Tenofoviirin noudattaminen ohjaa ja arvioi nopeasti PrEP- ja HIV-terapiaa (TARGET)

Tutkimuksen tavoitteet

Ensisijainen tavoite:

• Tenofoviirin (TFV) farmakokinetiikan määrittäminen veressä, virtsassa ja plasmassa aikuisilla, joilla on täydellinen, mediaani ja alhainen tarttuvuus tenofoviiridisoproksiilifumaraattiin (TDF).

Toissijaiset tavoitteet

• Tenofoviirin huuhtoutumisnopeuden määrittäminen veressä, plasmassa ja virtsassa niiden osallistujien keskuudessa, joilla on eri tasoisia TDF-adherenssia.
• TFV:n vakaan tilan pitoisuuksien määrittäminen veressä ja plasmassa TDF:n kiinnittymisen kontrolloitujen tasojen joukossa.
• Vertaamaan TFV:n yhteensopivuutta veren, plasman ja virtsan pitoisuuksissa.
• Solunsisäisten tenofoviiridifosfaatin (TFV-DP) alimman pitoisuuden määrittäminen perifeerisen veren mononukleaarisoluissa (PBMC) ja kuivatun veren täplänäytteissä (DBS) aikuisilla, joilla on täydellinen, mediaani ja alhainen lääkeadherenssi.
• Tunnistaa mahdolliset pitoisuuskynnykset binaarisen hoitopisteen tarttumistestin kliinistä tulkintaa varten TFV:n (ja/tai TFV-DP:n) mittaamiseksi suhteessa TDF:ään sitoutumiseen.

Design:

Tutkimussuunnitelma on satunnaistettu, avoin farmakokineettinen tutkimus terveillä aikuisilla vapaaehtoisilla. Tutkimukseen sisältyy kliinisten tietojen ja biologisten näytteiden kerääminen, ja koehenkilöt antavat kirjallisen tietoisen suostumuksen osallistumiseen. Terveet aikuiset vapaaehtoiset (HIV-serologia ja hepatiitti B -pinnan Ag-negatiivinen) otetaan mukaan. Kun kirjallinen suostumus on saatu, seulontakäynti suoritetaan. Tutkimusryhmä saa jokaisen osallistujan puhelinnumeron, osoitteen ja asiaankuuluvat yhteystiedot.

Seulontakäynti:

Osallistujien seulonta suoritetaan 14 päivän sisällä ilmoittautumisesta. Yksityiskohtainen taustalla oleva väestö- ja terveyskyselylomake toteutetaan. Kymmenen ml verta otetaan lähtötilanteen arviointeja varten: täydellinen verenkuva, HIV-vasta-ainetesti, hepatiitti B -pinnan Ag-testaus, munuaisten ja maksan toimintakokeet ja veren varastointi biovarastossa. Veri- ja kemiallisten testien avulla suljetaan pois koehenkilöt, joilla on neutrofiilien, hemoglobiinin, verihiutaleiden, ASAT- tai ALT-arvojen poikkeavia laboratoriotutkimuksia. Epänormaali testi määritellään arvoksi ≥3 DAIDS-taulukon mukaan aikuisten ja lasten haittatapahtumien vakavuuden arvioimiseksi, versio 2.0 marraskuu 2014). Kliinisen tutkimuksen ja lähtötason laboratorioarvioinnin tulokset tarkistetaan sisällyttämis-/poissulkemiskriteerien varalta.

Sisäänpääsy:

Kaikki sisäänkäyntivierailut alkavat maanantaiaamuna. Saatuaan perusteelliset tiedot tutkimusaikataulusta, osallistumiskriteerit täyttävät koehenkilöt rekisteröidään ja satunnaistetaan (1:1:1) johonkin kolmesta ryhmästä, jotta he saavat kontrolloidun määrän Truvada®-annoksia (Gilead Sciences Inc.), joka sisältää tenofoviiridisoproksiilifumaraattia (TDF, 300 mg) ja emtrisitabiinia (FTC, 200 mg) 6 viikon ajan. Osallistujalle kerrotaan huolellisesti hänen lääkeannostusaikataulustaan, käyntiaikataulustaan ​​ja mahdollisista lääkkeiden sivuvaikutuksista.

