Rapporto FSH/LH come predittore dell'esito della fecondazione in vitro nelle donne giovani e anziane

Tutte le donne avevano una cavità uterina normale determinata da una precedente isterosalpingografia o isteroscopia. Sono state escluse le donne con Gn anormalmente basso come ipogonadismo ipotalamico, LH alto come PCOS e le donne con funzioni endocrine anormali come funzioni tiroidee o surrenali anormali. È stata esclusa anche qualsiasi donna con cisti ovarica o partner maschile azopermico.

I pazienti sono stati sottoposti all'anamnesi, compresa l'età, la durata, il tipo e la causa dell'infertilità e la storia medica. È stato eseguito un esame completo, compreso l'esame generale, addominale e vaginale, seguito da una valutazione ecografica per la presenza di 3 o più follicoli preantrali e l'esclusione delle cisti ovariche.

È stata eseguita la valutazione ormonale basale del giorno 3 per FSH, LH ed E2 in un ciclo naturale. I livelli di E2, FSH e LH sono stati determinati utilizzando il sistema Immulite (Siemens Healthcare diagnostics, Regno Unito). I coefficienti di variazione intra e inter-test erano del 15% e 16% per E2, 4,8% e 26% per LH. La sensibilità analitica dell'FSH era di 0,1 mIU/ml.

Tutti i partecipanti sono stati sottoposti a lungo protocollo. Iniezione SC giornaliera di Triptorelina: Decapeptyl 0,1 mg (Ferring, Svizzera) 0,1 mg iniziato il giorno 21 del ciclo prima del ciclo di stimolazione e continuato fino al giorno dell'iniezione di hCG. La stimolazione Gn è iniziata dopo aver soddisfatto i criteri di avvio della stimolazione di endometrio sottile <5 mm e basso E2 <50 e LH <5IU/l [18] con HMG (Menogon; Ferring, Svizzera) o rFSH (Gonal-f; Merck Serono, Germania) in una dose iniziale di 150-300 UI/die a seconda dell'età del paziente e della precedente risposta alle gonadotropine. quindi la dose è stata aggiustata in base alla risposta ovarica monitorata dal siero E2 e dalla valutazione ecografica. Tutte le pazienti sono state seguite mediante ecografia transvaginale giornalmente oa giorni alterni in base alla risposta ovarica al trattamento a partire dal giorno del ciclo di trattamento (6) per la follicolometria e lo spessore e il pattern dell'endometrio.

Attivazione con HCG 10000 UI IM (Pregnyl, Organon, Paesi Bassi) quando almeno 2 follicoli hanno raggiunto un diametro medio di 18 mm [18]

L'annullamento del ciclo è stato deciso quando l'ecografia transvaginale il giorno del ciclo (9) non ha rivelato un'adeguata crescita follicolare (<3 follicoli maturi).

Il prelievo dell'ovulo (OPU) è stato effettuato 34-36 ore dopo l'iniezione di hCG sotto guida ecografica transvaginale.

Sono stati analizzati gli ociti in metafase II. La procedura ICSI è stata eseguita in tutti i casi. La fecondazione è stata valutata 16-18 ore dopo l'ICSI e la qualità dell'embrione è stata valutata 2 e 3 giorni dopo che l'ICSI è stata determinata in base al numero di blastomeri e al grado di frammentazione e multinucleazione[19]. Gli ovociti sono stati raccolti e gli embrioni sono stati coltivati ​​nel mezzo di coltura ISM1 (Origio medicult media, Danimarca).

Il trasferimento degli embrioni scissi è stato effettuato il giorno 3 dopo il prelievo degli ovociti (utilizzando il catetere semirigido Labotect; labotect GmbH, Germania) Tutti i pazienti hanno ricevuto supporto luteale sotto forma di progesterone giornaliero (Prontogest, Amsa, Italia) 100 mg IM al giorno a partire dal giorno del recupero dell'ovulo [18] fino al giorno del test hCG. Il livello sierico di β hCG è stato valutato il giorno 14 dopo ET.

I parametri di esito primari valutati erano la gravidanza clinica (definita come la presenza di sacco gestazionale contenente cuori fetali all'ecografia). Altri parametri includevano il verificarsi di gravidanze multiple, aborto e casi ectopici per gravidanze, dose di Gn, durata della stimolazione, livelli di E2 e di progesterone al giorno dell'attivazione dell'HCG, spessore endometriale al giorno dell'attivazione dell'HCG, numero di follicoli > 16 mm, numero di follicoli recuperati, numero di ovociti fecondati, numero di buoni ET e tasso di cancellazione.

I partecipanti sono stati divisi in base all'età in 2 gruppi: Gruppo 1<35 anni che sono ulteriormente suddivisi in base al rapporto FSH/LH in G1A con rapporto FSH/LH <2 e G1B con rapporto FSH/LH ≥2. Gruppo 2 ≥ 35 anni che sono ulteriormente suddivisi in base al rapporto FSH/LH in G2A con rapporto FSH/LH <2 e G2B con rapporto FSH/LH ≥2. L'uso del valore soglia è supportato da studi precedenti [20,21]