Valutazione di due lattobacilli attivi per il mantenimento della salute gengivale

Si tratta di un singolo centro, randomizzato, in doppio cieco, a gruppi paralleli (3 bracci) su soggetti sani di età compresa tra 18 e 30 anni, progettato per dimostrare se due lattobacilli attivi nel modello sperimentale della gengivite modificano l'accumulo di placca, lo stato gengivale, lo stato immunologico e microbico marcatori rispetto al placebo. I partecipanti saranno sottoposti a screening durante una visita pre-basale da parte di un dentista dello studio per determinare la loro idoneità allo studio che includerà volontari sani ed escluderà i soggetti con segni iniziali di infiammazione gengivale. Quei volontari considerati idonei per lo studio riceveranno una profilassi dentale pre-basale. I partecipanti dovranno tornare al Centro studi 14 giorni dopo la visita di screening e i volontari che soddisfano tutti i criteri di inclusione ed esclusione verranno assegnati in modo casuale a uno dei tre gruppi di trattamento durante la visita di riferimento. Due dei gruppi riceveranno uno dei due probiotici contenenti Lactobacillus (A) o Lactobacillus (B). Il terzo gruppo riceverà il placebo (P) che non contiene alcun ingrediente attivo. Ogni soggetto riceverà un dentifricio al fluoro (Colgate Regular) e uno spazzolino da denti (Oral-B) alla visita pre-basale per ridurre qualsiasi effetto residuo (antimicrobico) dal normale utilizzo del dentifricio.

Lo spazzolamento iniziale con il paradenti in posizione sarà condotto sotto la supervisione del personale dello studio presso il centro studi per consentire ai partecipanti di familiarizzare con l'uso del paradenti durante il loro spazzolamento senza supervisione a casa. Ad ogni partecipante verranno fornite istruzioni sia verbali che scritte, per consentire loro di inserire correttamente il paradenti sotto supervisione; il posizionamento dello scudo gengivale verrà controllato da un membro del personale dello studio, seguito da una spazzolatura supervisionata dei denti superiori.

Alla visita di riferimento, i partecipanti che soddisfano i criteri di inclusione/esclusione riceveranno un dentifricio al fluoro (Colgate Regular) e uno spazzolino da denti (Oral-B) da utilizzare per tutta la durata dello studio. Tutti i trattamenti saranno senza supervisione a casa del soggetto. Ai partecipanti verrà fornito un diario del partecipante alla visita di screening per verificare la conformità con lo spazzolamento dei denti durante il periodo di studio. Alla visita di base i volontari che hanno completato con successo i criteri di inclusione/esclusione continueranno a completare il diario del partecipante per la conformità con lo spazzolamento dei denti due volte al giorno, i prodotti di test e controllo e il posizionamento della protezione gengivale sopra i denti inferiori quando si lavano i denti superiori durante lo studio. Quei partecipanti che non soddisfano i criteri di inclusione/esclusione restituiranno il diario insieme al dentifricio al fluoro e allo spazzolino da denti alla visita di base.

I partecipanti saranno istruiti ad astenersi da tutti i metodi di pulizia dei denti nella mascella inferiore (mandibola) per due settimane a parte il dentifricio al fluoro fornito dal centro studi. Verrà fabbricato uno stent in acrilico morbido (protezione gengivale) per coprire i denti nella mascella inferiore (mandibola) mentre si lavano i denti nella mascella superiore (mascella) e verrà rimosso 10 minuti dopo la spazzolatura. Lo stent morbido può essere facilmente inserito e rimosso senza disturbare lo sviluppo della placca, garantendo al tempo stesso che i partecipanti non si lavino i denti inferiori e quindi interrompano la formazione della placca. Le valutazioni dell'indice gengivale modificato (MGI) (Lobene et al. 1986) saranno effettuate prima delle altre valutazioni poiché si tratta di una valutazione non invasiva. Al basale e dopo due settimane (+ 14 giorni) verranno sondati quattro siti/dente (mesiale, medio-buccale, distale e linguale) utilizzando il Gingival Bleeding Index [GBI]) come definito da Saxton & van der Ouderaa (1989) per valutare lo stato di salute della gengiva. Il sondaggio dopo una settimana di accumulo di placca sarà evitato poiché il sanguinamento nella fessura gengivale può influenzare lo sviluppo del biofilm. Tuttavia, i campioni non invasivi di fluido crevicolare gengivale (GCF) saranno raccolti a tutti gli intervalli di tempo prima delle misurazioni BOP o del campionamento della placca poiché è stato dimostrato che il volume di GCF (Kistler et al. 2013) aumenta prima dello sviluppo di clinicamente evidente infiammazione, ad es. GBI. I campioni GCF saranno raccolti dai siti mesio-buccali di 4 siti selezionati (due denti in ciascun quadrante della mascella inferiore [mandibolare]) su strisce periorali (ProFlow Inc. Amityville, NY) (Thunell et al. 2010). La striscia verrà applicata nel solco gengivale per 30 secondi per raccogliere un campione di fluido GCF standardizzato. I campioni GCF verranno raggruppati da 4 siti di ciascun partecipante come indicato sopra in ogni momento e analizzati su base individuale. Verrà registrato il numero di siti con placca chiaramente visibile dopo la scoperta dei denti nella mascella inferiore (mandibolare) (Quigley-Hein modificata) (Turesky et al. 1970). La placca verrà raccolta dalle superfici buccali e linguali dei denti nella mandibola inferiore (mandibola) escludendo i terzi molari da ciascun partecipante utilizzando una curette sterile e collocata in provette con soluzione salina satura-tampone DMSO. I campioni di placca ei campioni di GCF in provette con soluzione salina tamponata con fosfato (PBS) saranno trasportati su ghiaccio secco e conservati a -80°C. Tutte le valutazioni e la raccolta dei campioni saranno effettuate da personale addestrato e calibrato. Dopo due settimane, tutti i partecipanti che completano lo studio riceveranno una profilassi dentale a seguito della raccolta dei campioni e verrà chiesto di riprendere il normale regime di igiene orale.