MRD-Anwendung bei Patienten mit Darmkrebs

ctDNA wird aus Plasma und nicht aus Serum gewonnen, da letzteres mehr DNA enthält, die während der Gerinnung von Immunzellen freigesetzt wird. Blut sollte in ein K2EDTA- oder Zellstabilisierungsröhrchen (z. B. Streck cfDNA-Sammelröhrchen) entnommen werden. Die Plasmaisolierung sollte so bald wie möglich, spätestens jedoch innerhalb von 24 Stunden, mit K2EDTA (vorzugsweise innerhalb von 4–6 Stunden) und bei Verwendung von Zellstabilisierungsröhrchen innerhalb von 2–7 Tagen erfolgen und vorübergehend bei 4 °C gelagert werden.

Verfahren zur Probenentsorgung: Antikoaguliertes Vollblut entnehmen, vorsichtig umdrehen, bis es vollständig gerinnungshemmend ist. Die Plasmafraktionierung sollte so bald wie möglich, spätestens nach 24 Stunden, durchgeführt werden, vorübergehend bei 4 °C mit K2EDTA gelagert werden (vorzugsweise innerhalb von 4–6 Stunden) und gelagert werden bei -80°C langfristig. Das gesammelte gerinnungshemmende Blut wird in eine Eisbox mit Eisbeuteln gegeben und vertikal zu einem zentrifugierbaren Labor transportiert. Zentrifugieren Sie 15 Minuten lang bei 3000 U/min bei 4 °C, nehmen Sie die obere Schicht und aliquotieren Sie 0,5 ml/Röhrchen in 1,5-ml-Zentrifugenröhrchen. Kryokonserviert bei -80 °C ergibt 1 ml Vollblut etwa 0,5 ml Plasma.