Die Auswirkung des Rauchens auf Periimplantitis

Die Querschnittsstudie wird in Zusammenarbeit mit den Abteilungen für Parodontologie der Fakultät für Zahnmedizin der Universität Bern, Schweiz, der Hatay-Mustafa-Kemal-Universität, der Dokuz-Eylul-Universität, der Gazi-Universität und der Ege-Universität, Türkei, durchgeführt. Der erste Schritt der Studie wird in der Türkei durchgeführt, der zweite Schritt in der Schweiz. Da Hatay eine der drei am stärksten vom Erdbeben 2023 in der Türkei betroffenen Provinzen ist und die Zahnmedizinische Fakultät der Mustafa-Kemal-Universität Hatay schwer beschädigt wurde, ist es unmöglich, Proben von den Patienten in Hatay zu rekrutieren. Daher wurde dieses Projekt als multizentrisches Projekt geplant und Patientenproben werden von der Dokuz Eylül, Gazi-Universität, und der Ege-Universität, Abteilung für Parodontologie, Fakultät für Zahnmedizin, rekrutiert. Die Proben werden im Labor für orale Mikrobiologie der Abteilung für Parodontologie der Universität Bern, Schweiz, analysiert. Das Studienprotokoll wurde von der Ethikkommission für die Verwendung menschlicher Subjekte in der Forschung der Dokuz-Eylül-Universität genehmigt (Protokoll-Nr.: 2023/GOA-8246).

An dieser Studie werden 96 Patienten teilnehmen, die zu gleichen Teilen in vier Gruppen aufgeteilt sind:

• Raucher mit Periimplantitis
• Nichtraucher mit Periimplantitis
• Raucher mit gesundem periimplantären Gewebe
• Nichtraucher mit gesundem periimplantären Gewebe

Der Raucherstatus wird in zwei Gruppen eingeteilt: Raucher und Nichtraucher (niemals Raucher). Zur Nichtrauchergruppe gehören ehemalige Raucher, die vor mindestens 6 Jahren mit dem Rauchen aufgehört haben.

Es werden die pro Tag gerauchten Zigaretten, der Raucherindex (selbst gemeldete durchschnittliche Zigaretten pro Tag x Jahre des Tabakkonsums) und das Taschenjahr des Rauchens berechnet (selbst gemeldete durchschnittliche Zigaretten pro Tag x Jahre des Tabakkonsums / Anzahl der Zigaretten in einem Jahr). Tasche). Der Raucherstatus wird anhand der Selbstauskunft ermittelt. Der Raucherstatus wird später anhand des Cotininspiegels im Speichel validiert. Beim Rauchen wird eine Cotininkonzentration im Speichel von 5–7 ng/ml akzeptiert. Der Schweregrad des Rauchens wird durch höhere Konzentrationen bestimmt.

Parodontale Parameter Klinische parodontale Messungen werden anhand der folgenden Parameter zur Parodontaldiagnose beurteilt. Die Messungen werden mit einer Williams-Parodontalsonde (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) durchgeführt und umfassen die Sondierung der Taschentiefe (PPD), des klinischen Attachmentniveaus (CAL), des Plaque-Index (PI) 26 und des Gingiva-Index (GI) 27. und Prozentsatz der Sondierungsblutung (BOP) 28 an sechs Stellen pro Zahn (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual, lingual und disto-lingual) an jedem Zahn.

Die Diagnose parodontaler Erkrankungen und Zustände erfolgt anhand der radiologischen und klinischen Diagnosekriterien, die vom Weltworkshop zur Klassifizierung parodontaler und periimplantärer Erkrankungen und Zustände 2017 vorgeschlagen wurden.29 Die periimplantäre Gesundheit wird anhand des Fehlens visueller Anzeichen beurteilt Entzündung, Blutung bei der Sondierung und weiterer Knochenverlust nach anfänglicher Heilung, der nicht ≥ 2 mm betragen sollte. Die Kriterien für Patienten mit Periimplantitis sind PPD ≥ 6 mm in Verbindung mit starken Blutungen und ≥ 3 mm Knochenverlust.

Patientendaten und klinische parodontale/periimplantäre Untersuchung

Folgende Variablen werden erfasst:

• Geschlecht
• Alter
• BMI
• Implantatalter
• Anzahl und Lage der Implantate
• Schritte der chirurgischen Phase
• Komplikationen im Zusammenhang mit der Implantatbehandlung
• Fehlstellung des Implantats
• Implantatmobilität und Beschwerden (Unterschiede in den Periotest-Werten-PTVs)
• Zeit von der Belastung der Implantate bis zur aktuellen Untersuchung (Zeit in Funktion)
• Restauratives Design
• Retention der Prothese
• Röntgenbild des Knochenniveaus
• Art und Größe des Knochendefekts
• Vorhandensein von keratinisierter Schleimhaut
• Häufigkeit des Zähneputzens
• Zahnzwischenräume mit Zahnseide/Bürsten
• Häufigkeit des Zahnarzttermins
• Vorgeschichte einer Parodontitis
• Grund für Zahnverlust
• Alkoholkonsum

Sammlung von Speichel

Speichelproben werden von nicht stimulierten Patienten entnommen. Die Probenentnahme erfolgt innerhalb von 10 Minuten, wenn die Teilnehmer Platz nehmen. Die Proben werden bei -80 °C aufbewahrt, bis sie zur Analyse in Trockeneis an die Abteilung für Parodontologie der Fakultät für Zahnmedizin der Universität Bern überführt werden.