Ilmoittaudumme yhteensä 30 aikuista arvioitavilla PK-näytteillä (10 per ryhmä). Kaikki osallistujat aloittavat TDF:n Entry-vierailun aamuna. 6 viikon hoitojakso valittiin, jotta varmistetaan tenofoviiripitoisuudet eri matriiseissa (esim. veri, plasma, virtsa, PBMC:t) jäljittelevät odotettavissa olevia tiloja potilailla, joilla on krooninen annos täydellinen, mediaani ja alhainen lääkkeen sitoutuminen. Veri-/virtsanäytteenottoaikataulu perustuu raportoituun tenofoviirin puoliintumisaikaan plasmassa ja aikaisempien PK-tutkimusten tuloksiin.

Tenofoviiripitoisuudet määritetään jokaiselle osallistujalle kolmen tutkimusvaiheen aikana (1) aloitusjakso, (2) intensiivinen PK-näytteenotto ja (3) pesujakso.

Vaihe 1: Aloitusjakso (6 viikkoa) Käynti ennen toista annosta: Välittömästi ennen toista annosta (ts. Ryhmä 1: 24 annoksen jälkeen (päivä #2; tiistaiaamu); Ryhmä 2: 48 tuntia annoksen jälkeen (päivä #3; keskiviikkoaamu); ja ryhmä 3; 72 tuntia annoksen jälkeen (päivä 4; torstaiaamu) tutkittava palaa sairaalaan. Otetaan yksi verinäyte (5 ml). Tästä laskimoverinäytteestä valmistetaan 5 kuivattua veritäplää (50 µl/täplä) Whatman 903 -suodatinpaperikortille. Jäljelle jäänyt veri sentrifugoidaan ja plasma varastoidaan. Yksi sormenpään kokoverinäyte kerätään ja toiselle Whatman 903 -suodatinpaperikortille valmistetaan 2 kuivattua veritäplää (50 µl/täplä). Otetaan erillinen 10 ml verta PBMC:iden keräämiseksi solunsisäisten tenofoviiri-DP-pitoisuuksien määrittämiseksi. Lopuksi otetaan pistevirtsanäyte (5-10 ml). Kaikki näytteet säilytetään -70 °C - -80 °C:ssa.

Viikot 3 ja 5 (molemmat maanantaiaamuna, ennen annosta): Ennen annoksen antamista otetaan yksi verinäyte (5 ml). Tästä laskimoverinäytteestä valmistetaan 5 kuivattua veritäplää (50 µl/täplä) Whatman 903 -suodatinpaperikortille. Jäljelle jäänyt veri sentrifugoidaan ja plasma varastoidaan. Yksi sormenpään kokoverinäyte kerätään ja 2 kuivattua veritäplää (50 µL/täplä) valmistetaan toiselle Whatman 903 -suodatinpaperikortille. Otetaan erillinen 10 ml verta PBMC:iden keräämiseksi solunsisäisten tenofoviiri-DP-pitoisuuksien määrittämiseksi. Lopuksi otetaan pistevirtsanäyte (5-10 ml). Kaikki näytteet säilytetään -70 °C - -80 °C:ssa. Tehdään munuaisten ja maksan toimintakokeet.

