Reakce dětí s atopickou dermatitidou (ekzémem) na Eucrisa

Celkový design studie je intervenční otevřená nerandomizovaná klinická studie léčby přípravkem Eucrisa (Eucrisa je lék schválený FDA pro tuto indikaci a v této věkové skupině) dvakrát denně po dobu 28 dní u dětí ve věku 5–17 let. Tato studie má v úmyslu zapsat celkem 30 účastníků. Hlavním účelem této studie je vyvinout biomarkery pro predikci reakce na Eucrisa. Hypotéza, že PDE4A je silnou hnací silou zánětu u pacientů s atopickou dermatitidou (AD) s vysokou kožní expresí PDE4A a že budou vysoce reagovat na Eucrisa.

Na základě dříve publikované studie s použitím minimálně invazivních biomarkerů páskových proužků k odlišení skupin pacientů byl zaznamenán 30násobný rozdíl při srovnání hladin exprese PDE4A mezi pacienty s vysokou TH2 a nízkou úrovní TH2 (celkem n=30). Vyšetřovatelé předpokládají, že ~ 50 % pacientů bude reagovat na primární výsledek zlepšení závažnosti onemocnění hodnocené klinikem (Globální hodnocení výzkumného pracovníka ze statického globálního hodnocení výzkumníka (ISGA)) definované jako jasné (0) nebo téměř jasné (1) s Zlepšení o 2 nebo více od výchozího stavu. Při celkové velikosti vzorku 30 vyšetřovatelé odhadují, že ~15 bude respondérů a ~15 nereagujících, s alfa=0,05, výkon=0,8, za předpokladu standardní odchylky log(2) až log(5) v rozdílu exprese mRNA. To by poskytlo schopnost vidět rozdíl v násobku exprese v rozmezí 1,9-4,1 a adekvátní schopnost vidět očekávané rozdíly ve vybraných biomarkerech. Za předpokladu 80% síly mají vyšetřovatelé také sílu pro sekundární analýzy, aby viděli korelace s biomarkery a sekundárními výsledky, s korelačním koeficientem ≥ 0,5.

Vyšetřovatelé se budou rekrutovat přímo z různých klinik Ann & Robert H. Lurie Children's Hospital (LC). Pacienti budou telefonicky kontaktováni za účelem screeningu 2 týdny před návštěvou kliniky a přijati na klinice k účasti ve studii.

Pokud účastníci povolí telefonicky, studijní personál se s nimi setká, když přijdou na návštěvu alergologické nebo dermatologické kliniky. Ve dnech 1 (základní návštěva) a 28 (závěrečná návštěva) budou provedeny následující postupy. Jejich kůže bude vyšetřena klinikem a pomocí neinvazivního přístroje AquaFlux bude měřena transepidermální ztráta vody (TEWL). Vzorky kůže budou odebrány z předloktní jamky účastníka a fotografie budou pořízeny pouze z místa odběru prostřednictvím protokolu strip stripping. Vzorky budou uloženy bez identifikátorů, pouze s identifikačním číslem studie (ID) účastníka. Fotografie budou uloženy na zaheslovaném počítači, přístupném pouze studijnímu personálu, bez jakýchkoliv identifikátorů a budou kódovány studijním ID. Účastníci a jejich pečovatelé budou také požádáni o vyplnění dotazníků, včetně formulářů pro měření svědění v informačním systému měření výsledků hlášených pacientem (PROMIS), položky PROMIS pro spánek a PROMIS Profil 25. Dítě navíc absolvuje měření ekzému orientovaného na pacienta (POEM) a index kvality života dětské dermatologie (CDLQI). Rodič a dítě také vyplní denní záznamy týkající se aplikace Eucrisa dítěte a budou obsahovat 10bodovou stupnici svědění. Všechny tyto formuláře budou spravovány elektronicky a shromážděná data budou uchovávána v zabezpečené databázi REDCap. Elektronické formuláře jsou nastaveny tak, že účastníci musí odpovědět na každou položku, aby studii dokončili. Pokud se necítí dobře odpovídat na určité položky, mohou se rozhodnout, že přestanou účastnit se studie bez následků. Pokud pouze při základní návštěvě je účastníkovi již odebrána krev pro jinou klinickou indikaci, bude mu navíc s jeho souhlasem odebrána krev pro studijní účely (15 ml) pro pozdější sekvenování RNA. Plazmatické a periferní krevní mononukleární buňky (PBMC) odebrané při úvodní návštěvě u této podskupiny pacientů budou zmraženy a uloženy (deidentifikovány, v uzamčeném mrazáku) při -80 °C pro pozdější zpracování a korelaci s biomarkery páskového proužku. Správný způsob aplikace terapie bude přezkoumán s pacientem a/nebo pečovatelem. Bude jim doporučeno, aby přerušili léčbu přípravkem Eucrisa a okamžitě vyhledali lékařskou pomoc, pokud se objeví známky nebo příznaky přecitlivělosti, a aby kontaktovali lékaře studie. Výzkumný tým bude předkládat zprávy o incidentech týkajících se nežádoucích událostí Lurie Children's Institutional Review Board (IRB) prostřednictvím jejich systému Cayuse. Identifikační čísla subjektů budou vedena odděleně od datové sady. Zdrojové dokumenty a formuláře kazuistik jsou uchovávány v zabezpečeném prostoru (v uzamčené skříni v uzamčené místnosti) na oddělení alergie a imunologie v Lurie Children's a všechna elektronická data jsou chráněna heslem a nebudou přenášena mimo server Lurie. .