Sammlung von Plaqueproben

Plaque-Proben werden aus dem subgingivalen Bereich der Periimplantitis und Parodontitis in der Periimplantitis-Gruppe und aus dem parodontal gesunden und periimplantären subgingivalen Bereich in den periimplantären Gesundheitsgruppen entnommen. Subgingivale Implantat- und Zahnbelagsproben werden aus den beiden tiefsten parodontalen Taschen und periimplantären Taschen innerhalb von 200 μl RNA später in Eppendorf-Röhrchen entnommen. Die Probenahmestellen werden vom Speichel isoliert und leicht luftgetrocknet. Die Probe wird mit einer sterilen Gracey-Kürette (HuFriedy, Rotterdam, Niederlande) entnommen. Die Proben werden aus dem periimplantären Gesundheitsbereich nach der gleichen Methode wie in der periimplantären Gesundheitsgruppe entnommen. Eppendorf-Mikrozentrifugenröhrchen werden bei -80 °C gelagert, bis sie für die Analysen in Trockeneis an das Institut für Zahnmedizin der Universität Bern überführt werden.

Sammlung von Proben von Zahnfleischspaltflüssigkeit (GCF) und periimplantärer Sulkusflüssigkeit (PISF).

Die Proben werden aus zwei tiefsten periimplantären Taschen und zwei tiefsten parodontalen Taschen von Periimplantitis-Patienten entnommen. Eine Speichelkontamination wird vermieden, indem jeder Bereich mit Watterollen isoliert und leicht mit Luft entwässert wird. Mit einer Parodontalkürette wird Plaque schonend entfernt. Mit der Öffnungsmethode werden 39 Proben innerhalb von 30 Sekunden mit standardisierten Papierstreifen (Periopaper; Oraflow Inc., Plainview, NY) entnommen. Die Volumina werden auf einem vorkalibrierten elektronischen Zahnfleischflüssigkeitsmessgerät (Oraflow Inc., Plainview, NY) gemessen. 40 Die Messwerte des elektronischen Geräts werden anhand einer Standardkurve in ein tatsächliches Volumen (μl) umgerechnet. Mit Blut oder Speichel kontaminierte Proben werden ausgeschlossen. Alle sechs Periopaper-Streifen werden in Eppendorf-Mikrozentrifugenröhrchen aus Kunststoff gepoolt und bei -80 °C gelagert, bis sie für die Analysen in Trockeneis an das Institut für Zahnmedizin der Universität Bern übertragen werden.

Laboranalysen

Speichel- und Plaqueproben werden an das Labor für orale Mikrobiologie, Abteilung für Parodontologie, Fakultät für Zahnmedizin, Universität Bern, übertragen und alle Laboranalysen werden von Dr. Aysegul Sari im Labor für orale Mikrobiologie, Abteilung für Parodontologie, Schule, durchgeführt of Dental Medicine, Universität Bern, Schweiz, nach Unterzeichnung der Materialtransfervereinbarung.

Biochemische Analyse

Der Raucherstatus der Patienten wird durch Cotininanalyse unter Verwendung eines Enzymimmunoassay-Kits in den Speichelproben bestimmt.

Mikrobiologische Analyse

Das Vorhandensein und die Häufigkeit von Fusobacterium nucleatum, Campylobacter rectus, Prevotella intermedia, Aggregatinacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Treponema denticola, Saccharibacteria (TM7), Streptococcus aureus und Actinomyces oris werden in Plaqueproben analysiert. Die gezielte Identifizierung dieser Bakterien erfolgt mittels Real Time Q-PCR. Die 16sRNA-Sequenzierung wird für eine unvoreingenommene und nicht zielgerichtete mikrobiologische Analyse verwendet. Die gesamte genomische DNA wird extrahiert und anschließend die Amplifikation der 16S-rRNA durchgeführt.

GCF-Analyse

Als zweite Studie ist die GCF-Analyse geplant. Für die Analyse von GCF- und Speichelproben wird der auf Luminex-Beads basierende Multiplex-Immunoassay verwendet. GCF- und Speichelmarker wurden gemäß früherer Literatur weitgehend als oxidative Stressmarker 8-OHdG, PARK7/DJ-1 und NADPH-Oxidase-Entzündungsmarker IL-1beta, IL-17A/E, Osteoprotegerin (OPG) ausgewählt; Bindegewebsabbaumarker MMP-8, MMP-3; Reparatur-/Regenerationsmarker Knochenmorphogenes Protein (BMP)-2, epidermaler Wachstumsfaktor (EGF) und vaskulärer endothelialer Wachstumsfaktor (VEGF).

Statistische Analyse

Da es in der Literatur keine vergleichbare Studie gibt, erfolgte die Stichprobenberechnung anhand der Effektgröße. Die erforderliche Stichprobengröße betrug 24 für jede Gruppe, um einen signifikanten Unterschied bei einer Effektgröße (große Effektgröße) von 0,4 und einem Trennschärfeniveau von 90 % mit einem Konfidenzniveau von 95 % zwischen den vier Gruppen festzustellen. Für die Berechnung der Stichprobengröße wurde das Gpower-Paket Version 3.1 verwendet. Die Normalität kontinuierlicher Variablen wird durch den Shapiro-Wilk-Test bewertet. Für Werte mit schiefer Verteilung werden nichtparametrische statistische Methoden durchgeführt. Der Kruskal-Wallis-Test wird durchgeführt, um mehr als zwei nicht normalverteilte Variablen zu vergleichen, und der Dunn-Mehrfachvergleichstest für post-hoc-paarweise Mehrfachvergleichsanalysen. Ein Einweg-ANOVA-Test wird durchgeführt, um mehr als zwei normalverteilte Gruppen zu vergleichen, und der Tukey-Test wird für post-hoc-paarweise Mehrfachvergleichsanalysen durchgeführt. Es werden allgemeine lineare Modelle durchgeführt, um die Auswirkung der Schwere des Rauchens auf periimplantäre und parodontale Erkrankungen zu bestimmen.