Cellule CAR-20/19-T in pazienti con neoplasie a cellule B refrattarie recidivanti

CRITERI GENERALI DI INCLUSIONE PER TUTTI I PAZIENTI

1. I pazienti devono avere un'età ≥18 anni e ≤80 anni con linfoma non-Hodgkin a cellule B recidivato o refrattario.
2. Conteggio assoluto del cluster di differenziazione 3 (CD3) ≥50 mm^3.
3. Puntura cerebrale e lombare con risonanza magnetica (MRI) con analisi del liquido cerebrospinale (CSF) mediante citologia e citometria a flusso senza evidenza di coinvolgimento del sistema nervoso centrale (SNC) SOLO in pazienti con storia di coinvolgimento del SNC o sospetto clinico al momento dell'arruolamento.
4. La malattia misurabile deve essere documentata entro quattro settimane dal momento del consenso definita come lesioni linfonodali maggiori di 15 mm nell'asse lungo o lesioni extranodali >10 mm nell'asse lungo e corto OPPURE coinvolgimento del midollo osseo che è dimostrato dalla biopsia per NHL a cellule B ( vedere criteri separati per CLL).
5. Punteggio di prestazione Karnofsky ≥70.
6. Adeguata funzionalità epatica, definita come aspartato aminotransferasi (AST) e alanina aminotransferasi (ALT) <5 x limite superiore della norma (ULN); bilirubina sierica e fosfatasi alcalina <5 x ULN, o considerati non clinicamente significativi a discrezione del PI clinico (ad es. di Gilbert o iperbilirubinemia indiretta) o ritenuto dovuto a una malattia di base.
7. ANC≥1000 senza G-CSF entro 72 ore o G-CSF pegilato entro 14 giorni.
8. Piastrine ≥50.000 senza trasfusione entro 72 ore.

9. Funzionalità renale adeguata, definita come clearance della creatinina > 60 ml/min E Cr sierica ≤ 1,5 mg/dL.

   1. Nessuna idratazione IV entro 24 ore dall'idoneità.
   2. Nessuna insufficienza renale dipendente dalla dialisi entro tre mesi dall'infusione di CAR pianificata.
10. In grado di fornire il consenso informato scritto.
11. Accetta di praticare il controllo delle nascite durante lo studio.
12. Funzionalità cardiaca adeguata come indicato dalla classificazione I o II della New York Heart Association (NYHA) E frazione di eiezione ventricolare sinistra ≥45% (mediante ecocardiogramma cardiaco (ECHO) o scansione di acquisizione multigate (MUGA)) e funzionalità polmonare adeguata come indicato dall'aria ambiente saturazione di ossigeno ≥92%.
13. Sopravvivenza attesa > 12 settimane.
14. Test di gravidanza su urina o siero negativo nelle donne in età fertile all'ingresso nello studio.
15. Soddisfare i criteri relativi alla fertilità e alla contraccezione.
16. Nessuna controindicazione all'accesso alla linea centrale.
17. Il paziente ha dimostrato compliance ad altre terapie.

Fase 1: CRITERI DI AMMISSIBILITA' COORTE 3+3

1. Diagnosi di NHL a cellule B inclusi linfoma follicolare, linfoma della zona marginale (splenico, linfonodale, extranodale), linfoma mantellare e DLBCL con sottotipi associati (linfoma aggressivo a cellule B, linfoma a cellule B di alto grado, linfoma a cellule T/ricco di istociti linfoma a cellule B, linfoma primario a cellule B del mediastino, linfoma diffuso a grandi cellule B positivo al virus di Epstein-Barr (EBV+), linfoma trasformato come zona follicolare o marginale trasformata e trasformazione di Richter).

2. I pazienti devono avere una malattia attiva e misurabile come definito e soddisfare uno dei seguenti criteri.

   1. Deve aver ricevuto Rituximab o un altro cluster di anticorpo di differenziazione 20 (CD20) e almeno due diversi regimi chemioterapici appropriati per la loro malattia e non essere idoneo a ricevere il trapianto autologo.
   2. Ricaduta post-trapianto autologo
   3. Ricaduta post-trapianto allogenico
   4. Pazienti non precedentemente trattati con terapia cellulare CAR-T

CRITERI DI AMMISSIBILITA' DI COORTE FASE 1b e 2

BRACCIO A: espansione da sei a nove pazienti con produzione in 8 giorni (fase 1b)

1. Diagnosi di NHL a cellule B incluso linfoma follicolare, linfoma della zona marginale (splenico, linfonodale, extranodale) e DLBCL con sottotipi associati (linfoma aggressivo a cellule B, linfoma a cellule B ricco di cellule T/istociti, linfoma a cellule B primario del mediastino , linfoma diffuso a grandi cellule B EBV+, linfoma trasformato come zona follicolare o marginale trasformata e trasformazione di Richter).

