Isolamento delle cellule polmonari circolanti nella BPCO e sua relazione con esiti clinici rilevanti (IbICEnCa) (IbICEnCa)

1. IPOTESI 1.1. IPOTESI PRINCIPALE.

   • L'isolamento dei CPC è frequente nei pazienti con BPCO e anche (a un livello inferiore) nei fumatori senza BPCO, ma non è possibile nei non fumatori sani.
   • L'isolamento dei CPC è correlato a importanti esiti clinici nella BPCO. 1.2. IPOTESI SECONDARIA.
   • L'isolamento dei CPC nella BPCO è correlato a un più alto tasso di declino della funzione polmonare, misurato dai cambiamenti del FEV1 durante un periodo di 3 anni.
   • L'isolamento dei CPC nella BPCO è correlato a misure indirette dell'enfisema (DLCO e kCO).
   • L'isolamento dei CPC nei pazienti con BPCO è correlato a un rischio più elevato di riacutizzazioni durante il follow-up.
   • L'isolamento dei CPC nella BPCO è correlato a un maggior carico di sintomi, misurato da questionari standardizzati come CAT (COPD Assessment Test) e mMRC (modified Medical Research Council Scale).
   • L'isolamento dei CPC nella BPCO è più frequente man mano che la malattia progredisce verso una malattia più grave.
   • L'isolamento dei CPC nella BPCO è correlato a una maggiore estensione di enfisema radiologico, misurato dalla %LAA (percentuale di aree a bassa attenuazione).
2. RISULTATI. 2.1. RISULTATO PRIMARIO 2.1.1. Valutare la prevalenza dell'isolamento di CPC nel sangue periferico di pazienti affetti da BPCO, controlli sani fumatori e non fumatori con una tecnica brevettata di biopsia liquida.

2.2. RISULTATI SECONDARI 2.2.1. Stabilire se ci sono differenze tra i tassi di isolamento dei CPC da pazienti con BPCO, controlli sani fumatori e non fumatori 2.2.2. Valutare la relazione tra l'isolamento dei CPC e il grado di distruzione parenchimale ed empisema espresso come DLCO e kCO.

2.2.3. Valutare la relazione tra l'isolamento dei CPC e il grado di enfisema espresso come misurazioni della scansione TC (% LAA).

2.2.4. Valutare la relazione tra il declino storico del FEV1 e l'isolamento dei CPC nei pazienti con BPCO.

2.2.5. Valutare la relazione tra il declino prospettico del FEV1 a 1 anno e l'isolamento dei CPC nei pazienti con BPCO.

2.2.6. Valutare l'impatto dell'isolamento dei CPC sul deterioramento della HRQoL nella BPCO utilizzando i punteggi CAT al basale e la variazione rispetto al basale durante il follow-up di 1 anno.

2.2.7. Valutare il tasso di riacutizzazioni moderate e gravi durante il follow-up di 1 anno tra i pazienti con BPCO con e senza isolamento dei CPC dopo aggiustamento per le variabili confondenti 2.2.8. Valutare il tempo alla prima riacutizzazione moderata e grave durante il follow-up di 1 anno tra pazienti con BPCO con e senza isolamento dei CPC dopo aggiustamento per variabili confondenti.

2.2.9. Valutare il tasso di esacerbazioni moderate e gravi durante il follow-up di 1 anno tra soggetti con e senza isolamento dei CPC dopo aggiustamento per variabili confondenti 2.2.10. Valutare se ci sono differenze nel tasso di isolamento dei CPC tra quei pazienti con BPCO ad esordio precoce (definiti come quelli con BPCO prima dei 60 anni di età) e quelli con BPCO ad esordio normale (definiti come quelli con BPCO dopo i 60 anni di età).

2.2.11. Valutare il tempo alla prima riacutizzazione moderata e grave durante un anno di follow-up tra soggetti con e senza isolamento dei CPC dopo aggiustamento per variabili confondenti 2.2.12. Valutare l'impatto dell'isolamento dei CPC sul deterioramento della HRQoL nei soggetti fumatori utilizzando i punteggi CAT al basale e la variazione rispetto al basale durante il follow-up di 1 anno.

2.2.13. Valutare la relazione tra il declino prospettico del FEV1 a 1 anno e l'isolamento dei CPC nei controlli fumatori e non fumatori. 3. MATERIALE E METODI 3.1. DISEGNO DELLO STUDIO Questo studio è concepito come uno studio osservazionale, longitudinale, con un follow-up di un anno che recluta i partecipanti in un ambulatorio di pazienti con problemi respiratori.

3.2. POPOLAZIONE IN STUDIO. 3.2.1. Sani non fumatori (n=20): adulti di età superiore ai 35 anni, mai fumatori, senza patologie respiratorie significative.

3.2.2. Fumatori sani (n=30): adulti di età ≥ 35 anni, ex o attuali fumatori con una storia di fumo di almeno 10 pacchetti-anno, con funzionalità polmonare normale (FEV1/FVC >0,70 e FEV1 e FVC > 80% del predetto ).

3.2.3. Pazienti con BPCO (n=100): adulti di età ≥ 35 anni, ex fumatori o attuali fumatori con una storia di fumo di almeno 10 pacchetti-anno, con una diagnosi di BPCO precedente di 2 anni (FEV1/FVC postbroncodilatatore < 0,7) e regolari inalazioni trattamento.

