Zubní pasta s inovativní remineralizační technologií (REFIX)

Byla provedena randomizovaná, dvojitě zaslepená zkřížená klinická studie, aby se vyhodnotila biologická dostupnost intraorálního fluoridu v biomarkerech expozice (biofilm a sliny) po použití prostředku na čištění zubů s experimentálním fluoridem po dobu jednoho týdne, s intervaly mezi nimi. Biofilm byl sbírán 1 hodinu (h) a 12 hodin po čištění zubů a sliny byly sbírány 1 hodinu (T1, T15, T30, T45, T60 minut) a 12 hodin. Data byla získána potenciometrií (iontově selektivní elektroda) pro fluorid v těchto vzorcích.

Studijní populace Velikost vzorku byla stanovena výpočtem vzorku [25] podle předchozích studií [26], α = 5 %, β = 10 % a poměr předčasných odchodů 10 %. Této studie se zúčastnilo 18 jedinců s průměrným věkem 26 let, včetně mužů i žen. Kritériem způsobilosti byli lidé starší 18 let, bez systémové angažovanosti a žijící ve městě João Pessoa-Paraíba, bez fluoridace vody (< 0,1 μg/ml F). Jednotlivci byli vyloučeni, pokud v posledních 4 týdnech užívali léky, které interferují s tvorbou biofilmu a tokem slin nebo fluoridové produkty (> 5000 ppm), používali ortodontické aparáty nebo měli léze v dutině, periodontální onemocnění a/nebo citlivost zubů.

Experimentální zubní pasty Účastníci byli náhodně přiděleni k použití následujících experimentálních zubních past podle tabulky 1. Byly zakódovány nezávislým vyšetřovatelem, který se procesu nezúčastnil. Byla provedena jednoduchá randomizace s ohledem na křížový design. Jednotkou randomizace byl "zubní prostředek", takže všechny prostředky na čištění zubů měly stejnou šanci být vybrány. Pro každého účastníka byl vytvořen návrh studie a pro každého nového bylo provedeno další losování.

Klinická fáze Nejprve byli účastníci podrobeni dentální profylaxi a škrábání, aby se odstranil veškerý biofilm a zubní kámen. Používali placebo, zubní pastu bez fluoridu, po dobu 7 dnů. Poté se postupovalo podle Whitfordova protokolu [16]. Stručně řečeno, subjekty byly instruovány, aby si čistily zuby třikrát denně po dobu 1 minuty (transverzální technika) a také si vypláchly ústa po čištění 10 ml vody. Sedmý den byly subjekty instruovány, aby kartáčovaly pouze okluzní povrchy a nepoužívaly dentální nit, aby se umožnilo nahromadění biofilmu. Po spaní se zdrželi jídla a pití čehokoli kromě vody a nečistili si zuby. Druhý den ráno, po 12 hodinách posledního čištění zubů a nalačno, byly odebrány první vzorky slin a biofilmu (horní a dolní pravý polooblouk). Poté dobrovolníci čistili okluzní povrchy po dobu 1 minuty. Brzy poté byly odebrány vzorky slin v následujících časech: t1, t15, t30, t45 a t60 minut. Vzorky biofilmu (levá strana) byly odebrány později (1 hodinu po kartáčování). Klidové sliny byly sbírány po dobu 5 minut. Biofilm byl odebrán ze všech povrchů zubů, v bukální i lingvální oblasti, pomocí 3S hollenback špachtle, ze které byly vzorky okamžitě přeneseny do eppendorffovy zkumavky, odstředěny a následně sušeny při 90 °C po dobu dvou hodin a poté zváženy. Vzorky slin byly odstřeďovány při 6000 otáčkách za minutu po dobu 10 minut, aby se oddělily zbytky slin.

Stanovení koncentrace fluoridu Vzorky byly analyzovány hexamethyldisiloxanem (HMDS) usnadněnou difuzní metodou Taves [20] modifikovanou Whitfordem [21]. Analýzy byly provedeny s elektrodou specifickou pro fluor (model 9409; Orion Research) a potenciometrem (model EA 940; Orion Research, Cambridge, MA, USA) (Model 720 A Orion). K přípravě kalibračních křivek byly použity fluoridové standardy (1-100 nM).

Statistická analýza Data byla analyzována pomocí deskriptivní a inferenční statistiky pomocí statistického programu SPSS - v. 21.0 a softwaru Graphpad. Shapiro-Wilkův test byl použit k testování normality dat studie in vivo (n <50). Byly provedeny neparametrické testy. Plocha pod křivkou (AUC) byla vypočtena na základě základních hodnot (12 hodin po posledním kartáčku) až 60 minut po posledním kartáčku, aby se ukázala účinnost retence F ve slinách v průběhu času. Pro účely srovnání koncentrace F ve slinách a biofilmu mezi skupinami byl proveden test ANOVA opakovaných měření a následně Bonferroniho post-test. Vztah mezi koncentracemi biofilmu a fluoridu ve slinách byl stanoven pomocí Spearmanova korelačního koeficientu. Tato studie předpokládala hladinu významnosti 5 % (p < 0,05).