Confronto di diversi agenti chelanti singoli e combinati sulla penetrazione del sigillante e sull'erosione della dentina.

Raccolta dati I premolari permanenti estratti sono stati raccolti dal dipartimento di chirurgia orale e maxillo-facciale del Dow Dental College (DDC, DUHS) e dal Dr. Ishrat-ul-Ebad Khan Institute of Oral Health Sciences (DIKIOHS, DUHS). Dopo l'estrazione, i denti sono stati puliti con acqua di rubinetto per tutti i detriti visibili e conservati in timolo allo 0,1% a 4°C fino a ulteriore utilizzo.

METODOLOGIA

I premolari permanenti estratti sono stati raccolti dal dipartimento di chirurgia orale e maxillo-facciale del Dow Dental College (DDC, DUHS) e dal Dr. Ishrat-ul-Ebad Khan Institute of Oral Health Sciences (DIKIOHS, DUHS). I denti sono stati puliti con l'aiuto di un ablatore ad ultrasuoni per eventuali detriti visibili, resti di tessuti molli e calcolo e successivamente esaminati al microscopio operatorio dentale per eventuali crepe o fratture visibili. I denti che presentavano fratture, craze lines, difetti di sviluppo sono stati scartati secondo i criteri di esclusione. Sono state eseguite radiografie periapicali digitali (PA) a tre diverse angolazioni (45, 90 e 120) per confermare la presenza di un singolo canale diritto all'interno della radice. Dopo aver soddisfatto i criteri sopra menzionati, sono stati selezionati cento denti e conservati in timolo allo 0,1% a 4°C fino a ulteriore utilizzo.

Preparazione delle soluzioni:

1. Timolo = 1 grammo di cristalli di timolo sono stati prelevati e sciolti in 50 ml di etanolo. Dopo la dissoluzione, questa soluzione è stata portata a 1 litro con acqua distillata.
2. Acido maleico al 7% = 7 grammi di acido maleico in polvere sono stati sciolti in 100 ml di acqua distillata per ottenere il 7% di acido maleico.
3. Acido etidronico al 18% / ipoclorito di sodio al 5,25% = Per il 18%, prendere 75 ml di soluzione standard e aggiungere 175 ml di acqua distillata in un volumetrico per ottenere un totale di 250 ml di HEBP. Entrambi gli irriganti sono stati miscelati in rapporto 1:1. Quindi, 250 ml di acido etidronico sono stati mescolati in 250 ml di ipoclorito di sodio.

Preparazione del campione Tutti i campioni sono stati preparati da un singolo operatore utilizzando il seguente protocollo. Una lunghezza della radice standardizzata di 16 mm è stata misurata con l'aiuto di un calibro Vernier. Dopo la standardizzazione i denti sono stati decoronati con disco diamantato in un manipolo a bassa velocità. L'apertura dell'accesso è stata eseguita utilizzando una fresa tonda diamantata collegata al manipolo ad alta velocità (D&G). Il canale è stato esplorato utilizzando una lima da 10 K (Mailefer/Dentsply) finché la sua punta non è diventata visibile nel forame apicale. Quindi, la lunghezza di lavoro è stata stabilita come 1 mm più corta del forame apicale anatomico. Successivamente l'apice è stato sigillato con colla a caldo per simulare la condizione di apice chiuso in vivo. Il canale è stato preparato utilizzando ProTaper gold (Dentsply-Sirona Switzerland). È stata utilizzata una sequenza standard di file. Sono state utilizzate le lime di sagomatura SX , S1 , S2 e le lime di finitura F1 , F2 e F3. Un ago con sfiato laterale calibro 30 è stato utilizzato per irrigare NaOCl al 5,25% dopo ogni file consecutivo. Dopo la pulizia e la modellatura con le lime sopra menzionate, tutti i denti sono stati divisi in cinque gruppi.

Assegnazione di gruppo I campioni sono stati assegnati in modo casuale in cinque gruppi. Quattro sperimentali e un gruppo di controllo. Per la randomizzazione è stato utilizzato un foglio generato dal computer (MS Excel).

Gruppo 1: Acido etilendiamminotetraacetico (EDTA); (n = 20) Gruppo 2: SmearOFF; (n = 20) Gruppo 3: acido maleico (MA); (n = 20) Gruppo 4: acido etidronico/ipoclorito (HEBP/ NaOCl); (n = 20) Gruppo 5: Soluzione salina; (n=20)

In ogni gruppo il protocollo di irrigazione finale sarebbe il seguente

1. Gruppo 1: EDTA = 5,25% NaOCl è stato utilizzato durante la strumentazione e 5 ml di EDTA utilizzati per 1 minuto come risciacquo finale.
2. Gruppo 2: smearOFF = 5,25% di NaOCl durante la strumentazione e 5 ml di smearOFF come risciacquo finale.
3. Gruppo 3: acido maleico = 5,25% di NaOCl durante la strumentazione e sono stati utilizzati 5 ml di MA per 1 minuto come risciacquo finale
4. Gruppo 4: acido etidronico/ipoclorito = miscela 1:1 di 18% HEBP / 5,25% NaOCL è stata utilizzata durante la strumentazione e la stessa miscela come risciacquo finale per 1 minuto

