão do estudo após o cumprimento dos critérios de inclusão e exclusão.

Critério de inclusão:

(I) Idade ≥ 18 anos (II) Ausência de Doenças/Distúrbios Sistêmicos (III) Tabagismo ≤ 5 cigarros por dia (IV) Periodontalmente saudável ou tratado (V) Escore de placa em toda a boca (FMPS) ≤ 15% no início do estudo (VI ) Pontuação de sangramento em toda a boca (FMBS) ≤ 15% no início do estudo (VII) Presença de espaço edêntulo necessitando de um tratamento completo em quatro ou seis com overdenture (VIII) Largura da gengiva queratinizada ≥ 2 no nível da crista

Critérios de exclusão: (exclusão de risco/fatores de confusão):

(I) Gravidez/lactação (II) Uso de antibióticos sistêmicos nos últimos 3 meses (III) Uso de antibióticos sistêmicos como profilaxia para endocardite (IV) Paciente tratado cronicamente (ou seja, 2 semanas ou mais) com medicamentos conhecidos por afetar os tecidos periodontais (por exemplo. fenitoína, antagonistas do cálcio, ciclosporina, varfarina e anti-inflamatórios não esteróides) no último mês antes de iniciar o estudo (V) Radioterapia na região pescoço-cabeça (VI) HIV, TB, hepatite ou outras doenças infecciosas (VII) Abuso com drogas ou álcool (VIII) Cigarros fumados > 5 cigarros por dia (IX) Periodontite não tratada (X) FMPS> 15% na linha de base (XI) FMBS> 15% na linha de base (XII) Implantes com história peri-implantar (XIII) Largura de tecido queratinizado sobre a crista <2 mm (XIV) Necessidade de reconstrução óssea ao redor dos implantes a serem inseridos

Tratamento clínico

O protocolo seguirá Tomasi et al 2014 com a modificação de uma amostra de linha de base coletada durante a incisão para a preparação do retalho. Resumidamente, após anestesia local, elevação do retalho e colocação do implante (Suécia e Martina SpA, Pádua, Itália), um pilar especialmente projetado de quatro materiais diferentes (tigran gr4, tigran gr 5, zircônio e PEEK) será conectado a cada implante após uma alocação duplo-cega e os retalhos serão suturados. Os pacientes irão enxaguar com clorexidina por 1 semana até a remoção da sutura. Após 24 horas da colocação do implante, um dispositivo de corte personalizado será usado para recuperar uma biópsia circunferencial do tecido mole peri-implantar. Um pino guia será conectado ao pilar e um punção circular com ponta cortante será forçado apicalmente ao redor do pilar dissecado um colar de 1,5 mm de espessura de tecido mole peri-implantar e removendo-o juntamente com o pilar e o dispositivo de corte. Todo o sistema será colocado em formalina 4% e transferido para solução de etanol 70% após 48 h.

Análise cito-histológica

Coloração por imunofluorescência celular e microscopia confocal. Depois de colhidas com um punção ao redor do pescoço do implante, as células são obtidas usando o método de explante. As amostras de 2 mm são primeiro picadas e depois colocadas em um frasco de cultura e incubadas em meio completo em 5% de CO2 a 37°C. Alternativamente, as amostras são colocadas em DMEM com alto teor de glicose suplementado com 15% de FBS e antibióticos e armazenadas a 4°C por 24 horas. As células são então fixadas em 4% de PFA em PBS por 30 min em temperatura ambiente. Para marcar as moléculas de interesse, as células são permeabilizadas em PBS/10% soro de cabra/0,3% Triton X-100 (1h, 20°C), seguido de anticorpos primários (contra proteínas associadas ao citoesqueleto/citoesqueleto e proteínas da matriz) em PBS/0,1% BSA/0,3% Triton X-100 (4°C, 20°C), lavados e incubados com anticorpo secundário, DAPI e/ou faloidina (4°C, 20°C). A fluorescência confocal (Leica SP8) e a microscopia de epifluorescência (sistema DeltaVision) são realizadas usando objetivas 20x/ 0,50 NA e 40x/ 0,80 NA (Olympus FV1000).

Microscopia de tecido de biópsia. As amostras de tecido obtidas após a remoção cirúrgica são fixadas em formalina e seccionadas com um vibratome (Leica, VT100s) para obter fatias de 200 μm de espessura. Para penetração otimizada do anticorpo, incubação sequencial de 24 h (4°C) é realizada para cada incubação de anticorpo primário e secundário e etapas de lavagem (PBS/2% soro de cabra/0,1% Triton X-100/0,05% NaN3). As imagens são adquiridas usando microscopia de dois fótons com uma objetiva de 20x /NA 0,95 (Olympus XLUMPlanFI 206) e excitação em 910/1090/1180 nm.

Análise estatística

Um total de 80 amostras serão coletadas na inserção do implante e 24 horas após, cada uma analisada três vezes. Os resultados serão expressos como valores médios e DP e ANOVA e teste de Mann-Whitney do software apropriado (STATA versão 13.1; StataCorp LP; College Station, TX) usado para encontrar a diferença entre os quatro materiais de pilares