Kmenové buňky u pacientů s NF1 s nádory centrálního nervového systému

Hypotéza: Jedinci s NF1 a nádory centrálního nervového systému, kteří mají agresivní léze (včetně, ale bez omezení na gliomy optické dráhy) a/nebo pacienti s nádory způsobujícími neurologickou (včetně zrakové) morbidity, budou vykazovat jedinečné rozdíly ve svých kmenových buňkách a kmenových buňkách- derivované diferencované buňky ve srovnání s pacienty s NF1 a nádory centrálního nervového systému, kteří mají méně agresivní onemocnění a/nebo s těmi s nádory způsobujícími minimální až žádnou morbiditu.

Východiska a význam: Gliomy optické dráhy (OPG) jsou astrocytární tumory nízkého stupně malignity primárně postihující zrakový nerv, chiasma a trakt, které se vyskytují především u dětí. Téměř u 20 % dětí s neurofibromatózou typu 1 (NF1) se vyvinou OPG, i když u méně než poloviny se rozvine ztráta zraku z jejich nádoru.1 Tyto nádory mají vynikající výsledky přežití, takže ztráta zraku je u těchto pacientů primární morbiditou. Kromě toho jsou OPG vlastní zrakové dráze, a proto jsou biopsie prováděny jen zřídka, pokud vůbec. Tento nedostatek tkáně OPG omezuje naši schopnost objasnit biologické rozdíly mezi OPG, které způsobují ztrátu zraku, a těmi, které ne. Astrocytické gliomy nízkého stupně v jiných oblastech mozku včetně hypotalamu, mozkového kmene a mozečku lze také nalézt u podskupiny dětí spojených s NF1. Tyto mozkové nádory spojené s NF1 mohou progredovat a také růst různou rychlostí a mohou způsobit neurologickou dysfunkci v rozsahu od vážného ohrožení až po malé nebo žádné symptomy.

Tato studie se snaží vyvinout linie kmenových buněk u dětí s nádory souvisejícími s NF1 v centrálním nervovém systému (oční nerv a ty z jiných mozkových míst). Kmenové buňky od těchto subjektů poskytnou kritický pohled na mechanismy odpovědné za progresi nádoru a symptomy spojené s centrálním nervovým systémem, což urychlí identifikaci terapeutických cílů.

Předběžné studie: Tři nedávné výzkumy umožňují vyvinout model onemocnění specifického pro pacienta v misce (takzvaný „model lidské nemoci v misce“) a studovat buňky související s onemocněním související s indukovanými pluripotentními kmenovými buňkami (iPSC). isogenní pozadí. Za prvé, buňky podobné embryonálním kmenovým buňkám (ESC), také známé jako indukované pluripotentní kmenové buňky nebo iPSC, mohou být generovány z kůže nebo krevních buněk u dospělých pacientů. Za druhé, nedávné výzkumné úsilí začalo vyvíjet kultivační protokoly, které rozlišují iPSC na různé typy buněk v centrálním a periferním nervovém systému (CNS a PNS), které jsou postiženy u pacientů s NF1. Za třetí, technologie CRISPR/CAS9 umožňuje geneticky upravovat specifické geny onemocnění buď opravou existujících mutantních genů nebo vytvořením nových mutací. Abychom se dostali do popředí výzkumu NF1, bude důležité, aby Gilbert Family Neurofibromatosis Institute (GFNI) v Dětském národním zdravotním centru prozkoumal tento nedávný vzrušující vývoj ve výzkumu, aby systematicky vyvíjel pro pacienty specifické modely lidského onemocnění NF1 a poskytnout nástroj pro screening a hodnocení léků u jednotlivých pacientů s NF.

Design a metody:

3.1 Uspořádání studie Průřezový soubor subjektů NF1 s nádory v centrálním nervovém systému, jak je dokumentováno MRI.

3.2 Studijní návštěvy Subjekty budou mít pouze jednu návštěvu k odběru vzorku krve.

3.3 Postupy studie 3.31 Odběr krve Subjektům bylo odebráno 20 ml plné krve buď během 1) sedace pro jejich klinicky indikovanou MRI (IV již byla zavedena pro klinické účely) nebo prostřednictvím ambulantní laboratoře.

3.32 Zpracování kmenových buněk Odebraná krev bude okamžitě převedena do zařízení pro kmenové buňky v National Institutes of Health pro zpracování vzorků za účelem vývoje linií kmenových buněk.

3.33 Demografie Zjistíme věk, pohlaví, rasu, etnický původ subjektu, umístění nádorů v centrálním nervovém systému na MRI, historii ztráty zraku a další neurologické deficity.

3.34 Statistická analýza Jako první krok k vytvoření knihovny kmenových buněk ze specifické populace NF1 dětí s nádory nervového systému nebudeme v této fázi potřebovat statistickou analýzu.