Plant Sterol Intervention for Cancer Prevention (PINC) (PINC)

Dodání cholesterolu do extrahepatálních tkání prostřednictvím LDL má hluboký dopad na různé typy hostitelských buněk, z nichž mnohé se samy o sobě podílejí na metastázování BCa a chemorezistenci.

Navzdory hromadění dat stále není známo, jak hostitelské buňky pomáhají nádorům prsu metastázovat nebo vyhýbat se chemoterapii. Molekulární vazba mezi cholesterolem a metastázami může zahrnovat enzymatickou hydroxylaci (mezikrok v syntéze žlučových kyselin) cholesterolu. Syntéza a sekrece oxysterolů do mikroprostředí nádoru je u jedinců se zvýšeným LDL-cholesterolem umocněna. Tento proces, který se vyskytuje převážně v makrofázích, adipocytech a fibroblastech, vede k biosyntéze a buněčnému exportu oxysterolů, které řídí mutace DNA prostřednictvím oxidačního stresu, udělují rezistenci k chemoterapii, zvyšují růst BCa a metastázy a jsou zvýšené v séru pacientů s BCa při metastázách relapsu. Naše pilotní data ukazují, že nerakovinné hostitelské buňky aktivují signalizaci oxysterolů a expresi proteinu lékové rezistence a propůjčují sousedním rakovinným buňkám rezistenci vůči chemoterapii.

Vyšetřovatelé proto navrhují otestovat hypotézu, že důvodem, proč epidemiologické a klinické studie zjistily zvýšený LDL-C a jeho komorbidity spojené s horším přežitím u pacientů s BCa, je to, že hostitelské buňky těchto pacientů mají zvýšený metabolický tok cholesterolu vedoucí ke zvýšenému produkce oxysterolů a zlepšená tolerance chemoterapie a podpora metastatických cest rakoviny.

Tato studie je multicentrická zkřížená dvojitě zaslepená klinická studie, ve které budou dobrovolníci s LDL-C ≥160 mg/dl (4,1 mmol/l), přijatí na University of Leeds a/nebo identifikovaní prostřednictvím projektu Horizont 2020 PATHWAY-27. randomizovaně do dvou ramen intervence, skupině A (experimentální rameno) bude podáván jogurtový nápoj obohacený o PSS a skupině B (placebo komparátor) bude podáván jogurtový nápoj neobohacený o PSS. Každý dietní zásah bude trvat 8 týdnů, střídavě se 4 týdny vymývacím obdobím. Tato studie chce poukázat na nadřazenost intervence PSS (obohacený jogurtový nápoj) oproti placebu (neobohacený jogurtový nápoj) na zlepšení hladiny séra/plazmy a hostitelských buněk (adipocytů a makrofágů) LDL-C, oxysterolů, PSS v vysoké hladiny LDL-C u dobrovolníků a v příslušných upravených médiích z kokultivace hostitelských buněk/buněčných linií BCa a nadřazenost intervence PSS ve srovnání s placebem na zlepšení panelových hladin cholesterolu, které se podílejí na toleranci BCa chemoterapie a metastatické progresi, podle také na molekulární a genetické dráhy.

Vzhledem k neznámému účinku PSS na metabolismus oxysterolů a jeho následným chemoterapeutickým a antimetastatickým vlastnostem bude studie rozdělena do dvou fází (I a II):

I. V této pilotní fázi vyšetřovatelé prozkoumají účinky intervence PSS u 10 dobrovolníků, vyhodnotí proveditelnost protokolu studie (nábor a udržení účastníků) a změny v průměru a SD koncentrací oxysterolů/PSS, což způsobí změny ve výpočtech dávky a výkonu, pokud nutné. Pokud intervence způsobí jakýkoli pozoruhodný účinek na hladiny oxysterolů v séru/krvi a/nebo na kokultivaci hostitelských buněk s buňkami BCa, studie bude pokračovat do fáze II:

II. V této fázi bude do studie zapsáno dalších 40 dobrovolníků, kteří splňují naši předpověď výpočtu výkonu, aby bylo možné pozorovat účinek.

Tato randomizovaná zkřížená dvojitě slepá klinická studie bude probíhat především na School of Food Science and Nutrition, University of Leeds (FS&N). Každá lokalita bude mít jmenovaného hlavního vyšetřovatele. Stane se tak ve spolupráci s NHS - Leeds Teaching Hospitals Trust (LTHT), Leeds Institute of Biomedical & Clinical Sciences Fakulty lékařství a zdravotnictví Univerzity v Leeds (LIBACS) a Ústavem chemie Univerzity v Oslu. (DC).

V každém kroku (den 56, den 84 a den 140) budou provedena následující hodnocení a postupy:

• Měření hmotnosti;
• Kontrola deníkových karet účastníků;
• Nežádoucí účinky a bezpečnost;
• Krevní tlak;
• Kontrola dodržování potravinových intervencí tím, že účastníci budou požádáni, aby vrátili balíčky jogurtů zpět zkušebnímu týmu a relativní záznamy;
• 24hodinový dotazníkový rozhovor o dietě;
• měření LDL-C, HDL-C, celkového cholesterolu, triglyceridů, non-HDL-C v krvi a poměru HDL-C/LDL-C;
• Měření koncentrace OHC v séru/plazmě;
• Měření koncentrace PSS v séru/plazmě;
• Měření střední koncentrace LDL-C po společné kultivaci hostitelských buněk s buněčnými liniemi rakoviny prsu;
• Měření střední koncentrace OHCs po společné kultivaci hostitelských buněk s buněčnými liniemi rakoviny prsu;
• Měření střední koncentrace PSS po společné kultivaci hostitelských buněk s buněčnými liniemi rakoviny prsu;
• Adipocyty, makrofágy a buněčné linie rakoviny prsu, buněčné linie, měření obsahu OHCs;
• Migrační a chemorezistentní vlastnosti buněčných linií buněčných linií rakoviny prsu po kokultivaci hostitelských buněk.