2. I pazienti devono avere una malattia attiva e misurabile come definito e soddisfare uno dei seguenti criteri:

   1. Deve aver ricevuto Rituximab o un altro cluster di anticorpo di differenziazione 20 (CD20) e almeno due diversi regimi chemioterapici appropriati per la loro malattia e non essere idoneo a ricevere il trapianto autologo.
   2. Ricaduta post-trapianto autologo.
   3. Ricaduta post-trapianto allogenico.
   4. Recidiva post-anti-cluster di differenziazione 19 (CD19) Terapia cellulare CAR-T.

   io. In questa coorte saranno ammessi un massimo di due pazienti con precedente CAR-T.

   BRACCIO B: espansione da sei a nove pazienti con produzione in 12 giorni (fase 1b)

1. Diagnosi di NHL a cellule B inclusi linfoma follicolare, linfoma della zona marginale (splenico, linfonodale, extranodale) e DLBCL con sottotipi associati (linfoma aggressivo a cellule B, linfoma a cellule B ad alto grado, linfoma a cellule B ricco di cellule T/istociti linfoma cellulare, linfoma primitivo a cellule B del mediastino, linfoma diffuso a grandi cellule B EBV+, linfoma trasformato come zona follicolare o marginale trasformata e trasformazione di Richter).

2. I pazienti devono avere una malattia attiva e misurabile come definito e soddisfare uno dei seguenti criteri:

1. Deve aver ricevuto Rituximab o un altro anticorpo CD20 e almeno due diversi regimi chemioterapici appropriati per la loro malattia e non essere idoneo a ricevere il trapianto autologo.
2. Ricaduta post-trapianto autologo.
3. Ricaduta post-trapianto allogenico.
4. Recidiva post-terapia cellulare CAR-T anti-CD19.

io. In questa coorte saranno ammessi un massimo di due pazienti con precedente CAR-T.

BRACCIO C: braccio di produzione flessibile per crioconservazione da 12 pazienti 8/12

1. Diagnosi di NHL a cellule B inclusi linfoma follicolare, linfoma della zona marginale (splenico, linfonodale, extranodale) e DLBCL con sottotipi associati (linfoma aggressivo a cellule B, linfoma a cellule B di alto grado, linfoma a cellule B ricco di cellule T/istociti) , linfoma primitivo a cellule B del mediastino, linfoma diffuso a grandi cellule B EBV+, linfoma trasformato come zona follicolare o marginale trasformata e trasformazione di Richter).
2. I pazienti devono avere una malattia attiva e misurabile come definito e soddisfare uno dei seguenti criteri a. Deve aver ricevuto Rituximab o un altro anticorpo CD20 e almeno due diversi regimi chemioterapici appropriati per la loro malattia e non essere idoneo a ricevere il trapianto autologo b. Ricaduta post-trapianto autologo c. Ricaduta post-trapianto allogenico d. Ricaduta post terapia cellulare CAR-T anti-CD19 i. In questa coorte saranno ammessi un massimo di 2 pazienti con precedente CAR-T

BRACCIO D: Fase 1 e Fase 1b: CLL

1. Diagnosi di CLL a cellule B o leucemia linfocitica piccola (SLL)
2. Fallimento/progressione o intolleranza a due precedenti linee di terapia, una delle quali DEVE essere un inibitore covalente di BTK (ad es. ibrutinib, acalabrutinib, zanabrutinib, ecc.) o inibitori di BCL2 (ad es. venetoclax o altro BCL sperimentale2)

3. Indicazione per il trattamento come definito come uno dei seguenti:

   1. linfonodi misurabili ≥ 1,5 cm nel diametro trasverso maggiore e/o epatomegalia o splenomegalia)
   2. coinvolgimento del midollo osseo con coinvolgimento di LLC ≥10%.

Coorte di fase II: linfoma a cellule del mantello

1. Diagnosi di linfoma mantellare. 2. I pazienti devono avere una malattia attiva e misurabile come definita in precedenza e una malattia recidivante e refrattaria come definita come uno dei seguenti:

1. Malattia recidivante dopo due linee di chemioterapia citotossica inclusa la somministrazione di anticorpi anti-CD20.
2. Malattia progressiva dopo inibitore della tirosin-chinasi (BTK) di seconda linea ≥ di Bruton.
3. Ricaduta post-trapianto autologo.
4. Ricaduta post-trapianto allogenico.
5. Recidiva post terapia cellulare CAR-T anti-CD19.

io. In questa coorte saranno ammessi un massimo di quattro pazienti con storia di CAR-T anti-CD19 precedente.

CRITERI DI ESCLUSIONE (TUTTI I PAZIENTI)

Un potenziale soggetto che soddisfi uno dei seguenti criteri di esclusione non è idoneo a partecipare allo studio.