Vaihe 2: Intensiivinen PK-näytteenotto (alkaen viikon 7 maanantaiaamuna 24 tunnin ajan) Viikko 7 Intensiivinen PK-käynti: Viikon 7 maanantaiaamuna koehenkilöt palaavat sairaalaan varhain aamulla. Lääkäri suorittaa fyysisen tutkimuksen ja veri otetaan laboratorioturvallisuusarviointeja (AST ja ALT) varten. Heidän normaalin aamupäivän lääkkeenottoaikataulunsa mukaisesti otetaan verinäyte ennen annosta ja yksi Truvada®-tabletti otetaan tyhjään mahaan (vähintään 6 tunnin paasto etukäteen). Tämä on viimeinen Truvada®-annos kaikille koehenkilöille. Laskimoverta (3 ml/aikapiste) kerätään 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 ja 24 tuntia annoksen jälkeen. Joka ajankohtana kerätään laskimoveren DBS (5 pistettä) ja sormenpää (2 pistettä). Tehdään munuaisten ja maksan toimintakokeet.

Virtsanäytteet otetaan ennen annosta ja 0-4 tunnin, 4-8 tunnin, 8-12 tunnin ja 12-24 tunnin välein. Potilailta otetaan lisäksi 10 ml verta ennen annosta ja PBMC:t kerätään ja säilytetään -70 °C - -80 °C:ssa. 24 tunnin kuluttua osallistuja kotiutetaan sairaalasta. Tutkittavia pyydetään keräämään kaikki virtsansa seuraavaan 24 tunnin kuluttua tehtävään tutkimuskäyntiin saakka.

Vaihe 3: Wash-out PK-näytteenotto (viikot 7-10) Viikko 7 (keskiviikosta lauantaihin): Kun intensiivinen PK-näytteenotto on valmis, osallistujat palaavat klinikalle kerran päivässä seuraavien 4 päivän ajan (eli lauantaihin asti). viikon 7) kertalaskimoverenottoa (5 ml), sormenpistonäytenäytteenottoa kuivattua verikohtaa varten ja pistevirtsanäytettä (5-10 ml). Potilaita pyydetään keräämään kaikki virtsansa seuraavaan klinikkakäyntiin asti.

Viikko 8 (maanantai ja torstai): Yksittäinen laskimoverenotto, sormenpistonäyte kuivuneen veripisteen vuoksi ja pistevirtsanäyte (5-10 ml) otetaan viikon 8 maanantaina ja torstaina. Yksi PBMC-näyte (10 ml verta) kerätään viikon 8 maanantaiaamuna (eli 1 viikko viimeisestä TDF-annoksesta).

Viikko 9 (maanantai): Maanantaina otetaan kertalaskimoverenotto, sormenpistonäyte kuivuneesta veripisteestä ja pistevirtsanäyte (5-10 ml). Yksi PBMC-näyte (10 ml verta) kerätään myös maanantaina (eli 2 viikkoa edellisestä TDF-annoksesta).

Viikko 10 (maanantai): Maanantaina otetaan kertalaskimoverenotto, sormenpistonäyte kuivuneen veripisteen vuoksi ja pistevirtsanäyte (5-10 ml). Yksi PBMC-näyte (10 ml verta) kerätään myös maanantaiaamuna (eli 3 viikkoa viimeisestä TDF-annoksesta).

Opintokäynnin loppu (esim. Viikon 10 lopussa):

Maanantaina otetaan kertalaskimoverenotto, sormenpistonäytteenotto kuivuneen veripisteen varalta ja pistevirtsakoe (5-10 ml). Yksi PBMC-näyte (10 ml verta) kerätään myös maanantaina (eli 4 viikkoa viimeisestä TDF-annoksesta). Tehdään munuaisten ja maksan toimintakokeet.

Tässä vaiheessa osallistujat ovat suorittaneet tutkimuksen, eikä lisäarviointeja tehdä.

Tenofoviiripitoisuudet mitataan käyttämällä validoituja nestekromatografia-kolminkertaisen kvadrupolin massaspektrometria (LC-MS/MS) -määrityksiä Chiang Main yliopiston lääketieteellisessä tiedekunnassa. Solunsisäiset tenofoviiridifosfaatin (TFV-DP) pitoisuudet määritetään käyttämällä validoitua LC-MS-pohjaista määritystä.