4. Gruppo 5: soluzione salina = 0,9% è stata utilizzata durante la strumentazione e come risciacquo finale per 1 minuto

I suddetti gruppi sperimentali (Gruppo 1: EDTA, Gruppo 2: SmearOFF, Gruppo 3: MA, Gruppo 4: HEBP/NaOCl sono stati risciacquati con soluzione salina per creare un ambiente isotonico. Dopo l'irrigazione finale tutti i canali sono stati asciugati con punte di carta assorbente. Da qui, tutti i campioni sono stati divisi in due gruppi: penetrazione del sigillante ed erosione della dentina.

Preparazione del campione per la penetrazione del sigillante:

Da ciascun gruppo sperimentale e di controllo i denti sono stati selezionati casualmente e otturati utilizzando la tecnica della condensazione verticale calda. Dopo che i canali sono stati asciugati, è stata eseguita l'otturazione utilizzando la tecnica della condensazione verticale a caldo utilizzando AH plus sigillante. Il cono premontato è stato leggermente rivestito con sigillante AH plus e inserito nel canale; quindi, è stato attivato un plugger riscaldato e posizionato in un punto a 4-5 mm dalla lunghezza di lavoro e rimossa la porzione coronale del cono master. Successivamente, è stato eseguito il down-pack. Il restante canale radicolare è stato riempito utilizzando un sistema di guttaperca iniettabile (EQ-V) ed è stata eseguita la compattazione verticale. La parte coronale è stata sigillata con cemento vetroionomerico. I campioni sono stati tenuti a 37 °C e al 100% di umidità per 7 giorni in un incubatore per consentire la completa impostazione del sigillante. Dopo 7 giorni i campioni sono stati prelevati dall'incubatore. I denti sono stati poi incorporati in stampi di resina epossidica per formare blocchi di resina di dimensioni uniformi.

Preparazione dei vetrini Dopo che la resina è stata completamente indurita, i campioni sono stati sezionati trasversalmente a 2 mm (terzo apicale), 5 mm (terzo medio) e 8 mm (terzo coronale) dall'apice con l'ausilio di una lama da 0,3 mm utilizzata nella sega diamantata ( Leco VC-50). Sono state ottenute tre sezioni dello spessore di 1 mm ciascuna. La finitura è stata eseguita con l'aiuto di carta vetrata al carburo di silicio e la lucidatura è stata eseguita utilizzando una lucidatrice. Per rimuovere i detriti organici (in), i campioni sono stati puliti in un bagno con EDTA al 15% per 2 minuti e poi NaOCl al 3% per 2 minuti. I campioni sono stati posti alla luce solare per 24 ore per avere campioni privi di umidità.

Analisi della penetrazione del sigillante nei tubuli dentinali

I denti sezionati sono stati contrassegnati a 2 mm, 5 mm e 8 mm. Quindi i campioni sono stati montati su stub metallici e spruzzati al titanio con Auto Fine Coater: JEC-3000FC. Il rivestimento è stato eseguito con una corrente di 20 mA per 30 secondi. Al microscopio elettronico a scansione (SEM JAPAN) modello n. software JSM-IT 100: sono state scattate fotomicrografie in ambito tattile. Un osservatore cieco indipendente ha esaminato i campioni per la penetrazione del tubulo dentinale dei sigillanti a tre livelli: 2,5 e 8 mm dall'apice della radice. Di ciascun campione è stata prelevata una microfotografia più rappresentativa della sezione dall'interfaccia root-sealer con un ingrandimento di 550x. Su ciascuna di queste microfotografie è stata misurata la profondità minima e massima di penetrazione del sigillante nei tubuli.

Preparazione del campione per l'erosione della dentina

Da ciascun gruppo sperimentale sono stati selezionati casualmente 50 denti. Dopo aver eseguito la pulizia e la sagomatura, tutti i canali sono stati asciugati con punte di carta assorbente. Sono stati preparati due solchi longitudinali sulle superfici buccali e linguali di ciascuna radice utilizzando un disco diamantato senza penetrare nei canali. Le radici sono state divise in due metà usando scalpello e mazzuolo. La metà contenente la parte più visibile del canale è stata presa per la valutazione. Quindi, i campioni sono stati contrassegnati a 2 mm (terzo apicale), 5 mm (terzo medio) e 8 mm (terzo coronale) dall'apice.

Analisi dell'erosione della dentina

Il rivestimento dei campioni è stato eseguito con rivestimento in platino per la valutazione al SEM. Quindi i campioni sono stati esaminati al SEM con ingrandimento x2000. Le fotomicrografie sono state scattate a ogni terzo. Il punteggio delle microfotografie è stato eseguito secondo i criteri di Torabinejad da due osservatori indipendenti. Successivamente è stata eseguita l'analisi EDX per determinare il contenuto totale di calcio e fosforo e l'alterazione di Ca/P causata da vari irriganti.