1. Beta gonadotropina corionica umana positiva (HCG) in donne in età fertile.
2. Virus dell'immunodeficienza umana (HIV) attivo confermato, infezione da epatite B o C.
3. Storia di malattia autoimmune significativa OPPURE fenomeno autoimmune attivo e incontrollato che richiede una terapia steroidea definita come> 20 mg di prednisone o equivalente al giorno.
4. Presenza di tossicità non ematologiche di grado ≥ 3 come da CTCAE versione 5.0 da qualsiasi trattamento precedente, a meno che non si ritenga che siano dovute a una malattia di base.
5. Uso concomitante di agenti terapeutici sperimentali o iscrizione a un'altra sperimentazione clinica terapeutica presso qualsiasi istituzione. Minimo 14 giorni o 5 emivite del farmaco (qualunque sia più breve) prima dell'aferesi.
6. Rifiuto di partecipare al protocollo di follow-up a lungo termine

7. Pazienti con coinvolgimento attivo del SNC per tumore maligno alla risonanza magnetica o per puntura lombare.

   UN. I pazienti con precedente malattia del sistema nervoso centrale che è stata trattata in modo efficace saranno idonei a condizione che il trattamento sia stato> 4 settimane prima dell'arruolamento e una remissione documentata entro 8 settimane dall'infusione di cellule CAR-T pianificata mediante risonanza magnetica cerebrale e analisi del liquido cerebrospinale.

8. I precedenti destinatari di trapianto allogenico di cellule staminali emopoietiche (AHCT) sono esclusi se sono <100 giorni post-trapianto, hanno evidenza di malattia del trapianto contro l'ospite attiva (GVHD) di qualsiasi grado o sono attualmente in immunosoppressione.
9. Precedente terapia con cellule CAR T allogeniche

10. I precedenti destinatari di terapia con cellule CAR-T autologhe diretta a CD19 o CD20 sono esclusi se sono <100 giorni dopo il precedente trattamento con cellule CAR-T (non include il re-arruolamento) o hanno > 5% CAR-T circolante residuo come misurato mediante citometria a flusso utilizzando un reagente di rilevamento CD19 CAR (Miltenyi Biotec)

    UN. I pazienti con precedente trattamento CAR-T contro CD19 o CD20 devono sottoporsi a biopsia ripetuta dopo terapia cellulare CAR-T che confermi almeno il 5% di positività CD19 o CD20 mediante immunoistochimica o citometria a flusso

11. Trattamento con anticorpi anti-CD20 entro 4 settimane dall'infusione cellulare
12. Trattamento con anticorpi anti-CD19 entro 4 settimane dall'infusione cellulare
13. Chemioterapia citotossica diversa dalla linfodeplezione entro 14 giorni dall'infusione di cellule CAR-T
14. Trattamento chemioterapico citotossico entro 14 giorni o trattamento steroideo (diverso dalla dose sostitutiva di steroidi) entro 7 giorni prima della raccolta dell'aferesi per le cellule CAR-T

15. Agenti chemioterapici orali o trattamento diretto con anticorpi entro 7 giorni dall'aferesi

    UN. Gli inibitori di BTK sono consentiti fino a 1 giorno prima dell'aferesi e possono riprendere fino a 1 giorno prima della linfodeplezione

16. Pazienti sottoposti a trapianto di organi solidi che sviluppano linfomi o leucemie di alto grado
17. Tumore maligno attivo concomitante diverso dai carcinomi a cellule basali o squamose della pelle (sottostante linfoma leucemia linfocitica cronica/linfoma follicolare (FL)/linfoma della zona marginale (MZL) è consentito nei pazienti con linfoma a grandi cellule trasformato)

CRITERI SPECIALI RIGUARDANTI LA FERTILITÀ E LA CONTRACCEZIONE

Soggetti di sesso femminile con potenziale riproduttivo (donne che hanno raggiunto il menarca o donne che non sono state in post-menopausa per almeno 24 mesi consecutivi, cioè che hanno avuto le mestruazioni nei 24 mesi precedenti, o che non sono state sottoposte a procedura di sterilizzazione [isterectomia o ovariectomia]) deve avere un test di gravidanza su siero o urina negativo eseguito come parte dei criteri di ammissibilità A causa dell'alto livello di rischio di questo studio, durante l'arruolamento, tutti i soggetti devono accettare di non partecipare a un processo di concepimento (ad esempio, tentativo attivo di diventare gravidanza o fecondazione, donazione di sperma, fecondazione in vitro). Inoltre, se partecipa ad attività sessuali che potrebbero portare alla gravidanza, il soggetto dello studio deve accettare di utilizzare metodi contraccettivi affidabili e a doppia barriera durante il periodo di follow-up del protocollo.

Il controllo delle nascite accettabile include una combinazione di due dei seguenti metodi:

• Preservativi (maschili o femminili) con o senza agente spermicida.
• Diaframma o cappuccio cervicale con spermicida
• Dispositivo intrauterino (IUD)
• Contraccezione a base ormonale I soggetti che non sono in grado di riprodursi (donne in premenarca o post-menopausa da almeno 24 mesi consecutivi o che hanno subito isterectomia legatura delle tube, salpingectomia e/o ooforectomia bilaterale o uomini che hanno documentato azoospermia) sono ammissibili senza richiedere l'uso di contraccettivi