Stosowanie się do tenofowiru w celu szybkiego prowadzenia i oceny terapii PrEP i HIV (TARGET)

Cele badania

Podstawowy cel:

• Określenie farmakokinetyki tenofowiru (TFV) we krwi, moczu i osoczu u osób dorosłych z doskonałym, średnim i niskim przyleganiem do fumaranu dizoproksylu tenofowiru (TDF).

Cele drugorzędne

• Aby określić szybkość wypłukiwania tenofowiru z krwi, osocza i moczu wśród uczestników z różnymi poziomami przylegania TDF.
• Określenie stężenia TFV w stanie stacjonarnym we krwi i osoczu wśród kontrolowanych poziomów przylegania TDF.
• Porównanie zgodności między stężeniami TFV we krwi, osoczu i moczu.
• Określenie minimalnego stężenia wewnątrzkomórkowego difosforanu tenofowiru (TFV-DP) w komórkach jednojądrzastych krwi obwodowej (PBMC) i próbkach wysuszonej plamki krwi (DBS) u dorosłych z doskonałym, średnim i niskim przyleganiem do leku.
• Identyfikacja możliwych progów stężeń do interpretacji klinicznej binarnego testu adherencji w punkcie opieki do pomiaru TFV (i/lub TFV-DP) w odniesieniu do przestrzegania TDF.

Projekt:

Projekt badania to randomizowane, otwarte badanie farmakokinetyczne u zdrowych dorosłych ochotników. Badanie obejmuje gromadzenie danych klinicznych i próbek biologicznych, a uczestnicy wyrażą pisemną świadomą zgodę na udział. Zdrowi dorośli ochotnicy (serologia HIV i antygen powierzchniowy wirusa zapalenia wątroby typu B z ujemnym wynikiem) zostaną włączeni. Po uzyskaniu pisemnej zgody zostanie przeprowadzona wizyta przesiewowa. Zespół badawczy uzyska numer telefonu, adres i odpowiednie dane kontaktowe każdego uczestnika.

Wizyta przesiewowa:

Weryfikacja uczestników zostanie przeprowadzona w ciągu 14 dni od rejestracji. Zostanie przeprowadzony szczegółowy kwestionariusz demograficzny i zdrowotny. Dziesięć ml krwi zostanie pobranych do podstawowych badań: morfologii krwi, badania na obecność przeciwciał przeciwko wirusowi HIV, oznaczenia antygenu powierzchniowego wirusa zapalenia wątroby typu B, testów czynności nerek i wątroby oraz przechowywania krwi w biorepozytorium. Badania krwi i badania chemiczne zostaną wykorzystane do wykluczenia pacjentów z nieprawidłowymi wynikami badań laboratoryjnych, takimi jak liczba neutrofili, hemoglobina, płytki krwi, AST lub ALT. Nieprawidłowy wynik testu zostanie zdefiniowany jako stopień ≥3 zgodnie z tabelą DAIDS do stopniowania ciężkości zdarzeń niepożądanych u dorosłych i dzieci, wersja 2.0 z listopada 2014 r.). Wyniki badania klinicznego i podstawowych ocen laboratoryjnych zostaną zweryfikowane pod kątem kryteriów włączenia/wyłączenia.

Wejście:

Wszystkie wizyty rozpoczynają się w poniedziałek rano. Po otrzymaniu szczegółowych informacji na temat harmonogramu badania, osoby spełniające kryteria włączenia zostaną włączone i losowo przydzielone (1:1:1) do jednej z 3 grup, które otrzymają kontrolowaną liczbę dawek Truvady® (Gilead Sciences Inc.), który zawiera fumaran dizoproksylu tenofowiru (TDF, 300 mg) i emtrycytabinę (FTC, 200 mg) przez 6 tygodni. Uczestnik zostanie dokładnie wyjaśniony na temat harmonogramu dawkowania leków, harmonogramu wizyt i potencjalnych skutków ubocznych leków.