Po izolaci exprese domnělých biomarkerů, konkrétně PDE4A. Primární analýza bude porovnávat základní úrovně střední exprese PDE4A ve skupinách „odpovídajících" versus „neodpovídajících". To bude definováno primárním klinickým výsledkem zlepšení závažnosti onemocnění na základě posouzení lékařem. Výzkumníci předpokládají data s normální distribucí, takže t-test porovná významnost průměrných hladin exprese. Pokud data nejsou normálně distribuována, budou srovnání provedena pomocí Mann-Whitney U testu. Sekundární analýzy se zaměří na průměrné rozdíly mezi ostatními biomarkery (TH2 (IL13, IL4R, CCL26), TH17/22 (IL36G), svěděním (ENKUR) a epidermálními geny (FLG, LOR a S100A9) u „respondérů“ versus „ne -odpovídající“ skupiny. V exploratorních analýzách vyšetřovatelé vyhodnotí, zda se tyto biomarkery změnily během léčby Eucrisou po 4 týdnech sledování. Konkrétně bude použit t-test párových vzorků (nebo Wilcoxonův test se znaménkem, pokud data nejsou normálně distribuována). Velikost změny v biomarkerech bude také popisně porovnána s velikostí klinického zlepšení onemocnění, podobně jako dříve publikované metody.

Aby bylo možné korelovat měření kvality života na začátku s úrovněmi exprese PDE4A, nejprve se data zpracují do grafu, aby se vizuálně zkontrolovala distribuce a asociace, s expresí PDE4A na ose X a měřením kvality života na ose Y. Pearsonův korelační koeficient bude použit k vyhodnocení síly asociace, v případě nenormálně distribuovaných dat bude k testování asociací použit Spearmanův korelační koeficient. V průzkumných analýzách se výzkumníci zaměří na vztah těchto genů po léčbě PDE4A. Budou provedeny další analýzy, aby se určilo, zda budou pacienti zařazeni do kategorie respondérů nebo nereagujících na všechna testovaná měření za použití klinicky významných rozdílů v testovaných měřeních. Vyšetřovatelé budou porovnávat reakce na měření kvality života pomocí deskriptivní statistiky. Kromě toho budou vyšetřovatelé také zvažovat průměrné hladiny PDE4A u respondérů versus nereagujících s použitím těchto hodnotících opatření.

Vyšetřovatelé se také pokusí vyvinout model logistické regrese k předpovědi respondentů Eucrisa. Konkrétně se vyšetřovatelé podívají na souvislost mezi každým biomarkerem a sledovaným výsledkem. Pokud je to významné, výzkumníci zahrnou do konečného modelu, aby určili klíčové biomarkery předpovídající Eucrisa respondéry.

Lurie Children's IRB a zajistí, že výzkum bude v souladu se všemi platnými zásadami a předpisy prostřednictvím jejich programu monitorování po schválení. Jejich zaměstnanci zkontrolují studijní dokumenty, naplánují a provedou návštěvy na místě s vyšetřovateli a budou s výzkumným týmem sledovat všechna zjištění, aby případně podnikli vhodná opatření.