Il possibile effetto neuroprotettivo di Ocrelizumab tramite l'espressione della proteina VEGF nei pazienti con sclerosi multipla recidivante

Ocrelizumab (OCR) è un anticorpo monoclonale umanizzato anti-CD20 approvato dalla FDA nel 2017 e dall'Agenzia europea per i medicinali nel 2018 per il trattamento di pazienti adulti con sclerosi multipla recidivante (RMS). Inoltre, avendo mostrato effetti neuroprotettivi, l'OCR è il primo farmaco mai approvato per il trattamento precoce della SM Primaria Progressiva (PPMS). Attualmente, si ritiene che l'OCR agisca principalmente attraverso il rapido esaurimento delle cellule B che esprimono CD20. Inoltre, questa deplezione molto probabilmente causa cambiamenti di lunga durata nel profilo delle cellule B, caratterizzati da una riduzione del loro fenotipo pro-infiammatorio, come dimostrato con altri anticorpi anti-CD20.

Di interesse, studi precedenti su altri farmaci anti-CD20, principalmente rituximab, hanno dimostrato che gli agenti anti-CD20 esercitano anche effetti interessanti su ulteriori percorsi di segnalazione intracellulare, come quelli che coinvolgono serina/treonina e tirosina chinasi, nonché c-myc. Considerando le somiglianze strutturali, farmacocinetiche e farmacodinamiche tra OCR e rituximab, si può ipotizzare che l'efficacia dell'OCR nel ritardare la progressione della malattia e la neuroprotezione possa derivare anche da tali effetti intracellulari.

Tra i vari effetti intracellulari suscitati da rituximab attraverso il legame con CD20, la stimolazione della via della proteina chinasi C (PKC) è di potenziale importanza. Il termine PKC comprende una famiglia di diverse serina/treonina protein chinasi la cui isoforma β è stata implicata in processi patologici, come la retinopatia diabetica, attraverso una specifica via PKCβ/HuR/Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) (Amadio et al. 2010). In particolare, HuR appartiene a una famiglia di proteine ​​​​leganti l'RNA, denominate ELAV, che sono in grado di influenzare praticamente qualsiasi aspetto del destino post-sintesi delle trascrizioni mirate, incluso VEGF.

Il VEGF è una molecola di segnalazione coinvolta in processi vitali come l'angiogenesi, la proliferazione endoteliale e la risposta cellulare all'ipossia. Il possibile ruolo del VEGF nella patogenesi e nell'evoluzione della SM non è stato esplorato fino a poco tempo fa, ma prove crescenti portano alla conclusione che il VEGF potrebbe svolgere un ruolo nocivo significativo nella fase recidivante della SM, ad esempio mediando un aumento della barriera emato-encefalica (BBB) ​​permeabilità, mentre svolge un ruolo benefico e neuroprotettivo nella fase tardiva e progressiva della malattia. Da notare che VEGF ha un ruolo primario nel promuovere l'iperpermeabilità vascolare, infatti attraverso la fosforilazione delle proteine ​​​​della giunzione stretta endoteliale modula la loro degradazione, portando infine alla rottura della BBB. Inoltre, regola anche la crescita dei vasi ed è chemiotattico per monociti e linfociti, promuovendo la neuroinfiammazione.

Di interesse, un aumento significativo del VEGF è stato osservato nei topi nella fase acuta della SM murina indotta da MOG, che è correlato al punteggio clinico, e nei sieri dei pazienti con SM durante le recidive della malattia clinica.

Sulla base di queste considerazioni, è possibile che l'OCR eserciti un ulteriore effetto benefico nella terapia della SM modulando il contenuto di VEGF.

Con questo progetto, miriamo a esplorare gli effetti dell'OCR sulle vie di segnalazione intracellulare valutando l'espressione di VEGF nelle cellule mononucleari del sangue periferico (PBMC) dei pazienti con RMS all'inizio della terapia OCR, nonché a 6 e 12 mesi di trattamento in corso.

In particolare, lo scopo dello studio è quello di concentrarsi sul VEGF-A 165 pro-angiogenico, che sembra l'isoforma principalmente coinvolta come mediatore dell'infiammazione e dell'immunità cellulare.

Inoltre, la cascata PKCβ/HuR sarà studiata nelle stesse condizioni. In secondo luogo, l'attività della malattia durante il trattamento OCR sarà esaminata in ogni fase e confrontata con i livelli di VEGF e PKC.

I risultati potrebbero anche dimostrare la necessità di determinare ulteriormente l'entità e il significato degli effetti intracellulari della terapia anti-CD20 nella SM.

Questo studio è uno studio osservazionale (fase 4), longitudinale, monocentrico e a braccio singolo, in pazienti con RMS a cui è stata recentemente prescritta OCR come da pratica clinica.

Lo studio si compone delle seguenti visite come da prassi clinica:

• Basale/inizio (T0): firma del consenso informato, verifica dei criteri di inclusione/esclusione, caratteristiche demografiche, anamnesi clinica, terapie concomitanti, anamnesi neurologica (storia della SM), numero di recidive dall'insorgenza della SM, esame neurologico, Stato di Disabilità Esteso Scale (EDSS), Multiple Sclerosis Severity Score (MSSS), campione di sangue, somministrazione di ocrelizumab.
• T6: (dopo 6 mesi di trattamento OCR) eventi avversi (incluse ricadute), esame neurologico, modifiche terapeutiche, EDSS, MSSS, prelievo di sangue, somministrazione di ocrelizumab.
• T12 (dopo 12 mesi* di trattamento OCR), eventi avversi (comprese le ricadute), esame neurologico, modifiche terapeutiche, EDSS, MSSS, campione di sangue, somministrazione di ocrelizumab.