Diagnostica di precisione della patologia intestinale funzionale e organica basata sul profilo cellulare e molecolare

SPERIMENTALE: Profilazione diagnostica di precisione

Lo studio coinvolgerà soggetti con diagnosi confermata endoscopicamente, di laboratorio e clinicamente di patologia intestinale organica e funzionale o nessuna delle precedenti (volontari sani). Tutte le diagnosi sono definite in conformità con i criteri convalidati presentati nelle linee guida cliniche per la diagnosi e il trattamento della patologia funzionale dell'intestino (sindrome dell'intestino irritabile), 2020, morbo di Crohn (approvato dal Ministero della Salute della Federazione Russa, 2020), malattia ulcerosa Colite (approvato dal Ministero della Salute della Federazione Russa, 2020), secondo i criteri internazionali delle Linee Guida ECCO-ESGAR, 2018, 2019. Dopo lo screening iniziale e l'inclusione nello studio, i campioni di biopsia intestinale vengono prelevati secondo la tecnica di esame endoscopico applicata durante l'esame endoscopico. Questi campioni di biopsia saranno ulteriormente utilizzati per la diagnostica molecolare e immunologica.

Test diagnostico: diagnostica cellulare e molecolare in accordo con i risultati dei test funzionali

Procedura: Manometria anorettale (ARM) Gli studi vengono eseguiti nella posizione laterale sinistra con le anche e le ginocchia del soggetto flesse. Il sensore manometrico registra la pressione circonferenziale. La base del palloncino rettale attaccato al catetere ARM è situata 3-5 cm al di sopra del bordo superiore del canale anale, per evitare che il palloncino colpisca il canale anale durante il gonfiaggio. Il sensore di registrazione più distale è esterno al bordo anale. Se si avverte dolore o disagio, la sonda viene immediatamente ritirata.

Procedura: test sensoriale rettale (RST) Il test viene eseguito anche in posizione laterale sinistra con anche e ginocchia flesse. Gli studi vengono condotti con un palloncino integrato sulla sonda manometrica o con un sistema separato. La capacità del palloncino non è inferiore a 400 ml e tutti i componenti sono privi di lattice. L'insufflazione viene sempre eseguita con aria. Per la distensione a rampa, la velocità deve essere compresa tra 1 e 5 mL/s, mentre per la distensione fasica, la velocità di gonfiaggio deve essere impostata a 10 mL/s (C1).

Cambiamenti del profilo metabolico in pazienti con malattie intestinali funzionali e organiche

Valutazione del metaboloma (analisi gascromatografica con estrazione in fase vapore). I parametri metabolici (acido tetradecanoico, acido idracinnamico, acido esadecanoico, acido esanoico, indolo, acido pentanoico) saranno misurati nelle feci mediante analisi gascromatografica con metodo di estrazione in fase vapore. I metodi di estrazione dei metaboliti vengono eseguiti secondo il protocollo standard di isolamento dei metaboliti. I metaboliti sopra menzionati saranno misurati in intensità della corrente ionica del metabolita analizzato, normalizzata alla corrente ionica totale secondo i metodi standardizzati.

Cambiamenti del profilo genetico in pazienti con malattie intestinali funzionali e organiche

Valutazione del profilo genetico (valutazione del polimorfismo del rischio). Valutazione dei polimorfismi di rischio: NOD2 (rs2066844, rs2066845, rs17221417), ATG16L1 (rs2241880), IL23R (rs2201841) saranno eseguiti nella frazione leucocitaria dei campioni di sangue secondo i metodi standardizzati. Il rischio relativo risultante sarà valutato in base ai dati sui rischi relativi per ciascuno dei suddetti polimorfismi.

Alterazioni del profilo immunologico (locale) in pazienti con patologie intestinali funzionali ed organiche

Valutazione del profilo delle citochine locali mediante il pannello di screening delle citochine umane Bio-plex Pro (27 citochine, concentrazioni misurate in pg/ml). Il profilo delle citochine locali sarà valutato nella biopsia intestinale liofilizzata. Tutte le concentrazioni di citochine saranno misurate in pg/ml.

Alterazioni del profilo immunologico (sistemico) in pazienti con patologie intestinali funzionali ed organiche

Valutazione del profilo delle citochine sistemiche mediante il pannello di screening delle citochine umane Bio-plex Pro (27 citochine, concentrazioni misurate in pg/ml). Il profilo sistemico delle citochine sarà valutato mediante analisi del siero. Tutte le concentrazioni di citochine saranno misurate in pg/ml.

Cambiamenti nei parametri funzionali - RST in pazienti con malattie intestinali funzionali e organiche

Valutazione strumentale del RST durante l'esame funzionale. Questa è la procedura che valuta la sensibilità rettale alla distensione utilizzando il palloncino attaccato alla punta del catetere. La procedura viene eseguita secondo il protocollo di manometria IAPWG standardizzato (2020). La misura sarà effettuata in ml.

La misurazione quantitativa del volume del palloncino viene registrata per ciascuna delle tre soglie sensoriali riferite dal paziente: primo volume di sensazione costante (FCSV), volume del desiderio di defecare (DDV) e volume massimo tollerato (MTV).

Cambiamenti del parametro funzionale - ARM in pazienti con malattie intestinali funzionali e organiche

Valutazione strumentale dell'ARM durante l'esame funzionale. La procedura viene eseguita secondo il protocollo di manometria IAPWG standardizzato (2020). La misurazione verrà eseguita in mmHg.