Humant papillomavirusinfeksjon og virusgenotyping i livmorhalskreft i Venezuela (HPI)

I Venezuela er livmorhalskreft den nest største årsaken til kreftdødelighet hos kvinner. I utviklede land, selv om det ikke er den første årsaken til kreftdødelighet, inntar den en bemerkelsesverdig plass i den neoplastiske patologien (Cannistra, 1996; Dey, 1998).

Humant papillomavirus (HPV) er involvert i utviklingen av livmorhalskreft, spesielt onkogen type 16 og 18 (Koskela, 2000; Markowska, 1999).

Til dags dato er det fortsatt ukjent hvilke HPV-typer som er hyppigere i Venezuela. Flere studier gjort her i landet konkluderte med at HPV 16 er den dominerende typen innen livmorhalspatologi (Graterol 2006, Correnti 1997, Muñoz 2003), men det er ikke utført en HVP-genotyping for å påvise alle typene som er involvert hos pasienter med livmorhalskreft. Det er heller ikke fastslått hvilke HPV-typer som er hyppigere involvert i kjønnsvorter i Venezuela.

Målet med denne undersøkelsen er å utføre en genotypifisering av HPV ved livmorhalskreft og cervical intraepitelial neoplasi 2 og 3 i Venezuela for å finne ut hvilke typer som er hyppigere relatert til denne sykdommen i vårt land.

4. STUDIEDESIGN:

4.1. Samling av livmorhalsprøver:

1. Tidligere godkjenning av etikkkomiteen (Instituto Venezolano de Investigaciones Cientificas og Instituto de Oncología Luis Razetti), vi skal samle inn parafinblokker av 300 pasienter med histologisk diagnose CIN 2-3 eller stadium I livmorhalskreft.

Prøvene vil bli hentet fra arkivene til patologienhetene ved følgende medisinske sentre i Venezuela: Instituto de Oncología Luis Razetti, Anatomía Patológica Universidad Central de Venezuela(Caracas), Hospital Oncológico Pérez Carreño (Valencia), Maracaibo, Barquisimeto, Ciudad Bolívar, Ciudad Bolívar Puerto La Cruz, Mérida og Barinas.

Inklusjonskriterier:

1. Parafinblokker med CIN 2/3 og stadium I livmorhalskreftbiopsier oppnådd mellom 2001 og 2011.
2. Sperrer identifikasjon på riktig måte for å få personlig og klinisk pasientinformasjon.

4.2. Molekylærbiologiske prosedyrer:

1. Histologisk håndtering av vev: tidligere identifisering av patologiske lesjoner som beskrevet i inklusjonskriteriene av en ekspert patolog (prøve med lesjon men uten nekrose), parafinblokken vil bli kuttet i 5 til 7 µm objektglass med nye blader og hansker for hvert kutt. Det vil bli oppnådd 1 lysbilder som vil bli distribuert som følger: en prøve vil bli sendt til Laboratorio de Virología Molecular del Instituto Venezolano de Investigaciones Científicas; gjenværende prøve vil bli oppbevart for videre evaluering om nødvendig. Hvert objektglass vil bli plassert i en riktig beholder og vil bli identifisert med et serienummer for å bevare pasientens intimitet og unngå partiske resultater.
2. Avparafinisering som beskrevet i Coombs 1999.
3. Vevsfordøyelse, DNA-ekstraksjon og utfelling som beskrevet i Gravitt 2000.
4. HPV-genotyping vil bli oppdaget av INNOLiPA-systemet. Resultatene vil bli korrelert med klinisk informasjon.