Zarejestrujemy łącznie 30 osób dorosłych z możliwymi do oceny próbkami PK (10 na grupę). Wszyscy uczestnicy rozpoczną TDF rano w dniu wizyty wstępnej. Wybrano 6-tygodniowy okres leczenia, aby zapewnić stężenie tenofowiru w różnych matrycach (tj. krew, osocze, mocz, PBMC) naśladują oczekiwane warunki u pacjentów z przewlekłym dawkowaniem o doskonałej, średniej i niskiej adhezji do leku. Schemat pobierania próbek krwi/moczu opiera się na zgłoszonym okresie półtrwania tenofowiru w osoczu i wynikach wcześniejszych badań farmakokinetycznych.

Stężenia tenofowiru zostaną określone u każdego uczestnika podczas trzech faz badania (1) okresu wstępnego, (2) intensywnego pobierania próbek PK i (3) okresu wypłukiwania.

Faza 1: Okres wprowadzający (wejście do 6 tygodni) Wizyta przed podaniem drugiej dawki: Bezpośrednio przed podaniem drugiej dawki (tj. Grupa 1: 24 po podaniu (dzień #2; wtorek rano); Grupa 2: 48 godzin po podaniu (dzień 3; środa rano); i Grupa 3; 72 godziny po podaniu (dzień #4; czwartek rano) pacjent powróci do szpitala. Zostanie pobrana pojedyncza próbka krwi (5 ml). Z tej próbki krwi żylnej zostanie przygotowanych 5 wysuszonych plamek krwi (50 µl/plamka) na bibule filtracyjnej Whatman 903. Pozostała krew zostanie odwirowana, a osocze przechowywane. Pobrana zostanie pojedyncza próbka krwi pełnej z opuszki palca i na drugiej bibule filtracyjnej Whatman 903 zostaną przygotowane 2 wysuszone plamki krwi (50 µl/plamkę). Oddzielne 10 ml krwi zostanie pobrane w celu zebrania PBMC w celu określenia wewnątrzkomórkowego stężenia tenofowiru-DP. Na koniec zostanie pobrana punktowa próbka moczu (5-10 ml). Wszystkie próbki będą przechowywane w temperaturze od -70°C do -80°C.

Tydzień 3 i 5 (oba w poniedziałek rano, przed podaniem dawki): Przed podaniem dawki zostanie pobrana pojedyncza próbka krwi (5 ml). Z tej próbki krwi żylnej zostanie przygotowanych 5 wysuszonych plamek krwi (50 µl/plamka) na bibule filtracyjnej Whatman 903. Pozostała krew zostanie odwirowana, a osocze przechowywane. Zostanie pobrana pojedyncza próbka krwi pełnej z opuszki palca i przygotowane 2 wysuszone plamki krwi (50 µl/plamka) na drugiej bibule filtracyjnej Whatman 903. Oddzielne 10 ml krwi zostanie pobrane w celu zebrania PBMC w celu określenia wewnątrzkomórkowego stężenia tenofowiru-DP. Na koniec zostanie pobrana punktowa próbka moczu (5-10 ml). Wszystkie próbki będą przechowywane w temperaturze od -70°C do -80°C. Zostaną wykonane badania czynności nerek i wątroby.

Faza 2: Intensywne pobieranie próbek PK (rozpoczynające się w poniedziałek rano 7. tygodnia przez 24 godziny) 7. tydzień Intensywna wizyta PK: W poniedziałek rano 7. tygodnia pacjenci wrócą do szpitala wczesnym rankiem. Lekarz przeprowadzi badanie fizykalne i pobierze krew do oceny bezpieczeństwa laboratoryjnego (AST i ALT). Zgodnie z ich normalnym, porannym dziennym harmonogramem przyjmowania leku, zostanie pobrana próbka krwi przed podaniem dawki i zostanie podana pojedyncza tabletka Truvada® na czczo (co najmniej 6 godzin wcześniej). Będzie to ostatnia dawka Truvady® dla wszystkich pacjentów. Krew żylna (3 ml/punkt czasowy) zostanie pobrana 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 i 24 godziny po podaniu dawki. W każdym punkcie czasowym zostanie pobrana DBS krwi żylnej (5 punktów) i opuszka palca (2 punkty). Zostaną wykonane badania czynności nerek i wątroby.

