Infección por el virus del papiloma humano y genotipado del virus en el cáncer de cuello uterino en Venezuela (HPI)

En Venezuela, el cáncer de cuello uterino es la segunda causa de mortalidad por cáncer en las mujeres. En los países desarrollados, aunque no es la primera causa de mortalidad por cáncer, ocupa un lugar destacado dentro de la patología neoplásica (Cannistra, 1996; Dey, 1998).

El Virus del Papiloma Humano (VPH) está involucrado en el desarrollo del cáncer de cuello uterino, especialmente los tipos oncogénicos 16 y 18 (Koskela, 2000; Markowska, 1999).

A la fecha aún se desconoce qué tipos de VPH son más frecuentes en Venezuela. Varios estudios realizados en este país concluyeron que el VPH 16 es el tipo predominante en la patología cervical (Graterol 2006, Correnti 1997, Muñoz 2003), pero no se ha realizado un genotipado del VPH para detectar todos los tipos involucrados en pacientes con cáncer de cuello uterino. Tampoco se ha establecido qué tipos de VPH están más frecuentemente involucrados en las verrugas genitales en Venezuela.

El objetivo de esta investigación es realizar una genotipificación del VPH en cáncer de cuello uterino y neoplasia intraepitelial cervical 2 y 3 en Venezuela para determinar qué tipos se relacionan con mayor frecuencia con esta enfermedad en nuestro país.

4. DISEÑO DEL ESTUDIO:

4.1. Recolección de muestras cervicales:

1. Previa aprobación del comité de ética (Instituto Venezolano de Investigaciones Cientificas e Instituto de Oncología Luis Razetti), vamos a recolectar bloques de parafina de 300 pacientes con diagnóstico histológico de CIN 2-3 o cáncer de cuello uterino estadio I.

Las muestras se obtendrán de archivos de las Unidades de Patología de los siguientes centros médicos de Venezuela: Instituto de Oncología Luis Razetti, Anatomía Patológica Universidad Central de Venezuela (Caracas), Hospital Oncológico Pérez Carreño (Valencia), Maracaibo, Barquisimeto, Ciudad Bolívar, Puerto La Cruz, Mérida y Barinas.

Criterios de inclusión:

1. Bloques de parafina con CIN 2/3 y biopsias de cáncer de cuello uterino en estadio I obtenidas entre 2001 y 2011.
2. Bloquea correctamente la identificación para obtener información personal y clínica del paciente.

4.2. Procedimientos de biología molecular:

1. Manipulación histológica del tejido: previa identificación de las lesiones patológicas descritas en los criterios de inclusión por un patólogo experto (muestra con lesión pero sin necrosis), el bloque de parafina se cortará en portaobjetos de 5 a 7 µm con cuchillas y guantes nuevos para cada corte. Se obtendrán 1 portaobjetos que se distribuirán de la siguiente manera: una muestra se enviará al Laboratorio de Virología Molecular del Instituto Venezolano de Investigaciones Científicas; la muestra restante se guardará para una evaluación adicional si es necesario. Cada portaobjetos se colocará en un contenedor adecuado y se identificará con un número de serie para preservar la intimidad del paciente y evitar resultados sesgados.
2. Desparafinización como se describe en Coombs 1999.
3. Digestión de tejidos, extracción de ADN y precipitación como se describe en Gravitt 2000.
4. El sistema INNOLiPA detectará el genotipado del VPH. Los resultados se correlacionarán con la información clínica.