3.3. CRITERI DI INCLUSIONE ED ESCLUSIONE: 3.3.1. Criteri di inclusione 3.3.1.1. Adulti di età >35 anni. 3.3.1.2. Pazienti che hanno fornito il consenso informato scritto 3.3.1.3. Assenza di infezione respiratoria o esacerbazione della BPCO nelle 4 settimane precedenti alla visita basale.

3.3.2. Criteri di esclusione 3.3.2.1. Altre condizioni respiratorie oltre alla BPCO, come precedente diagnosi di asma bronchiale, apnea ostruttiva del sonno, fibrosi polmonare idiopatica, tubercolosi polmonare, deficit di alfa1 antitripsina.

3.3.2.2. Storia di cancro attuale o precedente (anche se al paziente è stata diagnosticata >5 anni e non vi è evidenza di recidiva della malattia).

3.3.2.3. Riluttanza a eseguire test di funzionalità polmonare o TAC. 3.3.2.4. Partecipazione a un altro studio sperimentale o sperimentazione clinica. 3.4. VARIABILI DI STUDIO. 3.4.1. Variabili demografiche: dati demografici su sesso, età, caratteristiche antropometriche, etnia.

3.4.2. Abitudini tossiche: consumo di tabacco (espresso in pacchetti-anno), fumatore attuale o precedente, storia di abuso di alcol, storia di abuso di droghe.

3.4.3. Anamnesi: patologie pregresse e concomitanti, età dalla diagnosi, storia di malattie cardiovascolari, storia di sindrome metabolica, indici di comorbidità (indice di Charlson, indice COTE).

3.4.4. Trattamento farmacologico: attuali trattamenti farmacologici orali (dose, frequenza e storia dell'esposizione), attuali trattamenti inalatori (dose, frequenza e storia dell'esposizione) classificati come monoterapia LAMA, monoterapia LABA, ICS/LABA FDC, ICS/LABA non FDC, LAMA/LABA FDC, LAMA/LABA non FDC, terapia singola tripla (ICS/LABA/LAMA FDC), terapia tripla divisa (ICS/LABA più LAMA), iPDE4.

3.4.5. Trattamento non farmacologico: uso di ossigeno (ore giornaliere, tempo dalla prima prescrizione, flusso di ossigeno), ventilazione meccanica non invasiva (uso quotidiano, tempo dalla prima prescrizione), riabilitazione polmonare.

3.4.6. Variabili della BPCO: età alla diagnosi, fenotipo della BPCO (frequenti riacutizzazioni, bronchite cronica, enfisema predominante, ACO), grado GOLD 2017 (A-B-C-D) gravità della limitazione del flusso aereo (basata sul FEV1% del predetto), gravità della malattia basata su punteggi multidimensionali (BODE , indici BODEx), declino della funzione polmonare (dai 2 anni precedenti alla fine del follow-up di un anno, espresso come tasso annualizzato di declino del FEV1 in mL/anno).

3.4.7. Riacutizzazioni della BPCO: le riacutizzazioni moderate sono definite come un cambiamento dei sintomi respiratori che va oltre la variazione giornaliera e richiede la prescrizione di corticosteroidi sistemici e/o antibiotici. Le riacutizzazioni gravi sono definite come un cambiamento dei sintomi respiratori che va oltre la variazione giornaliera e richiede un ricovero ospedaliero o PS per più di 24 ore.

3.4.8. Test di funzionalità polmonare (PFT):

• Misurazioni spirometriche (FEV1 mL, FEV1% predetto, FVC mL, FVC% predetto, FEV1/FVC) e post broncodilatatore (∆ FEV1 mL; ∆ FEV1%) dopo inalazione di 400 mcgr di salbutamolo.
• Misurazioni di plettismografia corporea: FRC (espressa come mL e % predetta), RV (espressa come mL e % predetta), TLC (espressa come mL e % predetta) e rapporto RV/TLC.
• Trasferimento della capacità di diffusione per misure di CO: DLCO (espresso in numeri assoluti e % prevista), kCO (espresso in numeri assoluti e % prevista).

3.4.9. Risultati riportati dai pazienti (PRO): punteggio CAT® (test di valutazione della BPCO), scala della dispnea mMRC (modificata dal Medical Research Council) 3.4.10. Variabili di imaging: verrà eseguita una scansione TC a basso dosaggio in ciascuno dei partecipanti nel gruppo di fumatori sani e BPCO, al fine di determinare l'estensione delle aree di enfisema (espresse come %LAA- percentuale di aree a bassa attenuazione) e il compartimento delle vie aeree (espresso ad %WA- larghezza della parete delle vie aeree).

3.4.11. Biomarcatori del sangue: in ogni partecipante verrà prelevato un campione di sangue periferico per determinare gli eosinofili del sangue periferico (espressi come conta totale degli eosinofili e percentuale dalla conta totale dei leucociti), PMN periferico (espresso come conta totale dei PMN e percentuale dalla conta totale dei leucociti) , CPR (proteina C-reattiva) e fibrinogeno.

3.4.12. Isolamento dei CPC nel sangue periferico: la tecnica di isolamento dei CPC sopra descritta è attualmente protetta da una domanda di brevetto spagnola provvisoria (P201730724)