Próbki moczu będą pobierane przed podaniem dawki iw odstępach 0-4 godzin, 4-8 godzin, 8-12 godzin i 12-24 godzin. Osobnikom zostanie pobrane dodatkowe 10 ml krwi przed podaniem dawki, a PBMC zostaną pobrane i będą przechowywane w temperaturze od -70°C do -80°C. Po 24 godzinach uczestnik zostanie wypisany ze szpitala. Pacjent zostanie poproszony o zebranie całego moczu do czasu następnej wizyty studyjnej za 24 godziny.

Faza 3: Płukanie próbek PK (od 7 do 10 tygodnia) Tydzień 7 (od środy do soboty): Po zakończeniu intensywnego pobierania próbek PK uczestnicy będą wracać do kliniki raz dziennie przez kolejne 4 dni (tj. do soboty tygodnia 7) do pojedynczego pobrania krwi żylnej (5 ml), pobrania próbki z palca w celu wykrycia wyschniętej plamki krwi i próbki moczu (5-10 ml). Pacjent zostanie poproszony o zebranie całego moczu do następnej wizyty w klinice.

Tydzień 8 (poniedziałek i czwartek): Pojedyncze pobranie krwi żylnej, pobranie próbki z palca w celu wykrycia wyschniętej plamki krwi oraz punktowa próbka moczu (5-10 ml) zostaną pobrane w poniedziałek i czwartek tygodnia 8. Pojedyncza próbka PBMC (10 ml krwi) zostanie pobrana w poniedziałek rano w 8. tygodniu (tj. 1 tydzień od ostatniej dawki TDF).

Tydzień 9 (poniedziałek): Pojedyncze pobranie krwi żylnej, pobranie próbki z palca w celu wykrycia wyschniętej plamki krwi oraz punktowa próbka moczu (5-10 ml) zostanie pobrana w poniedziałek. Pojedyncza próbka PBMC (10 ml krwi) zostanie również pobrana w poniedziałek (tj. 2 tygodnie od ostatniej dawki TDF).

Tydzień 10 (poniedziałek): Pojedyncze pobranie krwi żylnej, pobranie próbki z palca w celu wykrycia wyschniętej plamki krwi oraz punktowa próbka moczu (5-10 ml) zostanie pobrana w poniedziałek. Pojedyncza próbka PBMC (10 ml krwi) zostanie również pobrana w poniedziałek rano (tj. 3 tygodnie od ostatniej dawki TDF).

Wizyta końcowa (tj. koniec tygodnia 10):

Pojedyncze pobranie krwi żylnej, pobranie próbki z palca w celu wykrycia wyschniętej plamki krwi oraz punktowe badanie moczu (5-10 ml) zostanie pobrane w poniedziałek. Pojedyncza próbka PBMC (10 ml krwi) zostanie również pobrana w poniedziałek (tj. 4 tygodnie od ostatniej dawki TDF). Wykonane zostaną badania czynności nerek i wątroby.

W tym czasie uczestnicy zakończą badanie i nie będą przeprowadzane żadne dodatkowe oceny.

Stężenia tenofowiru będą mierzone przy użyciu zwalidowanych testów metodą chromatografii cieczowej ze spektrometrią mas z potrójnym kwadrupolem (LC-MS/MS) na Wydziale Nauk Medycznych Uniwersytetu w Chiang Mai. Stężenia wewnątrzkomórkowego difosforanu tenofowiru (TFV-DP) zostaną określone przy użyciu zwalidowanego testu opartego na LC-MS.