Ihmisen papilloomavirusinfektio ja viruksen genotyypitys kohdunkaulan syövässä Venezuelassa (HPI)

Venezuelassa kohdunkaulansyöpä on naisten toiseksi yleisin syöpäkuolleisuuden syy. Vaikka se ei olekaan ensimmäinen syöpäkuolleisuuden syy, kehittyneissä maissa sillä on merkittävä paikka neoplastisessa patologiassa (Cannistra, 1996; Dey, 1998).

Ihmisen papilloomavirus (HPV) osallistuu kohdunkaulasyövän, erityisesti onkogeenisten tyyppien 16 ja 18, kehittymiseen (Koskela, 2000; Markowska, 1999).

Toistaiseksi ei tiedetä, mitkä HPV-tyypit ovat yleisempiä Venezuelassa. Useat tässä maassa tehdyt tutkimukset päättelivät, että HPV 16 on hallitseva tyyppi kohdunkaulan patologiassa (Graterol 2006, Correnti 1997, Muñoz 2003), mutta HVP-genotyypitystä ei ole tehty kaikkien kohdunkaulan syöpää sairastavien potilaiden tyyppien havaitsemiseksi. Kumpaakaan ei ole selvitetty, mitkä HPV-tyypit ovat useammin mukana sukupuolielinten syylissä Venezuelassa.

Tämän tutkimuksen tavoitteena on suorittaa HPV:n genotyypitys kohdunkaulan syövässä ja kohdunkaulan intraepiteliaalisessa neoplasiassa 2 ja 3 Venezuelassa selvittääkseen, mitkä tyypit liittyvät useammin tähän tautiin maassamme.

4. OPINTUSUUNNITTELU:

4.1. Kohdunkaulan näytteiden kokoelma:

1. Aiemmin eettisen komitean (Instituto Venezolano de Investigaciones Cientificas ja Instituto de Oncología Luis Razetti) hyväksynnällä aiomme kerätä parafiinilohkoja 300 potilaalta, joilla on histologinen diagnoosi CIN 2-3 tai vaiheen I kohdunkaulan syöpä.

Näytteet saadaan seuraavien Venezuelan lääketieteellisten keskusten patologian yksiköiden arkistoista: Instituto de Oncología Luis Razetti, Anatomía Patológica Universidad Central de Venezuela (Caracas), Hospital Oncológico Pérez Carreño (Valencia), Maracaibo, Barquisimeto, Ciudad Bolívia Puerto La Cruz, Mérida ja Barinas.

Sisällyttämiskriteerit:

1. Parafiinilohkot, joilla on CIN 2/3, ja vaiheen I kohdunkaulansyövän biopsiat, jotka on saatu vuosina 2001-2011.
2. Estää tunnistamisen oikein saadakseen henkilökohtaisia ​​ja kliinisiä potilastietoja.

4.2. Molekyylibiologiset menetelmät:

1. Kudosten histologinen käsittely: patologisten leesioiden aiempi tunnistaminen asiantuntijapatologin sisällyttämiskriteereissä kuvatulla tavalla (näyte, jossa on vaurio, mutta ilman nekroosia), parafiinilohko leikataan 5–7 µm:n objektilaseiksi uusilla teriillä ja käsineillä jokaista leikkausta varten. Se saa 1 dia, jotka jaetaan seuraavasti: yksi näyte lähetetään Laboratorio de Virología Molecular del Instituto Venezolano de Investigaciones Científicas; jäljelle jäänyt näyte säilytetään tarvittaessa lisäarviointia varten. Jokainen objektilasi asetetaan oikeaan säiliöön ja tunnistetaan sarjanumerolla potilaan läheisyyden säilyttämiseksi ja puolueellisten tulosten välttämiseksi.
2. Paraffinointi Coombsissa 1999 kuvatulla tavalla.
3. Kudoksen pilkkominen, DNA:n uuttaminen ja saostaminen Gravitt 2000:ssa kuvatulla tavalla.
4. HPV-genotyypitys havaitaan INNOLiPA-järjestelmällä. Tulokset korreloidaan kliinisen tiedon kanssa.